专利名称：一种聚山梨酯80有关物质的检测方法
技术领域：
本发明涉及药品辅料的质量控制方法，具体地说是注射用脂溶性维生素(II)中所用辅料聚山梨酯80有关物质的检测方法。
背景技术：
注射用脂溶性维生素(II)所含的主药成份为维生素A、维生素D2、维生素E以及 维生素&。由于这些主药的原料药极性小，难溶于水，因此在药品制备时通常需要添加聚山 梨酯80进行增溶。聚山梨酯80为聚氧乙烯20山梨醇酐单油酸酯，属于复杂混合物，目前 其在作为药用辅料时，通常是按照《中国药典》(2005年版二部-918页)对其相对密度、黏 度、酸值、皂化值、羟值、碘值、酸碱度等项目进行检测。然而，在实际生产过程中发现，尽管 所选用的聚山梨酯80全部符合中国药典的相关规定，但有些聚山梨酯80会对注射用脂溶 性维生素(II)的含量测定产生一定的干扰，有些则不然。进一步研究发现不同生产厂家， 有时甚至是同一生产厂家的不同生产批次的聚山梨酯80，其干扰程度均有所不同。如本 申请人:在以辽阳奥克纳米材料有限公司生产的聚山梨酯80为药用辅料制备注射用脂溶性 维生素(II)时就发现，在其他原辅料、生产环境、工艺条件完全相同的情况下，采用批号为 F080708120的聚山梨酯80所制备的注射用脂溶性维生素(II)含量测定即合格，而采用批 号为F081217137的聚山梨酯80制备的注射用脂溶性维生素(II)含量测定即不合格，具体 为维生素D2的含量因分离度不合格而无法计算。本申请人同时又采用南京威尔化工有限公 司、上海申宇化工有限公司等企业生产的聚山梨酯80进行了实验，发现存在相同的不确定 性。由此可见，出现这种情况可能是不同生产企业生产的聚山梨酯80所含的有关物质(特 殊杂质和未知杂质)存在差异所致。但目前尚无聚山梨酯80有关物质检测方法的相关报 道。
发明内容
本发明就是要提供一种聚山梨酯80有关物质的检测方法，以避免其因有关物质 不符合要求而干扰注射用脂溶性维生素(II)含量检测的准确性，同时也防止其有关物质 过高可能引发的潜在不良反应。本发明的目的是这样实现的一种聚山梨酯80有关物质的检测方法，其特征在于它包括以下步骤(a)对照品溶液取维生素D2对照品约12mg，精密称定，置IOOml量瓶中，加乙醇振摇使溶解，并稀 释至刻度，摇勻。精密量取Iml置25ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇勻，作为对照品溶液；(b)供试品溶液取聚山梨酯80约0. 2g，精密称定，置IOml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇勻， 作为供试品溶液；(C)色谱条件与系统适用性试验用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂甲醇-水=93 7为流动相；检测波长为265nm;理论塔板数按维生素D2峰计算应不低于2000，杂质与主成分峰之间的分离度应符合规定(2005版中国药典二部附录29页(系统适用性试验))， 即大于1.5;(d)测定法采用2005版中国药典二部附录VD高效液相色谱法，精密量取对照品 溶液、供试品溶液各20ul，注入液相色谱仪，记录色谱图；(e)结果判定供试品溶液在维生素D2色谱峰的保留时间处无吸收。采用本发明方法对聚山梨酯80的有关物质进行测定，选择合格的聚山梨酯80作 为药用辅料用于制备注射用脂溶性维生素(II)，即从根本上避免了聚山梨酯80有关物质 对注射用脂溶性维生素(II)含量测定的干扰。
图1是维生素D2对照品的色谱图，从该图中可以看出维生素D2的保留时间为 12. 382 分钟。图2是南京威尔化工有限公司生产的20090316批聚山梨酯80的色谱图，从该图 中可以看出，在维生素D2的保留时间附近，也就是10. 938分钟处有一个较大的吸收峰，由 此可干扰维生素D2含量的测定，因此不合格。图3是采用南京威尔化工有限公司生产的20090316批聚山梨酯80配制的试验产 品1的维生素D2的含量检测色谱图，从该图中可以看出，9. 944分钟处有一个较大吸收峰， 与12分钟处的维生素D2的吸收峰分离度不合格，致使维生素D2的含量无法计算。图4是南京威尔化工有限公司生产的20090208批聚山梨酯80的色谱图，从该图 中可以看出，在维生素D2的保留时间附近，也就是10. 398分钟处有一个较大的吸收峰，由 此可干扰维生素D2含量的测定，因此不合格图5是用南京威尔化工有限公司生产的20090208批聚山梨酯80配制的试验产品 2的维生素D2的含量检测色谱图，从该图中可以看出，9. 954分钟处有一个较大吸收峰，与 12. 354分钟处的维生素D2的吸收峰分离度不合格，致使维生素D2的含量无法计算。图6是南京威尔化工有限公司生产的20090307批聚山梨酯80的色谱图，从该图 中可以看出，在维生素D2的保留时间附近，也就是10. 305分钟处有一个较大的吸收峰，由 此可干扰维生素D2含量的测定，因此不合格。图7是用南京威尔化工有限公司生产的20090307批聚山梨酯80配制的试验产品 3的维生素D2的含量检测色谱图，从该图中可以看出，9. 944分钟处有一个较大吸收峰，与 约12分钟处的维生素D2的吸收峰分离度不合格，致使维生素D2的含量无法计算。图8是上海申宇化工有限公司生产的090406批聚山梨酯80的色谱图，从该图中 可以看出，在维生素D2的保留时间附近，无明显的吸收峰，因此对维生素D2含量的测定无干 扰，故合格。图9是用上海申宇化工有限公司生产的090406批聚山梨酯80配制的试验产品4 的维生素D2的含量检测色谱图，从该图中可以看出，维生素D2的保留时间1 2. 476分钟附 近无其他较大杂质吸收峰，且分离度合格，维生素D2的含量可以准确计算。图10是上海申宇化工有限公司生产的090301批聚山梨酯80的色谱图，从该图中 可以看出，在维生素D2的保留时间附近，无明显的吸收峰，因此对维生素D2含量的测定无干扰，故合格。图11是用上海申宇化工有限公司生产的090301批聚山梨酯80配制的试验产品 5的维生素D2的含量检测色谱图，从该图中可以看出，维生素D2的保留时间12. 494分钟附 近无其他较大杂质吸收峰，且分离度合格，维生素D2的含量可以准确计算。图12是上海申宇化工有限公司生产的090304批聚山梨酯80的色谱图，从该图中 可以看出，在维生素D2的保留时间附近，无明显的吸收峰，因此对维生素D2含量的测定无 干 扰，故合格。图13是用上海申宇化工有限公司生产的090304批聚山梨酯80配制的试验产品 6的维生素D2的含量检测色谱图，从该图中可以看出，维生素D2的保留时间12. 453分钟附 近无其他较大杂质吸收峰，且分离度合格，维生素D2的含量可以准确计算。图14是辽阳奥克纳米材料有限公司生产的F080708120批聚山梨酯80的色谱图， 从该图中可以看出，在维生素D2的保留时间附近，无明显的吸收峰，因此对维生素D2含量的 测定无干扰，故合格。图15是用辽阳奥克纳米材料有限公司生产的F080708120批聚山梨酯80配制 的试验产品7的维生素D2的含量检测色谱图，从该图中可以看出，维生素D2的保留时间 12. 324分钟附近无其他较大杂质吸收峰，且分离度合格，维生素D2的含量可以准确计算。图16是辽阳奥克纳米材料有限公司生产的F081217137批聚山梨酯80的色谱图， 从该图中可以看出，在维生素D2的保留时间附近，也就是10.分钟处有一个较大的吸收峰， 由此可干扰维生素D2含量的测定，因此不合格。图17是用辽阳奥克纳米材料有限公司生产的F081217137批聚山梨酯80配制的 试验产品8的维生素D2的含量检测色谱图，从该图中可以看出，9. 954分钟处有一个较大吸 收峰，与12. 345分钟处的维生素D2的吸收峰分离度不合格，致使维生素D2的含量无法计
笪弁。
具体实施例方式实施例(一 )制备注射用脂溶性维生素II工艺处方维生素A棕榈酸酯1940mg(330万单位)，维生素D2 5mg(20万单位)，维生素E 9100mg(l万单位)，维生素K1 150mg，聚山梨酯80 50g，甘露醇50g。其中维生素A棕榈酸酯采用德国BASF Aktiengesllschaft制造的产品；维生素D2采用四川省玉鑫药业有限公司制造的产品；维生素E采用浙江医药股份有限公司新昌制药厂制造的产品；维生素K1采用山东广通宝医药有限公司制造的产品；甘露醇采用广西南宁化学制药有限责任公司制造的产品。聚山梨酯80分别采用南京威尔化工有限公司(3个批次)、上海申宇化工有限公司 (3个批次)、辽阳奥克纳米材料有限公司(2个批次)制造的产品。以上所有原辅料均符合相关药品标准的规定。
特别检测 按照以下方法对不同生产厂家(含不同生产批号)生产的聚山梨酯80进行检测。(a)对照品溶液取维生素D2对照品约12mg，精密称定，置IOOml量瓶中，加乙醇振摇使溶解，并稀 释至刻度，摇勻。精密量取Iml置25ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇勻，作为对照品溶液；供试品溶液取聚山梨酯80约0. 2g，精密称定，置IOml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇勻， 作为供试品溶液；(c)色谱条件与系统适用性试验用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂甲醇-水= 93 7为流动相；检测波长为265nm ；理论塔板数按维生素D2峰计算应不低于2000，杂质 与主成分峰之间的分离度应符合药典规定(2005版中国药典二部附录29页(系统适用性 试验))，即大于1.5;(d)测定法采用2005版中国药典二部附录VD高效液相色谱法，精密量取对照品 溶液、供试品溶液各20ul，注入液相色谱仪，记录色谱图；(e)结果判定供试品溶液在维生素D2色谱峰的保留时间处无吸收。经检验符合上述要求的聚山梨酯80为合格产品，否则为不合格产品。无论合格与 否都按照相同的工艺处方和制备工艺以其作为药用辅料制成注射用脂溶性维生素(II)。通 过对产品含量的测定，检验是否可通过摒弃不合格辅料聚山梨酯80来避免聚山梨酯80有 关物质对注射用脂溶性维生素(II)含量的测定影响。由于注射用脂溶性维生素(II)主药成份中的维生素D2对聚山梨酯80有关物质 的干扰最为敏感，故在以下对所制注射用脂溶性维生素(II)产品含量的对比检测中主要 对维生素D2的含量进行了测定。制备工艺1、药液配制1. 1将称量好的甘露醇加入适量注射用水中，搅拌至全部溶解，加入搅拌罐中备用。1. 2用分析天平称量维生素D2加入烧杯中，加入适量95%乙醇，搅拌溶解。1. 3将称量好的维生素A棕榈酸酯、维生素E、维生素K1 一同加入溶有维生素D2的 烧杯中，加入称量好的吐温80搅拌均勻。1.4将烧杯中的混合液倒入搅拌罐中，用注射用水补足体积，充分搅拌。在此过程 中检测PH值，使PH值在6. 2-7. 8之间。1. 5测pH值和中间体含量，合格后进行无菌压滤。2、药液灌装、冻干在百级洁净分装室内通过0. 22 μ m的微孔滤器对药液双级除菌过滤后，输送至数 控液体灌装机，依照药液装量进行药液灌装，并进行自动半加塞，然后将半成品放入洁净的 冷冻干燥箱内隔板上，由上而下依次摆放，将制品温度测头按要求摆放在所需测温部位，然 后关好箱门，对药液进行冷冻干燥。3、轧盖在十万级洁净间，用刀式自动轧盖机进行小瓶轧盖工作。
4、'灯检在伞棚式灯检台下，照度为1000Lx-1500Lx，逐支经目力检查，挑出装量不足、萎 缩、大晶体、严重白身及瓶盖松动等不合格品。5、包装。 依据所用的聚山梨酯80的不同厂家即批次，依次将所制注射用脂溶性维生素II 产品编号为试验产品1、2、3、4、5、6、7、8·(二)不同生产批号的聚山梨酯80以及以其为辅料所制的产品之比较。结果详见 表1。表 权利要求
一种聚山梨酯80有关物质的检测方法，其特征在于它包括以下步骤(a)对照品溶液取维生素D2对照品约12mg，精密称定，置100ml量瓶中，加乙醇振摇使溶解，并稀释至刻度，摇匀。精密量取1ml置25ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；(b)供试品溶液取聚山梨酯80约0.2g，精密称定，置10ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；(c)色谱条件与系统适用性试验用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂∶甲醇 水＝93∶7为流动相；检测波长为265nm；理论塔板数按维生素D2峰计算应不低于2000，杂质与主成分峰之间的分离度应大于1.5；(d)测定法采用2005版中国药典二部附录VD高效液相色谱法，精密量取对照品溶液、供试品溶液各20ul，注入液相色谱仪，记录色谱图；(e)结果判定供试品溶液在维生素D2色谱峰的保留时间处无吸收。
全文摘要
本发明公开了一种聚山梨酯80有关物质的检测方法，它包括以下步骤(a)对照品溶液的制备；(b)供试品溶液的制备；(c)色谱条件与系统适用性试验；(d)测定法采用2005版中国药典二部附录VD高效液相色谱法，精密量取对照品溶液、供试品溶液各20ul，注入液相色谱仪，记录色谱图；(e)结果判定在维生素D2色谱峰的保留时间处无吸收。本发明方法提高了聚山梨酯80药用辅料的质量控制标准，因此可有效避免有关物质对主药成分含量测定的干扰以及有关可能导致的潜在不良反应。
文档编号G01N30/28GK101943684SQ200910074868
公开日2011年1月12日 申请日期2009年7月10日 优先权日2009年7月10日
发明者尹书芳, 柴金平, 王志良, 范星彦, 赵霞, 路玉锋, 路立红 申请人:华北制药集团制剂有限公司