一种羊肚菌液体菌种的生产工艺的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及羊肚菌栽培技术领域，具体涉及羊肚菌液体菌种的生产工艺。
【背景技术】
[0002]羊肚菌又名羊肚菜，为羊肚菌属食用菌，是一种珍贵的食用菌和药用菌;羊肚菌的营养相当丰富，羊肚菌含抑制肿瘤的多糖，抗菌、抗病毒的活性成分，具有增强机体免疫力、抗疲劳、抗病毒、抑制肿瘤等诸多作用；羊肚菌是子囊菌中最著名的美味食菌，其菌盖部分含有异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸和缬氨酸7种人体必需的氨基酸，甘寒无毒，有益肠胃、化痰理气药效。羊肚菌的营养相当丰富，据测定，羊肚菌含粗蛋白20%、粗脂肪26%、碳水化合物38.1%，还含有多种氨基酸，特别是谷氨酸含量高达1.76%。因此，有人认为是“十分好的蛋白质来源”，并有“素中之荤”的美称。人体中的蛋白质是由20种氨基酸搭配而组成的，而羊肚菌就含有18种，其中8种氨基酸是人体不能制造的，但在人体营养上显得格外重要，所以被称之为“必需氨基酸”。另外，据测定羊肚菌至少含有8种维生素:维生素B1、维生素B2、维生素B12、烟酸、泛酸、吡哕醇、生物素、叶酸等。羊肚菌的营养成份，可与牛乳、肉和鱼粉相当。因此，国际上常称它为“健康食品”之一。羊肚菌含抑制肿瘤的多糖，抗菌、抗病毒的活性成分，具有增强机体免疫力、抗疲劳、抗病毒、抑制肿瘤等诸多作用；日本科学家发现羊肚菌提取液中含有酪氨酸酶抑制剂，可以有效地抑制脂褐质的形成。羊肚菌所含丰富的砸是人体红细胞谷胱甘肽过氧化酶的组成成分，可运输大量氧分子来抑制恶性肿瘤，使癌细胞失活;另方面能加强维生素E的抗氧化作用。砸的抗氧化作用能改变致癌物的代方向，并通过结合而解毒，从而减少或消除致癌的危险。羊肚菌既是宴席上的珍品，又是久负盛名的食补良品。羊肚菌性平、味甘，具有益肠胃、消化助食、化痰理气、补肾、壮阳、补脑、提神之功能，对脾胃虚弱、消化不良、痰多气短、头晕失眠有良好的治疗作用。羊肚菌有机锗含量较高，具有强健身体、预防感冒、增强人体免疫力的功效。由于羊肚菌是一种极为珍贵的野生菌，并可以作为食材在市面上出售，因此羊肚菌需要大面积的进行种植生产，而保持羊肚菌的优质高产需优良的羊肚菌菌种。
[0003]目前羊肚菌菌种仍采用原始的培育方法，培养基中各成分的搭配比例不合理，培育过程缺乏有效的控制和管理，不同原料的成分、颗粒大小和木质纤维物理结构不同，都会对食用菌菌种质量有重要的影响，研发一种能培养出优质羊肚菌的羊肚菌菌种成为本领域技术人员亟待解决的技术问题。
【发明内容】
[0004]本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。
[0005]为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种羊肚菌液体菌种的生产工艺，包括以下步骤:
[0006]步骤一、将羊肚菌纯菌种接种到斜面试管中的固体培养基上，并于22°C?24°C恒温培养5天?8天，得到斜面试管菌种；
[0007]步骤二、将羊肚菌液体菌种培养液输入高压脉冲处理室中，利用高压脉冲电场进行杀菌处理后输入三角瓶中，将斜面试管中的固体培养基上的菌种划分为小块，得到菌种块;然后将菌种块接种到三角瓶中，每个三角瓶中接种3块?6块菌种块;所述三角瓶使用前用紫外灯杀菌30?40min;
[0008]步骤三、将三角瓶放置于摇床上，在18°C?22°C下培养7天?9天，得到三角瓶液体菌种；
[0009]步骤四、将羊肚菌液体菌种培养液输入高压脉冲处理室中，利用高压脉冲电场进行杀菌处理后输入发酵罐中，将三角瓶液体菌种接种到发酵罐中；所述发酵罐使用前用紫外灯杀菌30?40min;
[0010]步骤五、往发酵罐中通入净化空气，通入净化空气后的压力为0.05MPa?0.15MPa，然后在19°C?23°C下培养6天?8天，即得到羊肚菌液体菌种。
[0011]优选的是，所述固体培养基的制备方法如下:每1000毫升水里放入12g?16g土豆淀粉，1g?15g琼脂，Ig?3g维生素B，0.5g?0.8g磷酸氢二钾，0.5g?0.8g硫酸镁，消泡剂
0.3g?0.5g，搅拌均为后，输入高压脉冲处理室中，利用高压脉冲电场进行杀菌处理，然后冷却，即得到所述固体培养基。
[0012]优选的是，所述羊肚菌液体菌种培养液包括以下重量份的各组分:可溶性淀粉30?50份、蛋白胨6?8份、七水硫酸镁0.4?0.6份、磷酸二氢钾0.8?1.2份、蔗糖8?12份、魔芋葡甘聚糖0.01?0.03份、有机砸添加剂0.5?I份、0.03?0.05份维生素B1、0.03?0.05份维生素B2、水800?1200份、消泡剂0.0I?0.03份、中药提取物0.2?0.5份;所述羊肚菌液体菌种培养液的pH值为6.5?6.8。
[0013]优选的是，所述有机砸添加剂包括以下重量份的各组分:人参果果汁30?50份、纳米纤维素8?10份、蛋白粉I?3份、亚砸酸钠I?3份、卡拉胶3?5份;维生素Cl?3份;甘氨酸亚铁3?5份、海藻酸钠5?8份。
[0014]优选的是，所述消泡剂为豆油或木肩粉。
[0015]优选的是，所述中药提取物的制备方法为:按重量份，取定草根20份，紫草茸20份，陈皮30份，石见穿25份，荆芥穗10份，甘草20份，板蓝根18份，鱼腥草17份，川芎10份，当归8份，地黄12份，研磨至300目药末;将研磨的药末放置于砂锅中加水，水量为药末重量的5?10倍，然后搅拌并煎熬60-90min，煎熬完成后提取药液，过滤冷却，即得中草药提取物。
[0016]优选的是，所述步骤二中，菌种块的长度和宽度均为2?2.5mm。
[0017]优选的是，所述高压脉冲处理室外围设置有冷水循环系统，其中循环冷水温度为10?15°C，水循环速度为0.2?1.0m/s;所述高压脉冲处理室中两极板的间距为0.5?3cm。
[0018]优选的是，所述高压脉冲电场杀菌处理的参数为:脉冲幅度为7?15KV，脉冲频率为800?1500Hz，脉冲宽度为6?1us，处理时间为40-80min。
[0019]优选的是，所述步骤三中，摇床的转速为160r/min?180r/min。
[0020]本发明至少包括以下有益效果:
[0021](I)本发明提供的一种羊肚菌液体菌种培养液，利用配方量的组分所配制的羊肚菌液体菌种培养液的pH值为6.5?6.8，该羊肚菌液体菌种培养液所具有的pH值非常适宜羊肚菌液体菌种的生长，能够缩短羊肚菌液体菌种的生长周期，增强羊肚菌液体菌种的活力。
[0022](2)采用高压脉冲电场进行杀菌处理，具有操作简单，稳定性好、杀灭力强，能有效破坏杂菌的生理活性酶，能有效杀灭羊肚菌生长过程中存在的各种霉菌和杂菌。
[0023]本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
【具体实施方式】
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[0024]下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
[0025]应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。
[0026]实施例1:
[0027]—种羊肚菌液体菌种的生产工艺，包括以下步骤:
[0028]步骤一、将羊肚菌纯菌种接种到斜面试管中的固体培养基上，并于22°C恒温培养6天，得到斜面试管菌种；
[0029]步骤二、将羊肚菌液体菌种培养液输入高压脉冲处理室中，利用高压脉冲电场进行杀菌处理后输入三角瓶中，将斜面试管中的固体培养基上的菌种划分为2mm的小块，得到菌种块;然后将菌种块接种到三角瓶中，每个三角瓶中接种6块菌种块;所述三角瓶使用前用紫外灯杀菌40min;所述高压脉冲处理室外围设置有冷水循环系统，其中循环冷水温度为15°C，水循环速度为1.0m/s;所述高压脉冲处理室中两极板的间距为0.5cm;所述高压脉冲电场杀菌处理的参数为:脉冲幅度为7KV，脉冲频率为1500Hz，脉冲宽度为6us，处理时间为40min；
[0030]步骤三、将三角瓶放置于转速为160r/min的摇床上，在18°C下培养7天?9天，得到三角瓶液体菌种；
[0031]步骤四、将羊肚菌液体菌种培养液输入高压脉冲处理室中，利用高压脉冲电场进行杀菌处理后输入发酵罐中，将三角瓶液体菌种接种到发酵罐中；所述发酵罐使用前用紫外灯杀菌40min;所述高压脉冲处理室外围设置有冷水循环系统，其中循环冷水温度为15°C，水循环速度为1.0m/s;所述高压脉冲处理室中两极板的间距为0.5cm;所述高压脉冲电场杀菌处理的参数为:脉冲幅度为7KV，