[0076] NAD 烟酷胺腺嚷岭二核巧酸
[0077] NMP N-甲基化咯烧酬
[007引 Ph 苯基
[0079] RTord 室溫（20°C _25°C)
[0080] 巧U 叔芳基下基
[0081 ] TBME 叔下基甲基酸
[0082] TCA S 氯乙酸
[0083] THF 四氨巧喃
[0084] TEA S 乙胺
[00化]合成方法
[0086] -般可W通过本文所述的方法或通过本领域技术人员公知的其它方法制备化合 物1。
[0087] 实施例 1. 2-氯-6-( 1-(2，2-二氣乙基）-lH-化挫-4-基）-4，7，7-S甲基-6，7-二 氨-5H-化咯并[3，4-b M晚-5-酬(化合物1006)的制备
[008引
[0089] 正如方案I的步骤1-i中所示，在氮气气氛中向2,4-二甲基化晚-3-甲酸乙醋(化合 物1001，20.2邑，112.5111111〇1)在二氯甲烧（100血）中的溶液中逐步加入1，3,5-^氯-1，3,5-^ 嗦(triazinane)-2,4,6-S酬(31.4g，135.0mmol)，历时15分钟。将该反应混合物在室溫揽 拌18小时。过滤得到的白色沉淀，然后依次用饱和化HC化水溶液（2x 1 OOmL)和盐水（1 OOmL) 洗涂滤液。干燥有机相(Na2S〇4)，过滤，真空浓缩，得到2-(氯甲基)-4-甲基烟酸乙醋似.9邑， 化合物1002)，为黄色油状物:ESMS(M+H) =213.96。然后将该物质不经进一步纯化用于下一 步：
[0090] 正如方案1的步骤1-ii中所示，向2-(氯甲基）-4-甲基烟酸乙醋（化合物1002， 112. Og ,524.2mmol)在二氯甲烧（484mL)中的溶液中加入3-氯过氧化苯甲酸（141. Og, 629.Ommol)。将该反应混合物在室溫在氮气气氛中揽拌过夜。用二氯甲烧(200mL)稀释该混 合物，依次用饱和化肥化水溶液（1 OOmL )、饱和化2〇)3水溶液（1 OOmL的2M溶液)和盐水洗涂。 干燥有机相(Na2S〇4)，过滤，真空浓缩，得到2-(氯甲基)-3-(乙氧幾基)-4-甲基化晚-1-氧化 物(化合物1〇〇3):6515(1+扣=230.25。然后将该物质不经进一步纯化用于下一步：
[0091] 正如方案1的步骤1-iii中所示，将2-(氯甲基)-3-(乙氧幾基)-4-甲基化晚1-氧化 物(化合物1003,69.3g，301.Smmol)在憐酷氯(450.1 mL,4.8mol)中的溶液在氮气气氛中揽 拌，在95°C加热60小时。将该反应混合物冷却至室溫，真空蒸馈出憐酷氯。将得到的深色残 余物溶于二氯甲烧（IOOmL),倾倒在IL烧杯中的冰(500g)上。将得到的混合物揽拌10分钟。 用饱和化肥化水溶液将该混合物的抑调整至稍高于7。分离有机相，再用二氯甲烧反萃取水 相。连续用盐水洗涂合并的有机相，用NasS化干燥，过滤，真空浓缩。使用化OAc/己烧（1:3)使 残余物通过硅胶垫，减压除去挥发性物质后得到80%纯的产物（正如根据Ihnmr分析所示 的）。通过中压硅胶色谱法进一步纯化该物质（10-25%EtOAc/己烧，330g Teledyne ISCO 柱），得到6-氯-2-(氯甲基)-4-甲基烟酸乙醋(化合物1004,36.5g):ESMS(M+H)=248.04.
[0092] 正如方案1的步骤1-i V中所示，向1-(2,2-二氣乙基）化挫-4-胺（48.2g, 327.5mmol)在异丙醇（1.7L)中的溶液中加入6-氯-2-(氯甲基)-4-甲基烟酸乙醋(化合物 1004，65. Og，262. Ommol )，然后加入N，N-二异丙基乙胺(45.6血，262. Ommol)。将该反应混合 物在55°C加热72小时。将得到的白色混悬液冷却至室溫，过滤，再用异丙醇（200mL)和乙酸 (SOOmL)洗涂。将得到的固体在50°C真空烘箱干燥过夜，得到56g 2-氯-6-(1-(2,2-二氣乙 基)-lH-化挫-4-基)-4-甲基-6,7-二氨-5H-化咯并[3,4-b]化晚-5-酬(化合物1005):1hNMR (300MHz,DMS0-d6)58.28(s,lH),7.87(d,J = 0.5Hz,lH),7.52(s,lH),6.37(tt J = 54.9, 3.7Hz，lH)，4.85(s，2H)，4.67(td，J=15.2,3.7Hz，2H)，2.65(s，3H)。该物质包含 7% 的非环 化副产物[6-氯-2-( ((1-(2,2-二氣乙基)-lH-化挫-4-基)氨基）甲基)-4-甲基烟酸乙醋]， 就运样用于随后的反应。
[0093] 正如方案1的步骤I-V中所示，向2-氯-6-(1-(2,2-二氣乙基）-lH-化挫-4-基）-4-甲基-6,7-二氨-5H-化咯并[3,4-b]化晚-5-酬（化合物 1005,46. Og ,147. Immol)在DMF (782. OmU中的溶液中加入舰甲烧(20.1血，323.6mmo 1)。将该混合物冷却至5°C，逐步加入 氨化钢（12.9g，323.6mmol的60%矿物油分散液），历时15分钟。将该反应混合物在3°C揽拌 45分钟。HPLC分析显示一甲基化（10%)、二-甲基化(74%)和S-甲基化（15%)产物与消耗 的原料的混合物。再经过1小时后，再加入氨化钢（1.29g，32.36mmo 1的60%矿物油分散液）， HPLC分析显示84%二-甲基化期望的产物和16%S-甲基化副产物。通过添加饱和 溶液（IL)、硫代硫酸钢(400mL)和水（IL)终止反应。用化OAc(SOOmL)将水相萃取2次。干燥合 并的有机相(化2S化），过滤，真空浓缩。通过中压硅胶色谱法纯化残余物(0-40%化OAc/己烧 梯度，使用SOOg Teledyne ISCO柱），得到2-氯-6-(1-(2,2-二氣乙基)-lH-化挫-4-基）-4， 7，7-S甲基-6，7-二氨-5H-化咯并[3，4-b ]化晚-5-酬（化合物1006，24g)，为白色固体： iHNMR(400MHz，DMS0-d6)S8.21(s，lH)，7.83(s，lH)，7.54(s，lH)6.58-6.25(m，lH)，4.67 (td，J = 15.1，3.7Hz，2H)，2.65(s，3H)，1.51(s，6H).
[0094] 实施例2: (R)-6-( 1-(2，2-二氣乙基)-lH-化挫-4-基)-4，7，7-S甲基-2-(5-(2，2， 2-S氣-1-径基乙基)邮晚-3-基)-6,7-二氨-5H-化咯并[3,4-b]化晚-5-酬(化合物1)的制 备 「nn〇c；1
[0096] 正如方案2的步骤2-i中所示，将水（IOL)加入至Ij2化反应器中，然后加入KH2PO4 (136g)。将该混合物揽拌至达到均匀，得到0.1 M K也Kk缓冲液。通过添加2M化0聞尋该缓冲 液的pH调整至pH7.5。使内部溫度达到37°C。取出约SOOmL缓冲液用于随后添加 NAD和CRED A131 细胞浆（cellpaste) (Almac Group ,Ltd.)。因此，将 NAD(20g)在缓冲液（IOOmL)中的溶 液加入到剩余的9.化缓冲液中，然后加入1-(5-漠化晚-3-基)-2，2，2-S氣乙-1-酬（1020g) 在MTBE(1 .5L)中的溶液。异丙醇（IL)用于再冲洗烧瓶进入反应。通过将CRED A131cel Ipaste (100g)在缓冲液(400mL)中的混悬液添加该反应混合物中启动还原。在该反 应过程中，从揽拌的混合物中取出双相反应样品（~2mL)，用化OAc(IOmL)萃取，用MgS〇4干 燥，蒸发，通过Ihnmr在DMS0-d6中分析，W便监测原料向产物的转化率。在1小时后，观察到 50 %的转化率。在3小时后，，观察到〉99%的转化率。用2M化0聞尋该反应体系的pH调整至 11，揽拌30分钟，W使每变性。用2M肥1将抑调整至9。向该反应混合物中加入EtOAc (5L)或 娃藻±(650g)，持续揽拌10分钟。通过娃藻±垫过滤得到的乳状液，W分离有机相和水相。 用化OAcUL)洗涂垫，分离有机层。用化OAc(化)萃取水层，用盐水(化)洗涂合并的有机相， 通过添加 MgS化(200g)和揽拌30分钟干燥。过滤，真空除去挥发性物质，得到淡黄色油状物， 在静置时快速固化。将固体打碎成块，在环己烧（2L)中揽拌成渺浆。向该混合物中加入 化OAc(~500mL)，在45°C揽拌W溶解该固体。然后再真空浓缩该混合物，直到白色固体开始 从溶液中沉淀。再加入环己烧(2L)，用冰浴将该溶液冷却至(TC。揽拌30分钟后，通过过滤采 集固体，用环己烧(SOOmL)洗涂，真空烘箱干燥，得到812g(R)-l)-1-(5-漠化晚-3-基)-2,2， 2-立氣乙-1 -醇（化合物1007，99.95 % ee，通过HPLC分析），为颗粒状白色固体：Ihnmr (400MHz，DMS0-d6)S8.72(s，lH)，8.61(s，lH)，8.08(s，lH)，5.09-5.15(m，lH).
[0097] 正如方案2的步骤2-ii中所示，向（lR)-1-(5-漠-3-化晚基)-2,2,2-S氣-乙醇(化 合物1007,49.5g，193.3mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊棚 烧-2-基)-1，3，2-二氧杂环戊棚烧(58.9g，232. Ommo 1)和KOAc (37.9g，386.6mmo 1)在二嗯烧 (1.2L)中的溶液通氮气20分钟。向该反应混合物中加入化时PdCl2*DCM(7. Sg，9.7mmol)。再 给该混合物通氮气20分钟，加热至回流2小时。冷却至室溫后，通过娃酸儀载体垫(400血)过 滤该混合物，用50%化OAc/C出Cl2(l.化)洗涂饼状物。减压浓缩得到的滤液，得到黄色油状 物，用己烧(SOOmL)稀释，真空浓缩，得到泡沫状黄色固体。将该黄色固体与己烧(SOOmL) - 起揽拌2小时，得到白色固体沉淀。通过过滤采集白色固体，干燥，得到（lR)-2,2,2-=氣-1-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊棚烧-2-基）-3-化晚基]乙醇（化合物1008， 48.4g):iHNMR(400MHz，CDCl3)S8.97(s，lH)，8.78(s，lH)，8.29(s，lH)，5.10-5.21(m，lH); 1.38(3,6扣，1.29(3，細）.
[009引正如方案2的步骤2-iii中所示，向2-氯-6-(1-(2,2-二氣乙基)-lH-化挫-4-基)-4，7，7-S甲基-6，7-二氨-5H-化咯并[3，4-b]化晚-5-酬（化合物 1006，42. Og，123.3mmol)、 (lR)-2,2,2-S氣-1-[5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊棚烧-2-基)-3-1?晚基]乙醇 (化合物 1008,46.7邑，148.0111111〇1)和船2〇)3(28.8邑，271.3111111〇1)在01尸(6301111^和水（2101111^中 的溶液中通氮气30分钟。向该混合物中加入化时PdCl2*DCM(2.99g，3.699mmol)，给该混合 物再通氮气30分钟。将该反应混合物加热至103°C，揽拌2小时。将该混合物冷却至室溫，用 水(2L)稀释。用化OAc(IL)将水相萃取2次。高度真空下真空浓缩合并的有机相，W除去DMF。 用化OAc稀释残余物，用水洗涂，然后用盐水洗涂。干燥有机相(化2S化），过滤，真空浓缩。通 过中压硅胶色谱法纯化粗残余物（0-100%Et0Ac/己烧梯度，使用1500g Teledyne ISCO 柱），得到5?期望的产物，为淡红色泡沫状固体。将该固体溶于二氯甲烧。压过娃酸儀载体 垫（200mL)，依次用化OAc/C此Cb混合物[首先40% (IL)，然后60% (IL)，然后80% (IL)]洗 涂。合并滤液，真空浓缩。用庚烧(400mL)将残余物稀释2次，真空浓缩，得到饼状物，然后用 TBME洗涂，W除去淡黄色，在60°C真空烘箱干燥4天，得到(R)-6-(l-(2,2-二氣乙基)-lH-化 挫-4-基)-4,7,7-^甲基-2-(5-(2,2,2-^氣-1-径基乙基川比晚-3-基)-6,7-二氨-5护化咯 并[3,4-b]化晚-5-酬(化合物 l，47g):iHNMR(400MHz，CDCl3)S9.33(s，lH)，8.75(s，lH)，8.54 (s，lH)，8.01(s，lH)，7.75(s，lH)，7.62(s，lH)，6.14(tt，J=55.4,3.6Hz，lH)，5.28-5.11 (m，lH)，4.51(td，J = 13.5,4.2Hz，2H)，4.