专利名称：茶叶中含氰拟除虫菊酯农药残留的快速定量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种检测茶叶中农药残留的方法，具体地说，是对茶叶中含氰拟除虫菊酯农药残留的快速定量测定的方法。
背景技术：
茶叶中农药残留不仅通过泡饮直接对人体产生伤害，其潜在威胁和富集作用更使之成为一个严重社会问题。当前茶叶生产主要使用而且在茶叶中残留现象最为严重的是拟除虫菊酯类农药，大部分为含氰拟除虫菊酯。但由于没有针对该类农药简便准确的检测技术，使其很难在茶叶生产和贸易中得到实时监测和控制。茶叶成分复杂，含有大量色素和其他干扰物质，现有的测定食品中农药残留量的方法不能直接用于茶叶农药残留的检测。当前农药残留分析方法表现为精确可靠的检测方法其处理步骤繁琐，实验条件要求高，如气相色谱，气质联用等方法；简易快速的方法灵敏度低，主要用于定性分析，测定结果可靠性差，如薄层层析法等。农药残留常用分析方法为仪器检测，其样品前处理过程费时、费力，对操作人员的熟练程度及工作经验要求较高，所需分析仪器昂贵，分析人员专业技能要求高；酶法检测仅对有机磷农药残留敏感，不作用于拟除虫菊酯类农药；免疫检测技术复杂，成本较高，现有技术有限，研究进展缓慢。中国专利申请CN101865902A，公开了 “一种含氰基拟除虫菊酯类农药多残留的快速检测方法”，该方法仅用于定性反应，且将浸提和反应置于同一分液漏斗中，使得茶叶中的干扰成分不能被排除，经试验验证，茶叶中的特征成分能够使反应呈现假阳性，因而不能用于茶叶中拟除虫菊酯农药残留的检测。中国专利CN1763509 “拟除虫菊酯农药残留的快速检测”也由于相同原因不能用于茶叶农残检测。另外上述两方法均有产气反应不充分，气体转移效率低的缺点，使得定量检测回收率低。在非专利文献中，王丹红所采用方法基于中国专利申请CN101865902A，并用到氮气吹扫转移反应装置中产生的HCN气体，最后用邻二硝基苯显色的方法检测，虽部分解决了转移效率问题，但仍存在假阳性现象，也不能控制反应中农药充分水解。中国专利申请CN101334408公开了“一种含氰基拟除虫菊酯农药多残留分析的酶联免疫吸附检测方法，属于免疫分析技术领域，含人工合成半抗原间苯氧基苯甲氰醇丁二酸酯与卵清蛋白偶联复合物做包被抗原，技术复杂，成本较高。
发明内容
本发明的目的是提供一种快速检测茶叶中含氰拟除虫菊酯农药残留的方法，以解决现有技术存在的弊端，克服了常用仪器分析方法耗时长，技术要求高，成本高的缺点；并能排除茶叶中干扰物质，灵敏度高、成本低、简便易推广。实现本发明的技术方案是对茶叶中含氰拟除虫菊酯农药残留用石油醚萃取，将萃取液在反应体系中经排气和水解，产生氰离子后加入硫酸产生HCN气体，并通过加热搅拌和抽空气将HCN充分转移吸收并检测，其方法步骤1)浸提萃取称取3g磨碎干茶样于三角瓶，加入试剂20mL沸程为60-90°C石油醚，超声波浸提15min ；2)排气水解反应将浸提液过滤到产气反应装置，加入试剂IOmL 6mol/L氢氧化钠，连好装置(见附图
)，关闭收集阀，打开排气阀，打开泵，65°C水浴搅拌，抽气反应6min;3)产气收集打开收集阀，关闭排揶阀，通过加液漏斗加入试剂20mL 20%硫酸， 抽气收集IOmin ；4)检测取收集瓶加入试剂5mLpH为6. 8的缓冲溶液和试剂0. 2mL 1 %氯胺T，放置:3min后加入试剂5mL异烟酸-吡唑啉酮溶液，反应30min在638nm处比色。本发明所述的缓冲液，按34g无水磷酸二氢钾，89. 5g十二水磷酸氢二钠溶于IL蒸馏水中；本发明所述的异烟酸-吡唑啉酮溶液，按1. 5g异烟酸溶于IOOmL 0. 5%氢氧化钠溶液，0. 25g吡唑啉酮溶于20mL N，N 二甲基甲酰胺，按5 1混合。本反应产气装置组装由实验室常规玻璃仪器和抽气泵等简单设备组成，排除提取液的过程即常规检测中的浓缩过程，该过程与碱解反应同时进行，并通过抽空气加快气体排出。本发明的优点在于1适用于茶叶通过石油醚萃取，将浸提和反应过程分开，排除茶叶中干扰物质， 提高检测准确性，在茶叶拟除虫菊酯检测中有较好的稳定性；2方法快速反应将常规检测中的浓缩，净化和反应同时进行；3灵敏度高农药反应彻底，且HCN气体转移效率高，对含氰拟除虫菊酯的检出限可达 0. 25mg/kg ；4简便易于推广设备简单，成本低，技术要求不如仪器分析严格；5本方法能够快速、准确和定量测定茶叶中含氰拟除虫菊酯农药残留。本发明与相关文献主要技术特征和实施效果的比较见表1 表1本发明与现有技术的主要优点
权利要求
1.茶叶中含氰拟除虫菊酯农药残留的快速定量检测方法，其特征在于对茶叶中含氰拟除虫菊酯农药残留用石油醚萃取，将萃取液在反应体系中经排气和水解，产生氰离子后加入硫酸产生HCN气体，并通过加热搅拌和抽空气将HCN充分转移吸收并检测，其方法步骤1)浸提萃取称取3g磨碎干茶样于三角瓶，加入试剂20mL沸程为60-90°C石油醚，超声波浸提15min ；2)排气水解反应将浸提液过滤到产气反应装置，加入试剂IOmL6mol/L氢氧化钠，连好装置(见附图)，关闭收集阀，打开排气阀，打开泵，65°C水浴搅拌，抽气反应6min;3)产气收集打开收集阀，关闭排揶阀，通过加液漏斗加入试剂20mL20%硫酸，抽气收集IOmin ；4)检测取收集瓶加入试剂5mLpH为6.8的缓冲溶液和试剂0.2!!^1%氯胺1\放置 3min后加入试剂5mL异烟酸-吡唑啉酮溶液，反应30min在638nm处比色。
2.根据权利要求1所述的茶叶中含氰拟除虫菊酯农药残留的快速定量检测方法，其特征在于所述的缓冲液，按34g无水磷酸二氢钾，89. 5g十二水磷酸氢二钠溶于IL蒸馏水中。
3.根据权利要求1所述的茶叶中含氰拟除虫菊酯农药残留的快速定量检测方法，其特征在于所述的异烟酸-吡唑啉酮溶液，按1.5g异烟酸溶于IOOmL 0.5%氢氧化钠溶液， 0. 25g吡唑啉酮溶于20mL N, N 二甲基甲酰胺，按5 1混合。
全文摘要
本发明涉及一种快速检测茶叶中含氰拟除虫菊酯农药残留的方法。本方法通过预先浸提茶叶中含氰拟除虫菊酯，将茶叶本身干扰成分排除后，对含氰拟除虫菊酯农药残留加热使之充分碱解，产生氰离子，之后加酸产生HCN气体，并通过抽空气装置转移吸收并测定CN离子浓度，利用异烟酸吡唑啉酮显色分光光度达到精确定量测定。本方法由于加热搅拌和抽动空气使碱解反应、HCN气体转移都很彻底，所以检测灵敏度高；同时排除了茶叶中干扰物质有利于精确定量检测。另外该方法成本低，设备简单，技术要求不如仪器分析严格，简便易于推广，是茶叶生产中鲜叶农残检测和成品茶品质分析的简易精确分析方法。
文档编号G01N21/78GK102262089SQ20111010914
公开日2011年11月30日 申请日期2011年4月28日 优先权日2011年4月28日
发明者余志 , 倪德江, 张群峰, 徐胜臻, 陈玉琼 申请人:华中农业大学