(l.lmmoL)7-氯苯并[b]-[l，10]邻菲咯 啉及30mL丙酮，回流溶解后加入0. 275gNaSCN(3. 3mmoL)和0. 075g(0. 23mmoL)四丁基溴 化铵，回流反应3h后，有黄色固体粉末析出，抽滤，水洗涤后得到化合物7-苯并[b]-[l，10] 邻菲咯啉异硫氰酸酯，94% ;
[0026] 步骤四，在100mL圆底烧瓶中，加入0.24g(0.8mmoL)化合物7-苯并[b]-[l，10] 邻菲咯啉异硫氰酸酯和35mL乙腈，后加入ImmoL苯甲酰肼，回流反应2h，反应过程中有大量 固体析出，冷却抽滤得金黄色固体即为7-苯并[b]-[l，10]邻菲咯啉吡啶甲酰胺基硫脲，产 率 57.2%，m.p.l75-181°C^HNMlUDMSO-dfsdOOMΗζ)，δ:12.89 (br，s，lH，-NH)，12.41 (br， s，1H，-NH)，11. 07(br，s，1H，-NH)，10. 99(s，1H，ArH)，10. 22(d，1H，J= 9· 0,ArH)，9· 09(d， 1H，J= 8. 5，ArH)，8. 82(s，lH，ArH)，8. 64(d，2H，J= 7. 2，ArH)，8. 47(d，1H，J= 7. 2，ArH)， 8. 24-8. 36 (m，2H，ArH)，7. 86-7. 96 (m，2H，ArH)，7. 83 (d，1H，J= 7. 2,ArH)，7. 77 (d，1H，J= 7. 2,ArH)，7. 66-7. 74(m，2H，ArH);13C匪R(DMS0-d6,100MHz)，δ189. 70,170. 21，150. 34， 149. 89,145. 21，134. 38,133. 78,133. 42,132. 18,131. 29,130. 55,130. 21，129. 67,129. 27， 128. 54,127. 64,126. 79,124. 35,123. 78 ;该药物可以制成药学上的常见剂型，包括制成注 射剂、片剂、丸剂、胶囊、悬浮剂或乳剂。
[0027] 实施例2
[0028] 体外抗肿瘤活性实验
[0029] 一、细胞的培养和传代
[0030] 所选细胞株均置于37°C、5%C02充分湿化条件下的培养箱中，接种于含10%灭活 新生牛血清的PPMI1640培养液中培养。用倒置显微镜观察细胞生长情况，每周更换2~3 次培养基，6~7天传代一次，接种时以0. 25%胰蛋白酶消化传代，通常取传代3~4次，处 于对数生长期细胞用于实验。
[0031] 二、药液的配制
[0032] 准确称取被测样品，加到灭菌的1. 5mL离心管中，加入DMS0配成2mM化合物储备 液，-20°C冷冻保存。临用前融化后用适量D-hanks稀释成相应浓度应用。实验测定选用的 化合物浓度分别为20uM。
[0033] 三、MTT实验方法
[0034] 取处于对数生长期的细胞，每孔180uL(约4500-5000个细胞）含细胞的培养基接 种于96孔培养板，于37°C、5%C02充分湿化条件下培养24h。待细胞贴壁后，按每孔20uL 的量加入样品，每个样品设6个复孔，同时设定相应的空白对照。继续培养48h后，每孔加 入10uLMTT试剂（浓度为2mg/mL)，继续孵育4h后，吸弃上清液，每孔再加入150uLDMS0， 轻微震荡反应5-8min，使结晶颗粒充分溶解。空白对照组调零，用酶标仪以490nm波长测定 去除本底光吸收值后的吸光度值（A值），用5个浓度梯度做相应细胞株的IC5。值，所有实 验均重复3次后取平均值。
[0035] 表1 7-苯并[c]吖啶苯甲酰胺基硫脲对肿瘤细胞株的半数有效浓度（IC5。）
[0036]
[0037]表1
[0038] 从实施例2的结果可以看出，本发明的7-苯并[b]_[l，10]邻菲咯啉吡啶甲酰胺 基硫脲经体外抗肿瘤实验表明，该化合物具有强的抗肿瘤活性。本发明为研究开发新的吖 啶型抗肿瘤药物提供了新的思路。
[0039] 尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列 运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地 实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下本发明并不限于 特定的细节。
【主权项】
1. 一种7-苯并[b]-[l，10]邻菲咯啉吡啶甲酰胺基硫脲，其特征在于，所述吖啶衍生物 的结构式为：2. -种如权利要求1所述7-苯并[b]-[l，10]邻菲咯啉吡啶甲酰胺基硫脲的制备方 法，其特征在于，由以下合成路线制得：3. 如权利要求2所述7-苯并[b]-[l，10]邻菲咯啉吡啶甲酰胺基硫脲的制备方法，具 体步骤为： 步骤一，按照重量份在容器中加入20-30份邻溴苯甲酸和30-40份8-氨基喹啉作为原 料，6-8份碳酸钾和0. 2-0. 4份铜粉为催化剂，继而加入20-50mL正戊醇或异戊醇作为溶剂， 加热至130-150 °C回流1. 5-3小时，反应结束后，减压蒸除溶剂，然后向固体残留物中加入 水继续继续反应15-30分钟，反应温度控制在70-90°C，过滤，将滤液调节pH，抽滤，得到化 合物N-喹啉基邻氨基苯甲酸； 步骤二，将得到的化合物N-喹啉基邻氨基苯甲酸与7-7. 5mL纯三氯氧磷混合，油浴加 热，反应1-3小时，制得化合物7-氯苯并[b]-[l，10]邻菲咯啉； 步骤三，在容器中加入0.2-0. 4份所述化合物7-氯苯并[b]-[l，10]邻菲咯啉和 25-35mL丙酮，回流溶解后加入0. 275份硫氰化钠和0. 0075份四丁基溴化铵，继续回流反 应2-4小时，至有黄色固体粉末析出，抽滤，水洗得到化合物7-苯并[b]-[l，10]邻菲咯啉 异硫氰酸酯； 步骤四，在容器中加入0. 2-0. 3份将化合物7-苯并[b]-[l，10]邻菲咯啉异硫氰酸酯 和20-40mL乙腈，然后加入异烟肼，回流反应1-3小时，反应过程中有大量黄色粉末固体析 出，抽滤洗涤后即得目标产物7-苯并[b]-[l，10]邻菲咯啉吡啶甲酰胺基硫脲。4. 如权利要求3所述7-苯并[b]-[l，10]邻菲咯啉吡啶甲酰胺基硫脲的制备方法，其 特征在于，所述步骤一中将滤液调节pH，向滤液中加入浓盐酸调节pH至1. 5-2. 5。5. 如权利要求3所述7-苯并[b]-[l，10]邻菲咯啉吡啶甲酰胺基硫脲的制备方法，其 特征在于，所述步骤二中化合物N-喹啉基邻氨基苯甲酸与三氯氧磷关环时，10-15min内油 浴加热至85-90°C ;当发生剧烈反应时，立即撤去热浴；若反应过于猛烈，可用冷水冷却烧 瓶，待沸腾趋缓，油浴温度升高至135~140°C，反应1-3小时。6. 如权利要求5所述7-苯并[b]-[l，10]邻菲咯啉吡啶甲酰胺基硫脲的制备方法，其 特征在于，所述步骤二中反应结束后，将剩余物倒入重量比为1 : 1-2 : 1-2的浓氨水、碎 冰和氯仿的混合物中，固体物溶解，分离出氯仿层，水层继续用氯仿萃取2-3次，合并氯仿 提取液，干燥10-24小时，过滤，蒸除溶剂，即得到化合物7-氯苯并[b]-[l，10]邻菲咯啉。7. -种7-苯并[b]-[l，10]邻菲咯啉吡啶甲酰胺基硫脲在制备抗肿瘤药物中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种7-苯并[b]-[1，10]邻菲咯啉吡啶甲酰胺基硫脲及其制备方法和用途，其结构式为在苯并[b]-[1，10]邻菲咯啉环的7-位上连接活性基团酰胺基硫脲结构，合成新型吖啶衍生物，具有极强的抗肿瘤活性，能够应用于抗肿瘤药物的制备中。
【IPC分类】A61P35/00, C07D471/04
【公开号】CN105418608
【申请号】CN201510870314
【发明人】霍丽妮, 陈睿, 李培源, 苏炜, 钟伟鹏, 覃方玲
【申请人】广西中医药大学
【公开日】2016年3月23日
【申请日】2015年12月2日