容器收纳体的制作方法_3

文档序号:9838420阅读:来源:国知局
容器100安装有盖110,但将盖110安装于柱塞部130是在(B)工序之后进行的。
[0117]更具体而言,向反应容器400的反应接收部404插入溶出容器300的溶出插入部302,向溶出容器300的溶出接收部304插入第三清洗容器230的第三插入部232,向第三清洗容器230的第三接收部234插入第二清洗容器220的第二插入部222,向第二清洗容器220的第二接收部224插入第一清洗容器210的第一插入部212,向第一清洗容器210的第一接收部214插入吸附容器100的吸附插入部122。
[0118](B)导入样品的工序
[0119]在导入工序中,例如将附着有样品的棉棒从吸附容器100的安装盖110的开口插入吸附液10之中,将该棉棒浸渍于吸附液10之中而进行。更具体而言,将棉棒从吸附容器100的位于插入注射部120状态下的柱塞部130的一侧的端部的开口插入。接下来,将棉棒从吸附容器100取出,并且安装盖110。这是图7(a)的状态。另外,样品也可以利用移液管等向吸附容器100导入。另外,若样品为糊状、固体状,例如也可以利用匙、镊子等使其附着于柱塞部130的内壁或向吸附容器100投入。如图7(a)所示,在注射部120以及柱塞部130之中,吸附液10填充到中途,但在供盖110安装的开口侧残留有空间。
[0120]在样品中含有成为靶的核酸。以下,有时将其简称为靶核酸。靶核酸例如是DNA和 / 或 RNA (DNA -Deoxyribonucleic Acid、和 / 或 RNA -Ribonucleic Acid)。在将革巴核酸从样品提取出来并溶出至后述的溶出液32之后,例如被用作PCR的铸模。作为样品,能够例举血液、鼻腔粘液、口腔粘膜、其他各种生物体试样等。
[0121](C)移动磁珠的工序
[0122]在移动磁珠30的工序中如下进行:在对如图7(a)所示那样被第二清洗容器220的第三油24、24夹持而以塞子状存在的磁珠30施加了配置于容器外部的磁铁3的磁力的状态下,使磁铁3朝向吸附容器100移动。
[0123]与该磁珠30的移动相配合、或者比此更早地使盖110以及柱塞部130向从注射部120抽出的方向移动,从而使吸附液10内的样品从柱塞部130内向注射部120内移动。通过该柱塞部130的移动,被前端部134关闭的流路2与吸附液10连通。
[0124]磁珠30随着磁铁3的移动在流路2内上升,如图7 (b)所示,到达存在样品的吸附液10内O
[0125](D)使核酸吸附于磁珠的工序
[0126]使核酸吸附的工序通过使吸附容器100摆动而进行。吸附容器100的开口被盖110封闭使得吸附液10不会泄漏,因此该工序能够高效地进行。通过该工序,靶核酸因离液剂的作用吸附于磁珠30的表面。在该工序中,在磁珠30的表面,也可以吸附除靶核酸以外的核酸、蛋白质。
[0127]作为使吸附容器100摆动的方法,可以使用公知的涡流振动筛等装置,也可以通过操作者的手振荡混合。另外,也可以一边利用磁珠30的磁性从外部施加磁场一边摆动吸附容器100。
[0128](E)移动吸附有核酸的磁珠的工序
[0129]在移动吸附有核酸的磁珠30的工序中,通过一边从吸附容器100、清洗容器200以及溶出容器300的外部施加磁铁3的磁力一边移动磁铁3,从而使磁珠30在吸附液10、第一油?第四油20、22、24、26以及第一清洗液?第三清洗液12、14、16之中移动。
[0130]磁铁3例如能够使用永久磁铁、电磁铁等。另外,磁铁3可以通过操作者的手进行移动,也可以利用机械装置等进行移动。磁珠30具有被磁力吸引的性质,因此利用该性质,使磁铁3相对于吸附容器100、清洗容器200以及溶出容器300的相对配置变化,使磁珠30在流路2内移动。磁珠30通过各清洗液时的速度并不特别限定,也可以使其在同一清洗液内沿流路2的长边方向往复地移动。此外,在使除磁珠30以外的粒子等在管内移动时,例如能够利用重力、电位差来进行移动。
[0131](F)使核酸溶出的工序
[0132]在使核酸溶出的工序中,在溶出容器300内,使核酸从磁珠30溶出至溶出液的液滴36。虽然图7中的溶出液32在溶出容器300的流路的较细部分作为塞子存在,但在如上述那样使磁珠30移动的期间,通过加热反应容器400使内置液膨胀,从而如图8所示那样作为液滴36在溶出容器300内向上方移动。而且,如图8(a)所示,若磁珠30到达溶出容器300的溶出液的液滴36,则吸附于磁珠30的靶核酸因溶出液的作用而溶出至溶出液的液滴36内。
[0133](G)与试剂34接触的工序
[0134]在与试剂34接触的工序中,使包含核酸的液滴36与位于反应容器400内的最下部的试剂34接触。具体而言,如图8(b)所示,通过推动盖110,利用柱塞部130的前端部134将第一油20按下,从而在将施加有磁铁3的磁力的磁珠30维持在规定位置的状态下,使溶出有靶核酸的溶出液的液滴36向反应容器400移动,与位于反应容器400的最下部的试剂34接触。与液滴36接触的试剂34溶解并与溶出液中的靶核酸混合,能够实施例如使用热循环的PCR。
[0135]4.PCR 装置
[0136]使用图9以及图10对使用容器组装体I进行核酸溶出处理和PCR的PCR装置50进行说明。图9是PCR装置50的简要结构图。图10是PCR装置50的框图。
[0137]PCR装置50具有旋转机构60、磁铁移动机构70、推压机构80、荧光测定器55以及控制器90。
[0138]4-1.旋转机构
[0139]旋转机构60包括旋转用马达66和加热器65,通过驱动旋转用马达66使容器组装体I以及加热器65旋转。旋转机构60使容器组装体I和加热器65旋转而上下反转,由此含有靶核酸的液滴在反应容器400的流路内移动,进行热循环处理。
[0140]加热器65包括未图示的多个加热器,例如能够包括溶出用、高温用以及低温用的加热器。溶出用加热器对容器组装体I的塞子状的溶出液进行加热,促进靶核酸从磁珠向溶出液溶出。高温用加热器将反应容器400的流路的上游侧的液体加热至比低温用加热器高的温度。低温用加热器对反应容器的流路的底部402进行加热。利用高温用加热器与低温用加热器,能够在反应容器400的流路内的液体中形成温度梯度。在加热器65设置有温度控制装置,该温度控制装置能够根据来自控制器90的指令将容器组装体I内的液体设定为适于处理的温度。
[0141]加热器65具有使反应容器400的底部402的外壁露出的开口。荧光测定器55从该开口测定溶出液的液滴的亮度。
[0142]4-2.磁铁移动机构
[0143]磁铁移动机构70是使磁铁3移动的机构。磁铁移动机构70将容器组装体I内的磁珠向磁铁3吸引,并且通过使磁铁3移动使磁珠在容器组装体I内移动。磁铁移动机构70具有一对磁铁3、升降机构以及摆动机构。
[0144]摆动机构是使一对磁铁3在图9的左右方向(也可以是图9的前后方向)摆动的机构。一对磁铁3以从左右方向夹着安装于PCR装置50的容器组装体I的方式配置(参照图7、图8),能够在与容器组装体I的流路正交的方向(这里为图9的左右方向)上使磁珠与磁铁3的距离接近。因此,若使一对磁铁3在左右方向如箭头那样摆动,则容器组装体I内的磁珠与磁铁3的动作相配合在左右方向移动。升降机构能够使磁铁3在上下方向移动,与磁铁3的移动相配合,使磁珠在图9的上下方向移动。
[0145]4-3.推压机构
[0146]推压机构80是推动容器组装体I的柱塞部的机构,通过推压机构80推动柱塞部,将溶出容器300内的液滴按出至反应容器400内,而能够在反应容器400内实施PCR。
[0147]在图9中,以推压机构80配置于直立的容器组装体I的上方的方式示出,但推压机构80推动柱塞部的方向也可以不是图9中的上下方向,例如也可以相对于上下方向倾斜45度。这样一来,容易将推压机构80配置于不与磁铁移动机构70发生干涉的位置。
[0148]4-4.荧光测定器
[0149]荧光测定器55是对反应容器400的液滴的亮度进行测定的测定器。荧光测定器55配置于与反应容器400的底部402对置的位置。此外,为了能够应对多重PCR(multiplexPCR),优选荧光测定器55能够检测多个波长域的亮度。
[0150]4-5.控制器
[0151]控制器90是对PCR装置50进行控制的控制部。控制器90例如具有CPU等处理器以及ROM、RAM等存储装置。在存储装置存储有各种程序以及数据。另外,存储装置提供展开程序的区域。处理器通过执行存储于存储装置的程序来实现各种处理。
[0152]例如,控制器90对旋转用马达66进行控制使容器组装体I旋转至规定的旋转位置。在旋转机构60设置有未图示的旋转位置传感器,控制器90根据旋转位置传感器的检测结果使旋转用马达66驱动.停止。
[0153]另外,控制器90对加热器65进行控制,对加热器进行开启?关闭控制使该加热器发热,将容器组装体I内的液体加热至规定的温度。
[0154]另外,控制器90对磁铁移动机构70进行控制,使磁铁3在上下方向移动,并根据未图示的位置传感器的检测结果使磁铁3在图9的左右方向摆动。
[0155]另外,控制器90控制荧光测定器55对反应容器400内的液滴的亮度进行测定。该测定结果保存于控制器90的未图示的存储装置。
[0156]将容器组装体I安装于该PCR装置50,能够实施上述3_2的(C)?(G)工序,并且能够实施PCR。
[0157]5.筒套装
[0158]参照附图对本实施方式的筒套装进行说明。图11是示意地表示本实施方式的筒套装7的剖视图。组装筒套装7从而能够得到上述筒(容器组装体)I。
[0159]如图11所示,筒套装7包括第一收纳体500、第二收纳体600以及第三收纳体700。以下,对收纳体500、600、700进行说明。
[0160]5-1.第一收纳体
[0161]如图11所示,第一收纳体500包括第一包装体502、保液材料504、吸附容器100的注射部120和柱塞部130、第一清洗容器210以及第二清洗容器220。在图示的例子中,第一收纳体500还包括吸附容器100的盖110。
[0162]第一包装体502对保液材料504、吸附容器100以及清洗容器210、220进行封闭收纳(密封)。在图示的例子中,虽然将第一包装体502作为袋状的包装体表示,但第一包装体502的形状并不特别限定,例如也可以为箱状。对于第一包装体502的大小而言,只要能够对保液材料504、吸附容器100以及清洗容器210、220进行封闭收纳即可,并不特别限定。
[0163]第一包装体502的水透过率比吸附容器100以及清洗容器210、220的水透过率小。这里,“水透过率”是指在规定的温度以及湿度下在单位时间内通过单位面积的包装体(从包装体的内部向外部通过,或者从包装体的外部向内部通过)的水(例如水蒸气)的量。更具体而言,“水透过率”是指水蒸气透过度,可以基于Jis K7129求出。
[0164]第一包装体502的醇透过率比吸附容器100以及清洗容器210、220的醇透过率小。这里,“醇透过率”是指相对于醇的透过率,是指在规定的温度以及湿度下在单位时间内通过单位面积的包装体的醇(例如气体的醇)的量。例如,也能够将“醇透过率较小”这句话说成是“气体阻隔性较高”。求取水透过率以及醇透过率时的温度并不特别限定,例如为0°C以上且60°C以下,优选为室温。水透过率以及醇透过率也可以与包装体的厚度对应地求出。
[0165]优选第一包装体502的材质为水蒸气透过率较小且气体阻隔性较高的材质。具体而言,第一包装体502为具有铝层的袋。这里,图12是示意地表示第一包装体502的剖视图。如图12所示,第一包装体502例如具有PP(聚丙烯)层9a、设置于PP层9a的表面的铝层9b以及设置于铝层9b的表面的PET(聚对苯二甲酸乙二醇酯)层9c。在图示的例子中,PP层9a侧是第一包装体502的内部侧,PET层9c侧是第一包装体502的外部侧。例如,通过制作两张由PP层(PP薄膜)9a和PET层(PET薄膜)9c夹持铝层(铝箔)9b而粘合的片材,并且使两张片材以PP层9a彼此接触的方式重合并进行热熔敷,从而能够形成第一包装体502。此外,招层9b可以通过真空蒸镀法形成。另夕卜,PP层9a以及PET层9c可以通过挤压成型法等薄膜成型法形成。
[0166]铝与作为吸附容器100以及清洗容器210、220的材质的聚丙烯
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