r>[012引
[0129] 稳定性试验：
[0130] 发明人对实施例1的达比加群醋己醇酸盐和达比加群醋甲礙酸盐在不同温度、湿 度和光照条件下进行观察并作含量测定，数据见表2和表3。
[0131] 液相条件：
[0132]色谱柱；AgelaVenusilMPC18 柱（4. 6mmX250mm，5um)N0:VA952505-0
[0133] 流动相；0.Olmol·L1磯酸氨二倭缓冲液-甲醇（40:60);
[0134] 流速；1ml·min1 ;检测波长；250nm;柱温；25°C进样量；20μ1
[0135] 表2达比加群醋己醇酸盐及达比加群醋甲礙酸盐等的含量变化
[0136]
[0137] 表2为达比加群醋己醇酸盐及甲礙酸盐的含量经影响因素试验结果的对比。数据 表明，在相同条件下（高温、高湿、光照），前者的含量随时间变化很小，属于测定误差范围， 而后者在高湿条件下很不稳定，尤其在10天高湿条件下会降解为50%左右，表现出明显的 不稳定性。
[0138] 表3达比加群醋己醇酸盐及达比加群醋甲礙酸盐的外观变化
[0139]
[0140] 从表3可知，高温条件下，达比加群醋己醇酸盐几乎无变化，而达比加群醋甲礙酸 盐可W观察到颜色随时间产生明显变化。高湿条件下，前者的外观几乎不变，表现出更加稳 定的性质，而后者则吸潮严重。
[0141] 连施例7
[0142] 本实施例用于说明达比加群醋甲礙酸盐与达比加群醋己醇酸盐的抗凝血作用的 对比。
[0143] 对3-[(2-{4-(己氧基撰基氨基-亚氨基-甲基）-苯氨基]-甲基}-l-甲基-IH 苯并咪哇-5-撰基）-化巧-2-基-氨基]-丙酸己醋-己醇酸盐（实施例1制备得到） 与3-[(2-{4-(己氧基撰基氨基-亚氨基-甲基）-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪 哇-5-撰基）-化巧-2-基-氨基]-丙酸己醋-甲礙酸盐抗凝血作用对比研究。试验方法 如下：
[0144] 取体重为（20 ± 2)g健康的昆明种小鼠，随机分为3组，每组10只，雌雄各半，给药 方式为：
[0145] 空白组--给等体积生理盐水
[0146] 对照组一给药甲礙酸盐（1. 186mg/kg按活性物质计算）
[0147] 治疗组一给药己醇酸盐（1. 186mg/kg按活性物质计算）
[0148] 在实验室中喂养2天后进行试验，对小鼠的灌胃体积为0. 25mL24h后用己離麻醉， 在距小鼠尾尖3cm处剪断，血液自然流出。用滤纸在小鼠尾尖轻轻廳血，每分钟一次，直至 血液出现拉丝现象为止，送时血液出现有凝固状况，每次试验都W同样的拉丝现象为基准， 记录时间。测得结果如表4所示。
[0149] 表4抗凝血时间（均数+标准差，η= 10)
[0150]
[0151] W上数据表明，本发明实施例1所示的3-[(2-{4-(己氧基撰基氨基-亚氨基-甲 基）-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1Η苯并咪哇-5-撰基）-化巧-2-基-氨基]-丙酸己醋-己 醇酸盐的抗凝血对比评价数据优于3-[(2-{4-(己氧基撰基氨基-亚氨基-甲基）-苯氨 基]-甲基} -1-甲基-1Η苯并咪哇-5-撰基）-化巧-2-基-氨基]-丙酸己醋-甲礙酸盐， 具有统计学意义。
[015引连施例8
[0153] 本实施例用于说明达比加群醋甲礙酸盐与达比加群醋己醇酸盐的药代动力学对 比结果。
[0154] 对3- [ (2- {4-(己氧基撰基氨基-亚氨基-甲基）-苯氨基]-甲基} -1-甲基-1Η 苯并咪哇-5-撰基）-化巧-2-基-氨基]-丙酸己醋-己醇酸盐（实施例1制备得到） 与3-[(2-{4-(己氧基撰基氨基-亚氨基-甲基）-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1Η苯并咪 哇-5-撰基）-化巧-2-基-氨基]-丙酸己醋-甲礙酸盐药代动力学对比研究。试验方法 如下：
[01巧]取体重为（200 + 20)g健康的SD大鼠，随机分为3组，每组10只，雌雄各半，给药 方式为：
[0156] 对照组一给药甲礙酸盐化945mg/kg按活性物质计算，该剂量是根据徐叔云教 授主编的《药理实验方法学》中人与动物体表面积比值剂量比计的下同）；
[0157] 治疗组一给药己醇酸盐化945mg/kg按活性物质计算）。
[015引 灌胃给药，给药后分别于10、15、25、35、45、60、120、180、240、360min尾静脉取血， 放置于4°C冰箱中储存，样品通过有机溶剂萃取，真空干燥，后溶解于二次蒸傭水中，进行HPLC分析。测得结果如表5所示。
[0159] 表5达比加群醋甲礙酸盐与达比加群醋己醇酸盐的药代动力学对比
[0160]
[0161] 表5结果表明；本发明实施例1所示的3-[(2-{4-(己氧基撰基氨基-亚氨基-甲 基）-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪哇-5-撰基）-化巧-2-基-氨基]-丙酸己 醋-己醇酸盐与3-[(2-{4-(己氧基撰基氨基-亚氨基-甲基）-苯氨基]-甲基}-1-甲 基-1H苯并咪哇-5-撰基）-化巧-2-基-氨基]-丙酸己醋-甲礙酸盐在体内的药代参数 值相似，无显著性差异（P〉〇. 05)。
[016引连施例9
[0163] 本实施例用于说明达比加群醋甲礙酸盐与达比加群醋己醇酸盐的急性毒性对比 结果。
[0164] 对3- [ (2- {4-(己氧基撰基氨基-亚氨基-甲基）-苯氨基]-甲基} -1-甲基-1H 苯并咪哇-5-撰基）-化巧-2-基-氨基]-丙酸己醋-己醇酸盐（实施例1制备得到） 与3-[(2-{4-(己氧基撰基氨基-亚氨基-甲基）-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪 哇-5-撰基）-化巧-2-基-氨基]-丙酸己醋-甲礙酸盐急性毒性对比研究。试验方法如 下：
[016引采用2000mg.kgi作为固定给药剂量，CD-1小鼠，10化雌雄各半，达比加群醋 甲礙酸盐给药组和达比加群醋己醇酸盐给药组按2000mg.kg1的剂量口服给药，W0. 5% CMCNa(駿甲基纤维素钢）为空白溶媒对照组。每日观察动物的生存率和给药后14日内的 毒性反应。分别在第1、8、15日记录每只动物的体重（给药前平均体重为20. 2 + 1. 67g)。 所有动物于瀬死前或第15日处死，并进行尸体剖检。主要结果如表6所示：
[0166] 表6急性毒性试验对比结果
[0167]
[016引与溶媒对照组相比，甲礙酸盐给药组在观察期内动物出现自主活动降低，俯邸、呼 吸吃力、眼险变小、竖毛等非特异性毒性反应，动物的尸检结果可见消化道，甲状腺，和膜腺 出血，动物死亡可能与出血相关。己醇酸盐组在给药当天及给药后的14天观察期内动物运 动情况、眼险指征、呼吸、皮毛、排泄物和分泌物等均未见明显异常。观察期结束，动物进行 大体剖检，动物的头部、体表、皮下及颈部检查均未见明显异常，所有脏器未见明显出血现 象，动物死因不明。
[0169]W上数据表明，本发明实施例1所示的3-[(2-{4-(己氧基撰基氨基-亚氨基-甲 基）-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪哇-5-撰基）-化巧-2-基-氨基]-丙酸己 醋-己醇酸盐的急性毒性对比评价数据明显优于3- [ (2- {4-(己氧基撰基氨基-亚氨基-甲 基）-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪哇-5-撰基）-化巧-2-基-氨基]-丙酸己 醋-甲礙酸盐。
[0170] 连施例10
[0171] 本实施例用于说明达比加群醋甲礙酸盐与达比加群醋己醇酸盐的3个月重复灌 胃给药的长期毒性对比结果。
[0172] 对3- [ (2- {4-(己氧基撰基氨基-亚氨基-甲基）-苯氨基]-甲基} -1-甲基-1H苯并咪哇-5-撰基）-化巧-2-基-氨基]-丙酸己醋-己醇酸盐（实施例1制备得到） 与3-[(2-{4-(己氧基撰基氨基-亚氨基-甲基）-苯氨基]-甲基}-1-甲基-1H苯并咪 哇-5-撰基）-化巧-2-基-氨基]-丙酸己醋-甲礙酸盐3个月长期毒性对比研究。观察 连续3个月重复灌胃给药对大鼠产生的毒性作用，判断毒性的性质、程度、剂量反应关系和 可逆性，预测可能的毒性祀器官或祀组织。
[0173] 试验方法如下：
[0174] 达比加群醋甲礙酸盐及本发明的达比加群醋己醇酸盐分别按0、10、40、160mg/kg 的剂量设置给药组并口服给药，W0. 5%CMCNa为空白溶媒对照组。每个给药组有大鼠24 只，雌雄各半；各给药组大鼠经灌胃给药，每周给药6天，每日给药1次，每日观察动物给药 后的异常反应，每周进行1次体重和进食量检查，给药前5周，每周中期增加一次体重测量； 给药3个月和药后恢复30天后，每组分别随机选择1/2的实验动物，雌雄各半，进行血液、 生化、电解质、凝血、大体剖检、脏器重量、组织病理学检查，各组检测结果分别与溶剂对照 组进行比较，综合分析供试品对大鼠各项检查指标的影响。
[0175] 主要结果：①给药期间达比加群醋甲礙酸盐高剂量组死亡率巧/24)高于达比加 群醋己醇酸盐组（1/24);②达比加群醋甲礙酸盐高剂量组大鼠体重和进食量与达比加群 醋己醇酸盐组相比均明显降低（P<〇.05,表7);⑨达比加群醋