4ml三乙胺， 80°C下搅拌回流，旋转蒸发溶剂后经硅胶柱层析得到罗丹明衍生物。
[0027] (2) CdTe: Zn量子点的制备：将0· 285g硼氢化钠和0· 32g碲粉加入二次水IOml中， 4°C氮气保护下反应8小时得到碲氢化钠；将0. 114g氯化镉、0. 682g氯化锌、0. 105ml巯基 丙酸加入到100mL二次水中，并用氢氧化钠调节溶液PH = 11，除氧后加入上述0. 4ml碲氰 化钠转移至反应藎中放入烘箱中反应2小时得到CdTe:Zn量子点。
[0028] (3)汞离子比率探针的合成：在CdTe = Zn量子点水溶液中加入15ml环己烷、3. 54ml Triton X-100、3. 6ml正己醇，避光搅拌，加入0. 2ml TEOS和0. 12ml氨水继续搅拌后继续加 入0. 04ml APTES和0.0 lml TEOS搅拌完成后加入罗丹明衍生物，反应结束后离心清洗得到 基于多层荧光纳米微球和罗丹明衍生物的汞离子探针。
[0029] 汞离子比率探针合成与检测示意图如图1 ;罗丹明衍生物核磁图如图2 ;多层荧光 纳米微球透射电镜图片如图3。
[0030] 实施例2 :
[0031] 汞离子比率探针对水溶液中不同浓度汞离子的荧光检测：
[0032] 称取2. 383gHEPES溶于800ml二次水中，溶解后用氢氧化钠调节PH并定容至1L， 得到lOmmol/L的HEPES缓冲液。将制备的汞离子比率探针分散液用HEPES缓冲溶液（PH =7)按一定比例稀释，再用HEPES缓冲溶液（PH = 7)配置一定浓度的汞离子溶液加入上 述探针分散液中，定容至2ml测定突光强度（激发波长400nm)。
[0033] 汞离子比率探针对水溶液中不同浓度汞离子响应的荧光光谱图如图4 ;荧光强度 比值（1577/1521)随水溶液中汞离子浓度变化图如图5。
[0034] 实施例3 :
[0035] 比率探针对汞离子检测的选择性：
[0036] 分别配置 I X 10 2mol/L 的 Na+、K+、Ca2+、Mg' Fe' Co2+、Ni' Cu2+、Zn2+、pb2+、Cd2+、 Hg2+、A13+等的水溶液，并稀释上述溶液分别至I X 10 3mol/L、I X 10 4mol/L、I X 10 5mol/L。溶 剂为上述配置的lOmmol/L HEPES缓冲溶液。加入比率探针分散液中定容测定荧光强度。
[0037] 比率探针对水溶液中汞离子检测的选择性如图6。
【主权项】
1. 一种基于罗丹明衍生物和量子点荧光微球的汞离子比率探针，其特征在于：所述的 罗丹明衍生物的结构式为：2. -种基于罗丹明衍生物和量子点荧光微球的汞离子比率探针的制备方法，包括： (1)将硼氢化钠和碲粉加入二次水中，4°C氮气保护下反应8小时得到碲氢化钠；其中 硼氢化钠、碲粉、二次水的质量体积比为〇. 285g: 0. 32g: 10ml; ⑵将氯化镉、氯化锌、巯基丙酸加入到二次水中，并用氢氧化钠调节溶液PH= 11，除 氧后加入上述碲氰化钠转移至反应釜中放入烘箱中反应；其中氯化镉、氯化锌、巯基丙酸、 碲氰化钠、溶剂的质量体积比为：〇.114g: 0.682g: 0.105ml: 0.4ml: 100ml; ⑶将罗丹明B溶于溶剂中，加入三（2-氨乙基）胺，80°C下加热搅拌回流，旋转蒸发溶 剂后加入二氯甲烷和二次水，洗涤过滤旋干，提纯，得到RHB-NH2 ;其中罗丹明B、三（2-氨乙 基）胺、二氯甲烷、二次水、溶剂的质量体积比为：1.5g: 4.8ml: 50ml: 100ml: 30ml; (4) 将RHB-NH2溶于溶剂，加入异氰酸丙基三乙氧基硅烷和三乙胺，80°C下搅拌回流，旋 转蒸发溶剂后提纯得到罗丹明衍生物；其中RHB-NH2、异氰酸丙基三乙氧基硅烷、三乙胺的 质量体积比为：〇.2g: 0.2ml: 0.4ml; (5) 在CdTe:Zn量子点水溶液中加入环己烷、TritonX-100、正己醇，避光搅拌，加入 TE0S和氨水继续搅拌后继续加入APTES和TE0S搅拌完成后加入罗丹明衍生物，反应结束 后离心清洗得到基于多层荧光纳米微球和罗丹明衍生物的汞离子比率探针。其中环己烷、 TritonX-100、正己醇、TE0S、氨水、APTES、体积比为：15ml: 3.54ml: 3.6ml: 0.2ml: 0.12 ml: 0.04ml〇3. 根据权利要求2所述的一种基于罗丹明衍生物和量子点荧光微球的汞离子比率探 针的制备方法，其特征在于：所述步骤（3)中溶剂为无水甲醇。4. 根据权利要求2所述的一种基于罗丹明衍生物和量子点荧光微球的汞离子比率探 针的制备方法，其特征在于：所述步骤（3)中提纯为硅胶柱色谱提纯，洗脱剂为：CH2C12/ MeOH/Et3N= 40 ： 2 ： 1〇5. 根据权利要求2所述的一种基于罗丹明衍生物和量子点荧光微球的汞离子比率探 针的制备方法，其特征在于：所述步骤（4)中溶剂为甲苯。6. 根据权利要求2所述的一种基于罗丹明衍生物和量子点荧光微球的汞离子比率探 针的制备方法，其特征在于：所述步骤（4)中提纯为硅胶柱色谱提纯，洗脱剂为：CH2C12/ CH30H= 5 ： 1 〇7. 根据权利要求2所述的一种基于罗丹明衍生物和量子点荧光微球的汞离子比率探 针的制备方法，其特征在于：所述步骤（5)中加入了APTES和TE0S。
【专利摘要】本发明涉及一种基于罗丹明衍生物和量子点荧光微球的汞离子比率探针的制备方法，包括首先采用水相合成法制备了掺杂有Zn2+、表面带巯基丙酸(MPA)的水溶性量子点(CdTe:Zn)，并通过反相微乳液法合成了掺杂量子点的二氧化硅纳米粒子。然后制备了对Hg2+具有特异识别能力的内酰胺化罗丹明衍生物，并在此基础上通过氨丙基三乙氧基硅烷(APS)使其修饰上硅氧基，便与二氧化硅纳米粒子的连接。最终，将罗丹明衍生物接枝到二氧化硅纳米粒子表面，构建了基于FRET的汞离子探针。该探针不仅降低了外界环境对量子点光学性能的干扰，而且缩小了能量供体(量子点)与能量受体(罗丹明衍生物)之间的距离，提高了FRET的能量转移效率，进而增强了检测汞离子的灵敏性。
【IPC分类】C09K11/02, G01N21/64, C09K11/06, C09K11/88
【公开号】CN105018070
【申请号】CN201410160526
【发明人】张纪梅, 韩鑫, 田力, 张坤, 王瞳尧, 耿海康
【申请人】天津工业大学
【公开日】2015年11月4日
【申请日】2014年4月18日