专利名称：木聚糖酶活力的测定方法
技术领域：
本发明属于木聚糖酶活力测定领域，特别涉及一种测定木聚糖酶活力的方法。
背景技术：
木聚糖酶是可将木聚糖降解成低聚木糖和木糖的水解酶。近年来，因其在造纸工业、食品工业、饲料工业、能源工业和环境科学等方面都具有较大的应用价值，因而引起科研工作者的广泛关注，并对其进行了相关研究。酶活力是衡量酶生物活力的重要指标。木聚糖酶属多糖水解酶，目前常用DNS测定其酶活力，具体方法是分别取具有一定浓度梯度的木糖标准溶液各2. OOmL于试管中，加入5mL DNS试剂，混勻，沸水浴加热5 15min，然后立即用冷水冷却至室温，加水定容至25mL。以标准空白样对照调零，在MOnm处测定吸光度OD值。虽然此法简便、快捷，但由于DNS对还原性的单糖、寡糖都具有氧化能力，导致该方法中建立的单糖标准曲线与实际样品间存在误差，不利于产品质量的控制。
发明内容
本发明针对已有技术的不足，提供一种采用砷钼酸盐法来测定木聚糖酶活力的方法，该方法在检测酶活时产生的变异较小，干扰较少，准确性明显提高。本发明所述木聚糖酶活力的测定方法，其步骤如下(1)制作木糖吸光度-木糖浓度的标准对应曲线；(2)用待测木聚糖酶水解木聚糖，然后检测水解得到的木糖的吸光度值；(3)将步骤( 所测水解得到的木糖的吸光度值用步骤(1)所述木糖吸光度-木糖浓度的标准对应曲线获得所述水解产物木糖的含量；(4)根据以下公式计算木聚糖酶的活力
权利要求
1.一种木聚糖酶活力的测定方法，其特征在于步骤如下(1)制作木糖吸光度-木糖浓度的标准对应曲线；(2)用待测木聚糖酶水解木聚糖，然后检测水解得到的木糖的吸光度值；(3)将步骤( 所测水解得到的木糖的吸光度值用步骤(1)所述木糖吸光度-木糖浓度的标准对应曲线获得所述水解产物木糖的含量；(4)根据以下公式计算木聚糖酶的活力
2.根据权利要求1所述的木聚糖酶活力的测定方法，其特征在于制作木糖吸光度-木糖浓度的标准对应曲线时，在0 16. 7ug/ml浓度范围配制5组不同浓度的木糖标准液，分别在各组标准液中加入硫酸铜混合液，沸水浴lOmin，冷却至室温，再加入砷钼酸混合液，离心后在MOnm下测上清液的吸光值。
3.根据权利要求1或2所述的木聚糖酶活力的测定方法，其特征在于用待测木聚糖酶水解木聚糖是将木聚糖溶液平衡到30°C再加入待测木聚糖酶溶液，混合均勻后，30°C静置 IOmin,再加入硫酸铜混合液，沸水浴lOmin，然后冷却到室温时再加入砷钼酸混合液，摇动或涡漩直到试管停止起泡，所有的沉淀溶解后离心。
全文摘要
一种木聚糖酶活力的测定方法，其特征在于步骤如下(1)制作木糖吸光度-木糖浓度的标准对应曲线；(2)用待测木聚糖酶水解木聚糖，然后检测水解得到的木糖的吸光度值；(3)将步骤(2)所测水解得到的木糖的吸光度值用步骤(1)所述木糖吸光度-木糖浓度的标准对应曲线获得所述水解产物木糖的含量；(4)根据以下公式计算木聚糖酶的活力上式中，df＝稀释系数，10＝反应时间，0.1＝使用酶的体积。
文档编号G01N21/31GK102401786SQ20101028488
公开日2012年4月4日 申请日期2010年9月17日 优先权日2010年9月17日
发明者李丹, 王传胜, 蒋彦 申请人:四川大学