专利名称：一种蜂王浆新鲜度的快速检测试剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种快速检测蜂王浆新鲜度的试剂，确切地说是一种用于快速判定蜂王浆所经历的贮存温度和贮存时间的试剂。
背景技术：
蜂王浆是影响蜜蜂级型分化的关键性物质，对蜂王的营养和发育有重要意义。新鲜蜂王浆中含有丰富的生物活性物质，对人体具有很高的营养保健作用，如增强免疫、抗疲劳、抗衰老、抗肿瘤、改善睡眠等。由于蜂王浆中的一些活性成分对温度敏感，因而蜂王浆对贮存条件要求较高，若贮存温度过高或贮存时间过长，其物理性状、化学成分及其品质会发生显著变化。同时，饲养实验表明，蜂王浆新鲜度与其品质有显著相关性，贮存不当的蜂王浆不能使蜂王正常发育。因此，蜂王浆必须低温冷冻保存，以保持其功效。
现行蜂王浆国家标准(GB/T9697-2002)中规定的理化指标包括水、10-羟基-2-癸烯酸(10-HDA)、蛋白质、总糖、淀粉、灰分的含量以及酸度。这些指标反映了蜂王浆中某类物质的含量，只能作为蜂王浆是否掺假的评判标准，并不能很好地反映蜂王浆新鲜度及其品质。缺少反映蜂王浆新鲜度的指标及其检测方法是现行蜂王浆国家标准中存在的一大缺陷。
探求并确立一个能如实反映蜂王浆新鲜度的指标及其检测方法是蜂王浆研究的一项重要课题，也是完善现行蜂王浆质量标准，有效监控蜂王浆质量，进一步规范蜂王浆市场的关键所在。
发明内容
本发明的目的是提供一种快速检测蜂王浆新鲜度的试剂，试剂组成为质量百分比10～40％HCl、0～20％NaCl、0～10％C4H4N2O3(巴比妥酸)、0～20％FDNB(1-氟-2，4-二硝基苯)，其余用水补足。
本发明的另一个目的是提供该试剂的使用方法，具体步骤为1、将蜂王浆和本发明试剂按质量体积比1∶3～1∶20的比例充分混合；2、根据混合液生成的颜色判断蜂王浆的新鲜度
(1)若混合后立即出现浅红色，在数分钟转变为暗红色，可判定该样品经历了长时间的不当贮存；(2)若混合后立即出现粉紫色，可判定该样品至少经历过相当于28℃7天左右的不适当贮存，并可根据反应数分钟后颜色的深浅判定贮存时间，颜色越深，贮存时间越长；(3)若混合后出现浅黄色，并在数分钟后出现粉紫色，可判定为该样品经历过相当于28℃，1-6天的不适当贮存，并可根据数分钟后颜色的深浅判定贮存时间，颜色越深，贮存时间越长。
(4)若混合后出现浅黄色，在数分钟后黄色加深并逐渐出现浅红色，可判定为是新鲜样品。
本发明提供的试剂可与蜂王浆发生显色反应，且在一定的时间内生成的颜色因蜂王浆的贮存温度和时间不同而出现差异，可用于快速检测蜂王浆的新鲜度。本发明所涉及的试剂具有如下特点(1)设计合理、使用简便，不需复杂的仪器，特别适合现场检测；(2)耗时短，能快速检测蜂王浆新鲜度；(3)灵敏度高，能准确反映蜂王浆所经历贮存过程对其新鲜度产生的影响，温度梯度和时间梯度均能在显色反应中出现差异，根据呈现的颜色可判定蜂王浆是否经历不适当的贮存。可完善现行蜂王浆质量标准，有效监控蜂王浆质量，进一步规范蜂王浆市场。
图1为同一贮存时间不同贮存温度梯度蜂王浆加入本试剂充分混合后显色图。
图2为同一贮存时间不同贮存温度梯度蜂王浆加入本试剂3分钟后显色图。
图3为同一贮存温度不同贮存时间蜂王浆加入本试剂充分混合后显色图。
图4为同一贮存温度不同贮存时间蜂王浆加入本试剂4分钟后显色图。
具体实施例方式
本发明结合实施例作进一步的说明。
实施例1提供一种快速检测蜂王浆新鲜度的试剂，试剂组成质量百分比为HCl(10～40％)，NaCl(0～20％)，C4H4N2O巴比妥酸(0～10％)，FDNB1-氟-2，4-二硝基苯(0～20％)，其余用水补足。
实施例2提供一种试剂组成HCl、NaCl、C4H4N2O3、FDNB、水以质量比30∶1∶2∶2∶65的比例混合，可取得较好效果。
实施例3提供一种试剂组成HCl、NaCl、C4H4N2O3、FDNB、水以质量比35∶1∶1∶1∶62的比例混合，可取得较好效果。
实施例4(判定同一贮存时间、不同贮存温度梯度，按质量体积比为1∶10加入本发明试剂)取-18℃冷冻贮存40天、4℃贮存40天、28℃贮存40天的蜂王浆样品各0.1g，加入1ml本发明试剂，充分混合。28℃贮存40天的样品立即出现浅红色(见图1中的3#管)，其余两样品呈现浅黄色(见图1中的1#管和2#管)。
3分钟后，28℃贮存40天的样品呈现暗红色(见图2中的3#管)，-18℃冷冻贮存40天的样品黄色加深并逐渐出现浅红色(见图2中的1#管)，4℃贮存40天的样品出现粉紫色(见图2中的2#管)。
实施例5(判定同一贮存温度、不同贮存时间梯度，按质量体积比为1∶10加入本发明试剂)取-18℃冷冻贮存、28℃贮存1天、28℃贮存7天、28℃贮存14天、28℃贮存40天的蜂王浆样品各0.1g，加入1ml本发明试剂，充分混合。28℃贮存40天的样品立即出现浅红色(见图3中的5#管)，28℃贮存7天和14天的样品呈现粉紫色(见图3中的3#管和4#管)，且贮存14天样品颜色深于贮存7天的样品，-18℃冷冻贮存、28℃贮存1天的样品均呈现淡黄色(见图3中的1#管和2#管)，此时可明确辨别出经28℃贮存7天、14天和40天的样品。
4分钟后，28℃贮存40天的样品呈现暗红色(见图4中的5#管)，28℃贮存7天和14天的样品粉紫色加深(见图4中的3#管和4#管)，且贮存14天样品颜色深于贮存7天的样品，28℃贮存1天的样品出现浅粉紫色(见图4中的2#管)，-18℃冷冻贮存样品则在黄色加深的基础上出现浅红色(见图4中的1#管)，此时，结合图3，可明确辨别-18℃冷冻贮存和28℃贮存1天的蜂王浆样品。
实施例6(按质量体积比为1∶18加入本发明试剂)取-18℃冷冻贮存40天、4℃贮存40天、28℃贮存40天的蜂王浆样品各0.056g，加入1ml本发明试剂，充分混合。
变色反应效果与实施例4相同。
实施例7(按质量体积比为1∶5加入本发明试剂)取-18℃冷冻贮存40天、4℃贮存40天、28℃贮存40天的蜂王浆样品各0.2g，加入1ml本发明试剂，充分混合。
变色反应效果与实施例4相同。
虽然前面所述实施例已对本发明作出了详尽的描述，但本发明的保护范围并不局限于此，还可对本发明的方案作出其不偏离中心的修改，它们都属于本发明的保护范围。
权利要求
1.一种蜂王浆新鲜度的快速检测试剂，其特征是由质量百分比为10～40％HCl、0～20％NaCl、0～10％巴比妥酸、0～20％1-氟-2，4-二硝基苯组成，用水补足100％。
2.根据权利要求1所述的一种蜂王浆新鲜度的快速检测试剂的使用方法，其特征是通过以下步骤实现(1)将蜂王浆和本发明试剂按质量体积比1∶3～1∶20的比例充分混合；(2)根据混合液生成的颜色判断蜂王浆的新鲜度①若混合后立即出现浅红色，在数分钟转变为暗红色，可判定该样品经历了长时间的不当贮存；②若混合后立即出现粉紫色，可判定该样品至少经历过相当于28℃，7天的不适当贮存，并可根据反应数分钟后颜色的深浅判定贮存时间，颜色越深，贮存时间越长；③若混合后出现浅黄色，并在数分钟后出现粉紫色，可判定为该样品经历过相当于28℃，1～6天的不适当贮存，并可根据数分钟后颜色的深浅判定贮存时间，颜色越深，贮存时间越长。④若混合后出现浅黄色，在数分钟后黄色加深并逐渐出现浅红色，可判定为是新鲜样品。
3.根据权利要求1所述的一种蜂王浆新鲜度的快速检测试剂在蜂王浆新鲜度的快速检测中应用。
全文摘要
一种快速检测蜂王浆新鲜度的试剂，由质量百分比10～40％HCl、0～20％NaCl、0～10％C
文档编号G01N21/77GK101021484SQ20071006721
公开日2007年8月22日 申请日期2007年2月8日 优先权日2007年2月8日
发明者胡福良, 吴黎明, 郑火青, 朱威 申请人:浙江大学