密闭性便携式试纸条比色法核酸检测装置、检测容器的制造方法
【技术领域】
[0001]本实用新型属于核酸检测领域，具体涉及一种可用于普通聚合酶链式反应(PCR)和恒温扩增产物检测的反应装置。
【背景技术】
[0002]随着科学技术的发展，核酸检测已经越来越多地应用于医学诊断、食品安全检测等领域。目前常用的核酸扩增方法有基于经典普通聚合酶链式反应(PCR)的扩增技术和新兴的恒温扩增技术，如交叉引物恒温扩增技术(CPA)、环介导恒温扩增技术(LAMP)、链置换扩增(SDA)、依赖解旋酶的扩增(HDA)等。由于核酸扩增技术的高灵敏度，扩增产物的产量很高，因此面临气溶胶污染问题。
[0003]此外，基于扩增产物的检测方法，传统的实时荧光定量检测方法需要集成庞大、昂贵、精密的光学设备，不利于装置的小型化开发和应用于现场检测。目前新兴的非光学检测方法如电化学方法、HNB比色法、浊度法，对装置的要求大为简化，但这些方法有的需要开盖操作，极容易造成气溶胶污染，有的检测灵敏度不高，结果不易判断。申请号为201410431991.9的中国实用新型专利申请能够使得阳性样本反应后反应液从无色变为有色，使核酸扩增检测变得肉眼可见，和传统的比色方法相比，其显色更加灵敏，但是这一技术仍未涉及到检测特异性。因此，开发密闭、小型化、便携式的核酸检测装置，将其与现有的检测方法相结合显得越来越重要。
[0004]试纸条法因其检测特异性、高灵敏度和简单便携的特性而受到广泛关注。但目前商业化的试纸条检测装置设计复杂，不利于降低成本。因此开发简便易行，成本低廉的试纸条检测装置，十分必要。
【实用新型内容】
[0005]本实用新型的目的之一是提供一种密闭性便携式试纸条比色法检测核酸扩增的装置，可使核酸反应体系在不打开反应容器的情况下，进行PCR反应或进行不同种类的恒温扩增反应及用试纸条进行特异性检测。为此，本实用新型采用以下技术方案:
[0006]一种密闭性便携式试纸条比色法核酸检测装置，其特征在于它包括反应管、检测容器；检测容器包括供胶体金试纸条放置的空腔，所述检测容器的一端为能与反应管相连的结构，且该结构和反应管之间是密封的，在该端具有与所述空腔相通的连通口 ；所述检测容器的另一端也具有与所述空腔相通的口，且该端与检测容器的盖相连；检测容器中供胶体金试纸条放置的空腔经过所述连通口与反应管相通。
[0007]所述检测容器的另一端的口为与空腔直通的试纸条装填口。
[0008]进一步地，能与反应管相连的结构为被反应管插入的结构。所述被反应管插入的结构为反应管的盖。更进一步地，所述空腔与反应管的轴线垂直，在此结构中，所述检测容器可呈长方体形。
[0009]进一步地，所述检测容器也可呈筒状，其一端能被反应管插入并密封。在此结构中，所述检测容器的盖可采用活塞式，其内侧端具有能连接试纸条的部位，在此结构中，处在空腔中的试纸条可连接在活塞上。
[0010]本实用新型的目的之二是提供一种试纸条比色法检测核酸扩增的检测容器，能够应用于核酸检测装置中，可使核酸反应体系在不打开反应容器的情况下，进行PCR反应或进行不同种类的恒温扩增反应及用试纸条进行特异性检测。为此，本实用新型采用以下技术方案:
[0011]一种试纸条比色法检测核酸扩增的检测容器，其特征在于其包括供胶体金试纸条放置的空腔，所述检测容器的一端为能与反应管相连的结构，且该结构和反应管之间是密封的，在该端具有与所述空腔相通的连通口 ；所述检测容器的另一端也具有与所述空腔相通的口，且该端与检测容器的盖相连；检测容器中供胶体金试纸条放置的空腔经过所述连通口与反应管相通。
[0012]所述检测容器的另一端的口为与空腔直通的试纸条装填口。
[0013]进一步地，能与反应管相连的结构为被反应管插入的结构。所述被反应管插入的结构为反应管的盖。更进一步地，所述空腔与反应管的轴线垂直，所述检测容器还可以是呈长方体形。
[0014]进一步地，所述检测容器也可呈筒状，其一端能被反应管插入并密封。在此结构中，所述检测容器的盖可采用活塞式，在此结构中，处在空腔中的试纸条可连接在活塞上。
[0015]与现有技术相比，本实用新型具有如下有益效果:
[0016]1.本实用新型将反应容器和检测容器分开但又连通，通过连通孔相互连接，能将试纸条集成到核酸扩增反应器中，无需打开反应容器就可以实现显色反应，大大降低气溶胶的污染；
[0017]2.本实用新型装置简单，能进行PCR反应或进行不同种类的恒温扩增反应，并且不影响后续的胶体金试纸条检测，就可简便的实现核酸扩增产物的检测。
[0018]3.本实用新型不但保证了试纸条检测的快速高效性，而且成本低廉，可在不开盖的情况下完成整个核酸扩增的特异性检测。
【附图说明】
[0019]图1为本实用新型实施例1中一种实施方式的剖视图。
[0020]图2为图1的分解图。
[0021]图3为本实用新型实施例1中另一种实施方式的剖视图。
[0022]图4为图3的分解图。
[0023]图5为本实用新型实施例2的剖视图。
[0024]图6为图5的分解图。
【具体实施方式】
[0025]实施例1，参照图1、2、3、4:
[0026]本实用新型所提供的密闭性便携式试纸条比色法核酸检测装置，包括反应管5、检测容器2 ;检测容器2包括供胶体金试纸条放置的长条型空腔4，所述检测容器的一端为能与反应管5插入相连的反应管的盖20，且该结构和反应管之间是密封的，在该端具有与所述空腔相通的
[0027]所述空腔4与反应管的轴线垂直，所述检测容器可呈长方体形。
[0028]根据反应管的盖与检测容器的连通方式的不同，该实施方案又可以分为两种:
[0029]第一种:反应管的盖及与其连通的用于放置试纸条的检测容器的连通口 21开口较小(如图1、2所示)。该连通口 21的横截面形状任意，优选为长方形(包括正方形)和圆形，更优选地为圆形，开口直径大小优选地小于等于2mm，大于等于1mm，更优选地为1.5mm。
[0030]第二种:反应管的盖及与其连通的用于放置试纸条的长方体检测容器的连通口21较大(如图3、4所示)。优选地反应管的盖和放置试纸条的空腔的壁相重叠的部分都去掉，使两者的连通部分横截面积尽可能达到最大。
[0031]上述密闭式核酸检测装置，集成有反应管的盖的检测容器为一体成型。
[0032]所述空腔与检测容器所要连的反应管的轴线垂直，也即所述检测容器相对于反应管是卧式的检测容器或也可称为检测容器相对于反应管是横向的容器。所述反应管的高度优选地，小于等于20mm，大于等于1mm0
[0033]在上述第一种实施方案中，反应工作液的体积优选地在50~450 μ L之间，更优选地在50~100 μ L之间。在上述第二种实施方案中，反应工作液的体积优选地在20~450 μ L之间，更优选地在20~50 μ L之间。
[0034]装配时，可取上述检测容器，从口 22处放入针对待检测物质的已经标记好的胶体金试纸条，胶体金试纸条的标记端靠近连通口 21，胶体金试纸条的未标记端靠近检测容器的口 22，再用盖3将口 22密封。
[0035]本实用新型的核酸检测装置主要是针对做大批量核酸扩增检测时，开盖检测形成的气溶胶污染等问题。按照实际反应的需要，向检测容器中，加入针对不同检测物的特异性标记的胶体金试纸条，使用的时候，只需将反应液加入反应管中，与检测容器连接后进行反应和检测即可。
[0036]本实用新型装置的反应容器(反应管5)用于盛放核酸扩增反应液，反应容器的材质能够耐高温，不影响核酸扩增反应进行。反应容器具有良好的密闭性，反应过程中不发生水分蒸发散失，能够独立进行PCR反应或其他恒温扩增反应。在不开盖的情况下，通过摇晃或是震动、颠倒等操作，反应容器中的液体能够通过连通孔进入检测容器进行试纸条比色法检测。
[0037]利用上述核酸检测装置的核酸检测方法，具体包括如下步骤:
[0038](I)取加工成型的密闭核酸检测装置的反应管，放入PCR扩增反应液(或CPA、LAMP等恒温扩增反应液)。如检测容器采用上述第二种实施方案中，反应液上层用石蜡油密封。
[0039]需要注意的是，对于用胶体金试纸条来说，蜡油和扩增反应液的比例。石蜡油与扩增反应液的体积比例应小于2.5:1。实验证明，当石蜡油与扩增反应液的比例为2.5:1时，胶体金试纸条上没有条带出现；当石蜡油与扩增反应液的比例为2:1时，胶体金试纸条上偶尔有条带出现，但出现条带所需反应时间较长。当石蜡油与扩增反应液的比例为1.5:1时，胶体金试纸条上有条带出现，并且反应速度快，条带颜色明显。
[0040]因此优选的石蜡油与扩增反应液的比例应小于等于1.5:1，同时要保证石蜡油在扩增反应液上层形成密封。
[0041](