磷脂酰丝氨酸的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种磷脂酰丝氨酸的制备方法，其中，所述制备方法包括：1)将大豆卵磷脂和水混合，制得混合物M1；2)向混合物M1中加入L?丝氨酸和磷脂酶D混合，制得磷脂酰丝氨酸粗制品；3)向上述制得的磷脂酰丝氨酸粗制品中加入溶剂萃取，制得磷脂酰丝氨酸半成品；4)将上述制得的磷脂酰丝氨酸半成品顺次通过硅胶柱和离子交换树脂，制得磷脂酰丝氨酸；其中，所述溶剂由氯仿、乙醇、乙醚和水组成。上述设计通过将大豆卵磷脂先与水混合，而后加入L?丝氨酸和磷脂酶D反应，采用含有氯仿、乙醇、乙醚和水的溶剂进行萃取，经硅胶柱和离子交换树脂过滤，实现了操作简单方便，且制得的磷脂酰丝氨酸纯度较高，使得其使用范围大大增加的效果。
【专利说明】
磷脂酰丝氨酸的制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及磷脂酰丝氨酸的生产制备领域，具体地，涉及磷脂酰丝氨酸的制备方 法。
【背景技术】
[0002] 磷脂酰丝氨酸又称复合神经酸，是细胞膜的活性物质，尤其存在于大脑细胞中，其 主要功能是改善神经细胞功能，调节神经脉冲的传导，增进大脑记忆功能等。因而，在人体 中起着极为重要的作用。
[0003] 现今对于磷脂酰丝氨酸的制备主要为提取法，但是往往植物中磷脂酰丝氨酸的含 量较少，使得其提取需要用到大量的原料，且纯度不高，而从动物细胞中进行提取，往往也 只能使用动物的脑细胞进行提取，不仅原料成本高，且提取方法复杂。
[0004] 因此，提供一种制备方法相对简单，制得的磷脂酰丝氨酸纯度较高的磷脂酰丝氨 酸的制备方法是本发明亟需解决的问题。
【发明内容】
[0005] 针对上述现有技术，本发明的目的在于克服现有技术中往往植物中磷脂酰丝氨酸 的含量较少，使得其提取需要用到大量的原料，且纯度不高，而从动物细胞中进行提取，往 往也只能使用动物的脑细胞进行提取，不仅原料成本高，且提取方法复杂的问题，从而提供 一种制备方法相对简单，制得的磷脂酰丝氨酸纯度较高的磷脂酰丝氨酸的制备方法。
[0006] 为了实现上述目的，本发明提供了磷脂酰丝氨酸的制备方法，其中，所述制备方法 包括：
[0007] 1)将大豆卵磷脂和水混合，制得混合物Ml;
[0008] 2)向混合物Ml中加入L-丝氨酸和磷脂酶D混合，制得磷脂酰丝氨酸粗制品；
[0009] 3)向上述制得的磷脂酰丝氨酸粗制品中加入溶剂萃取，制得磷脂酰丝氨酸半成 品；
[0010] 4)将上述制得的磷脂酰丝氨酸半成品顺次通过硅胶柱和离子交换树脂，制得磷脂 酰丝氨酸;其中，
[0011] 所述溶剂由氯仿、乙醇、乙醚和水组成。
[0012] 通过上述技术方案，本发明将大豆卵磷脂先与水混合，而后加入L-丝氨酸和磷脂 酶D反应，制得磷脂酰丝氨酸粗制品，再将上述磷脂酰丝氨酸粗制品采用含有氯仿、乙醇、乙 醚和水的溶剂进行萃取后，经硅胶柱和离子交换树脂过滤，制得纯度较高的磷脂酰丝氨酸， 上述操作不仅简单方便，且制得的磷脂酰丝氨酸纯度较高，使得其使用范围大大增加。
[0013] 本发明的其他特征和优点将在随后的【具体实施方式】部分予以详细说明。
【具体实施方式】
[0014] 以下对本发明的【具体实施方式】进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体 实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。
[0015] 本发明提供了一种磷脂酰丝氨酸的制备方法，其中，所述制备方法包括：
[0016] 1)将大豆卵磷脂和水混合，制得混合物Ml;
[0017] 2)向混合物Ml中加入L-丝氨酸和磷脂酶D混合，制得磷脂酰丝氨酸粗制品；
[0018] 3)向上述制得的磷脂酰丝氨酸粗制品中加入溶剂萃取，制得磷脂酰丝氨酸半成 品；
[0019] 4)将上述制得的磷脂酰丝氨酸半成品顺次通过硅胶柱和离子交换树脂，制得磷脂 酰丝氨酸;其中，
[0020] 所述溶剂由氯仿、乙醇、乙醚和水组成。
[0021] 上述设计通过将大豆卵磷脂先与水混合，而后加入L-丝氨酸和磷脂酶D反应，制得 磷脂酰丝氨酸粗制品，再将上述磷脂酰丝氨酸粗制品采用含有氯仿、乙醇、乙醚和水的溶剂 进行萃取后，经硅胶柱和离子交换树脂过滤，制得纯度较高的磷脂酰丝氨酸，上述操作不仅 简单方便，且制得的磷脂酰丝氨酸纯度较高，使得其使用范围大大增加。
[0022] 在本发明的一种优选的实施方式中，为了使原料的使用率更高，进一步降低生产 成本，相对于100重量份的步骤1)中的所述水，所述大豆卵磷脂的用量为30-50重量份，所述 L-丝氨酸的用量为15-20重量份，所述磷脂酶D的用量为1-5重量份，所述溶剂的用量为200-500重量份。
[0023]溶剂中各成分的含量可以根据实际需要进行调节，例如，在本发明的一种优选的 实施方式中，为了进一步提高制得的磷脂酰丝氨酸的纯度，相对于100重量份的所述溶剂中 的水，所述氯仿的用量为20-80重量份，所述乙醇的用量为30-60重量份，所述乙醚的用量为 10-30重量份。
[0024] 步骤2)中的混合过程可以为静置混合，混合条件可以不作限定，当然，在本发明的 一种更为优选的实施方式中，步骤2)中混合过程的混合温度为25-30°C，混合时间为25-35h〇
[0025] 为了进一步提高制得的磷脂酰丝氨酸的纯度，在本发明的一种更为优选的实施方 式中，步骤3)中萃取次数可以进一步选择为2-4次。
[0026] 步骤4)中的离子交换树脂可以为本领域常规使用的离子交换树脂类型，例如，在 本发明的一种优选的实施方式中，步骤4)中所述离子交换树脂可以进一步选择为阳离子交 换树脂。
[0027] 以下将通过实施例对本发明进行详细描述。以下实施例中，所述大豆卵磷脂、所述 L-丝氨酸、所述磷脂酶D、所述氯仿、所述乙醇和所述乙醚为常规市售品。
[0028] 实施例1
[0029] 将150g水、30g氯仿、45g乙醇和15g乙醚混合，制得溶剂;将30g大豆卵磷脂和100g 水混合，制得混合物Ml;向混合物Ml中加入15gL-丝氨酸和Ig磷脂酶D在25°C的条件下混合 25h，制得磷脂酰丝氨酸粗制品；向上述制得的磷脂酰丝氨酸粗制品中加入200g溶剂萃取， 重复上述萃取过程2次，制得磷脂酰丝氨酸半成品;将上述制得的磷脂酰丝氨酸半成品顺次 通过硅胶柱和阳离子交换树脂，制得磷脂酰丝氨酸Al。
[0030] 实施例2
[0031] 将200g水、160g氯仿、120g乙醇和60g乙醚混合，制得溶剂；将50g大豆卵磷脂和 100g水混合，制得混合物Ml;向混合物Ml中加入20gL-丝氨酸和5g磷脂酶D在30°C的条件下 混合35h，制得磷脂酰丝氨酸粗制品；向上述制得的磷脂酰丝氨酸粗制品中加入500g溶剂萃 取，重复上述萃取过程4次，制得磷脂酰丝氨酸半成品；将上述制得的磷脂酰丝氨酸半成品 顺次通过硅胶柱和阳离子交换树脂，制得磷脂酰丝氨酸A2。
[0032] 实施例3
[0033] 将200g水、100g氯仿、100g乙醇和40g乙醚混合，制得溶剂；将40g大豆卵磷脂和 100g水混合，制得混合物Ml;向混合物Ml中加入18gL-丝氨酸和3g磷脂酶D在28°C的条件下 混合30h，制得磷脂酰丝氨酸粗制品；向上述制得的磷脂酰丝氨酸粗制品中加入400g溶剂萃 取，重复上述萃取过程3次，制得磷脂酰丝氨酸半成品；将上述制得的磷脂酰丝氨酸半成品 顺次通过硅胶柱和阳离子交换树脂，制得磷脂酰丝氨酸A3。
[0034] 实施例4
[0035]按照实施例1的制备方法进行制备，不同的是，所述氯仿的用量为20g，所述乙醇的 用量为30g，所述乙醚的用量为10g，制得磷脂酰丝氨酸A4。
[0036] 实施例5
[0037]按照实施例2的制备方法进行制备，不同的是，所述氯仿的用量为200g，所述乙醇 的用量为150g，所述乙醚的用量为100g，制得磷脂酰丝氨酸A5。
[0038] 实施例6
[0039]按照实施例1的制备方法进行制备，不同的是，所述L-丝氨酸的用量为10g，所述磷 脂酶D的用量为0.5g，制得磷脂酰丝氨酸A6。
[0040] 实施例7
[0041]按照实施例2的制备方法进行制备，不同的是，所述L-丝氨酸的用量为30g，所述磷 脂酶D的用量为Sg，制得磷脂酰丝氨酸A7。
[0042] 对比例1
[0043]按照实施例3的制备方法进行制备，不同的是，不添加乙醚，制得磷脂酰丝氨酸D1。 [0044] 对比例2
[0045]按照实施例3的制备方法进行制备，不同的是，将乙醇改为乙醚，制得磷脂酰丝氨 酸D2。
[0046] 测试例
[0047]分别检测上述制得的A1_A7、D1和D2中磷脂酰丝氨酸的含量，得到的结果如表1所 不。
[0048]表 1
[0050] 以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中 的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这 些简单变型均属于本发明的保护范围。
[0051] 另外需要说明的是，在上述【具体实施方式】中所描述的各个具体技术特征，在不矛 盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可 能的组合方式不再另行说明。
[0052]此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本 发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。
【主权项】
1. 一种磷脂酰丝氨酸的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括： 1) 将大豆卵磷脂和水混合，制得混合物Ml; 2) 向混合物Ml中加入L-丝氨酸和磷脂酶D混合，制得磷脂酰丝氨酸粗制品； 3) 向上述制得的磷脂酰丝氨酸粗制品中加入溶剂萃取，制得磷脂酰丝氨酸半成品； 4) 将上述制得的磷脂酰丝氨酸半成品顺次通过硅胶柱和离子交换树脂，制得磷脂酰丝 氨酸;其中， 所述溶剂由氯仿、乙醇、乙醚和水组成。2. 根据权利要求1所述的制备方法，其中，相对于100重量份的步骤1)中的所述水，所述 大豆卵磷脂的用量为30-50重量份，所述L-丝氨酸的用量为15-20重量份，所述磷脂酶D的用 量为1-5重量份，所述溶剂的用量为200-500重量份。3. 根据权利要求1或2所述的制备方法，其中，相对于100重量份的所述溶剂中的水，所 述氯仿的用量为20-80重量份，所述乙醇的用量为30-60重量份，所述乙醚的用量为10-30重 量份。4. 根据权利要求1或2所述的制备方法，其中，步骤2)中混合过程的混合温度为25-30 °C，混合时间为25-35h。5. 根据权利要求1或2所述的制备方法，其中，步骤3)中萃取次数为2-4次。6. 根据权利要求1或2所述的制备方法，其中，步骤4)中所述离子交换树脂为阳离子交 换树脂。
【文档编号】C12P7/64GK106086097SQ201610403742
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月8日
【发明人】苏福男
【申请人】芜湖福民生物药业有限公司