两亲性不对称双离子苝酰亚胺染料的制备方法及其标记细胞膜的应用与流程

技术特征：

1.两亲性不对称双离子苝酰亚胺染料，其特征在于，结构式为：

其中，R₁＝H，R₂＝Cl或Br；或者R₁＝R₂＝H，Br或Cl中的任意一种；m＝1-5。

2.权利要求1所述的两亲性不对称双离子苝酰亚胺染料的制备方法，其特征在于，通过叔氨基引发磺酸内酯的开环将双离子基团引入带叔胺基团的不对称苝酰亚胺衍生物得到所述两亲性不对称双离子苝酰亚胺染料。

3.根据权利要求2所述的两亲性不对称双离子苝酰亚胺染料的制备方法，其特征在于，带叔胺基团的不对称苝酰亚胺衍生物与1,3-丙磺酸内酯以摩尔比1：1-10于二氯甲烷中，在氮气保护下，室温回流反应得到两亲性不对称双离子苝酰亚胺染料。

4.根据权利要求2或3所述的两亲性不对称双离子苝酰亚胺染料的制备方法，其特征在于，所述带叔胺基团的不对称苝酰亚胺衍生物的制备方法为苝四羧酸二酐类荧光核、辛胺、N,N-二甲基乙二胺以摩尔比1：1-5：1-5于甲苯中，在氮气保护下，升温回流反应，得到带叔胺基团的不对称苝酰亚胺衍生物。

5.根据权利要求4所述的两亲性不对称双离子苝酰亚胺染料的制备方法，其特征在于，所述苝四羧酸二酐类荧光核为海岛位取代的1,7-二氯-3,4,9,10-苝四羧酸二酐、1,7-二溴-3,4,9,10-苝四羧酸二酐、1,6,7,12-四氯-3,4,9,10-苝四羧酸二酐、1,6,7,12-四溴-3,4,9,10-苝四羧酸二酐或海岛位未取代的苝四羧酸二酐中的任意一种或几种。

6.根据权利要求2或3所述的两亲性不对称双离子苝酰亚胺染料的制备方法，其特征在于，所述带叔胺基团的不对称苝酰亚胺衍生物的制备方法为将苝四羧酸二酐类荧光核和辛胺溶于甲醇中，在氮气保护下，第一次升温回流反应，经浓缩、冲洗和真空干燥，得到暗红色固体后，与咪唑，N,N-二甲基乙二胺，在氮气保护下，第二次升温回流反应，得到带叔胺基团的不对称苝酰亚胺衍生物，其中，苝四羧酸二酐类荧光核、辛胺、N,N-二甲基乙二胺以摩尔比1：1-5：1-5。

7.根据权利要求6所述的两亲性不对称双离子苝酰亚胺染料的制备方法，其特征在于，所述苝四羧酸二酐类荧光核为海岛位取代的1,7-二氯-3,4,9,10-苝四羧酸二酐、1,7-二溴-3,4,9,10-苝四羧酸二酐、1,6,7,12-四氯-3,4,9,10-苝四羧酸二酐、1,6,7,12-四溴-3,4,9,10-苝四羧酸二酐或海岛位未取代的苝四羧酸二酐中的任意一种或几种。

8.根据权利要求6所述的两亲性不对称双离子苝酰亚胺染料的制备方法，其特征在于，所述第一次和第二次升温回流反应温度范围为85℃到120℃，反应时间为10-12h。

9.将权利要求1所述的两亲性不对称双离子苝酰亚胺染料用于活体标记细胞膜荧光成像。

10.根据权利要求1所述的两亲性不对称双离子苝酰亚胺染料在活细胞内膜标记荧光成像的应用。