生猪肉检测法及其检测试剂盒的制作方法

文档序号:5937549阅读:335来源:国知局
专利名称:生猪肉检测法及其检测试剂盒的制作方法
技术领域
本发明涉及ー种检测非加热食品中的(生)猪肉的方法及其检测试剂盒。本发明更具体地涉及使用通过用猪血清中的免疫球蛋白G对动物免疫获得的可特异性地识别该免疫球蛋白G的抗体来检测非加热食品中的(生)猪肉的免疫层析测定试剂。
背景技术
EU科学运营委员会在其意见中报告了牛脑海绵状病(BSE)等牛传染病对人传染的危险性,自此,BSE感染牛的肉骨粉在家畜饲料中使用的问题受到重视。另外,对假冒食品的检查,如被视为地方品牌的假冒品牌牛肉等的假冒食品的检查,也受到了很大的关注。另ー方面,食物变态反应患者会因食品中所含的食物变态反应原而引发哮喘、皮 炎、胃肠功能障碍、过敏性休克等各种变态反应症状,有时还有造成了非常严重的后果的病例。食物变态反应患者还有增加的倾向,消费者对于食品的安全性的关心也非常高。通常已知的含有食物变态反应原的代表性食品有谷类(荞麦、小麦等)、蛋类、肉类(牛、猪、鸡等)、鱼类(鲭鱼、沙丁鱼等)、牛乳类、甲壳类(蟹等)、软体动物类、豆类(花生、大豆等)、果实类(芒果等)、蔬菜类(蒜等)等,这些食物变态反应诱发食品中含有谷蛋白、明胶、酪蛋白、卵清蛋白、卵类粘蛋白、溶菌酶、α-乳清蛋白、β_乳球蛋白等食物变态反应诱发成分。加工食品中也含有很多食品或食物变态反应原,目前的现状是无法简便地检测出它们。另外,对于进行了加工处理(加热、加压、酶解处理、冷冻、干燥、盐藏等)的食品,由于处理而使食品中的蛋白质成分发生分子结构性的改性或分子修饰。因此,为了简便地检测出加工食品中的这些成分,针对加工处理过的成分和未经加工处理的生鮮成分分别使用与其对应的适当的抗原或表位是非常重要的,这方面的探索和研究也得到了进展。例如,人们发现作为用于检测在高温、例如超过100°C的温度条件下加热处理存在于罐装食品或家畜用饲料等试样中的来自以牛、猪、鸡为代表的动物性组织的原料的检测试剂,用加热改性的血清白蛋白作为免疫原对动物进行免疫所生产的抗体可特异性地识别该加热改性的血清白蛋白,而对非加热的血清白蛋白不显示交叉反应性,从而提供了一种用于检测试样中加热处理过的来自动物性组织的原料的存在的方法(包含免疫层析法)。(參照专利文献I、专利文献2)将含有未改性和/或改性物质的食物变态反应原的混合物(蛋白质)对动物免疫所得到的IgE (免疫球蛋白E)抗体,以及使用该抗体检测食物变态反应原和食物变态反应诱发性食品的方法(包含免疫层析法)是公知的。(參照专利文献3)不仅如此,将已经保藏的特定细胞(加热的猪肉中的特定蛋白质对动物免疫所得的细胞)生产的单克隆抗体用于ELISA (免疫学测定的I种)方法中以检测加热处理的食品中的猪肉也是公知的。(參照专利文献4)由于该检测方法使用了由特定细胞(加热的猪肉中特定蛋白质对动物免疫所得的细胞)生产的单克隆抗体,因此可以准确地进行检测。然而,单克隆抗体的制备需要高额费用,因此该方法不适合针对医疗领域中的多数患者或具有不同饮食文化的一般消费者的普及。本发明人使用多克隆抗体代替使用上述单克隆抗体,对检测非加热食品中的生猪肉的免疫层析法进行了深入的研究。结果,在使用对兔进行免疫得到的来自兔的多克隆抗体时,发现即使仅有标准缓冲液也会发生反应,并且观察到很强的非特异性反应,因此从精度方面考虑无法使用。如上所述,在使用多克隆抗体、通过免疫层析法检测试样中的检测对象物一非加热食品中的生猪肉时,可观察到依然发生非特异性反应。因此,无法充分抑制非特异性反应的问题依然存在。目前,作为检查是否有向绞肉类中混入其它肉类(牛、猪、鸡等)的方法,公知的是一种免疫学方法CEIA法(cloth-based enzyme immunoassay)。已经知道,该方法是使用标记抗体检查有否猪肉混入,该检查中使用的标记抗体(偶联物)是兔抗猪IgG-辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体。(参照非专利文献I)。但是,该CEIA法的检查时间约需30分钟左右,并且在检查牛肉中有否混入其它肉 类时必须有5%以上的混入浓度。因此,该方法的检出灵敏度差,无法满足实际应用。为了将该CEIA法应用于更实用的、简便的、检测时间迅速的免疫层析法,本发明人进行了进一步的研究。结果发现,在尝试使用兔抗猪IgG作为检测抗体时,引发了非特异性的识别,这使得其无法使用。因此,需要进行进一步的研究。以往在肉类的检查中,作为免疫学方法,已知有CEIA法和ELISA (酶联免疫测试)法;作为遗传学方法,已知有PCR法。ELISA法与PCR法相比检测时间更快,但是与免疫层析法相比,检出仍需相当长的时间,并且还需要检测装置。ELISA法与PCR法相比特异性较低。PCR法虽然特异性高,但是检测大约需要3小时左右的时间,并且存在需要基因扩增装置或检测装置等设备的问题。现有技术文献专利文献专利文献I :日本特开2006-317226专利文献2 :日本特开2005-164583专利文献3 :日本特开2003-155297专利文献4 :美国专利第6288215非专利文献非专利文献I Biotechnoby Techniques, Vol. 11, No. 7, July 1997, 533-535 页

发明内容
本发明所要解决的问题本发明的目的在于通过制备可将非加热食品中所含的生猪肉与其它肉类区分开并特异性识别生猪肉的检测抗体,利用免疫测定法提供了一种不引发非特异性反应且可迅速、高性能和高灵敏度地进行非加热食品中的生猪肉的检出的最佳的免疫层析检测法,更具体地说,提供了一种使用多克隆抗体来检测非加热食品中的生猪肉的简便且高精度的免疫层析检测法,以及该检测法所需的检查用试剂盒,其中,所述多克隆抗体能作为可特异性识别生猪肉中含有的特定蛋白质的免疫球蛋白G的检测抗体而将非加热食品中所含的生猪肉与其它肉类区分开。解决该问题的手段本发明涉及非加热食品中的来自生猪肉的蛋白质的免疫层析检测,检测中所使用的展开液组成或试验试剂盒中使用的化学物质(生物物质以外)的组成是以往在免疫层析法中常用的试剂。例如,提取展开液是在超纯水加入非离子性表面活性剂(Tween 20、Triton-100等)和氯化钠,进ー步加入防腐剂(叠氮化钠等)。本发明人使用的作为用于制备在非加热食品检测系统中使用的抗体的免疫用抗原是由猪血清纯化的蛋白质ー免疫球蛋白G (以下简称“IgG”),可以使用市售商品。因此,本发明的用于检测来自非加热食品中的生猪肉的蛋白质的免疫层析检测所使用的检测抗体(生物物质)特别适合于非加热食品的检测系统。该检测抗体不仅与针对来自加热食品中的猪肉的蛋白质的免疫层析检测系统中所用的检测抗体不同,也与针对来自非加热食品中的猪肉的蛋白质的以往公知的免疫层析检测中使用的检测抗体(生物物质) 不同。在该检测抗体的基础上,本发明人首次完成了通过免疫层析法检查(探測)非加热食品中有无生猪肉的方法以及检查(检测)试剂盒。在本发明的非加热食品的检测系统中,例如优选使用可特异性识别生猪肉中所含的特定蛋白质IgG的多克隆抗体作为检测抗体。本发明提供下述(a)-(f)的免疫层析检测法、其中使用的抗体、检测用装置以及检测用试剂盒。(a)本发明的第I特征涉及针对来自生猪肉的蛋白质的使用多克隆抗体作为检测抗体的免疫层析检测法,其中该检测抗体以猪免疫球蛋白G对山羊进行免疫得到,并能特异性识别生猪肉中所含的免疫球蛋白G。(b)本发明的第2特征涉及根据(a)的免疫层析检测法,其中,检测抗体是山羊抗猪免疫球蛋白G抗体。(c)本发明的第3特征涉及针对来自生猪肉的蛋白质的免疫层析检测装置,该装置包括标记物保持部,其保持有标记抗体,该标记抗体是通过将猪免疫球蛋白G对山羊进行免疫得到、可特异性识别生猪肉中所含的免疫球蛋白G并用标记物标记的多克隆抗体;以及检测部,其固定有可特异性识别生猪肉中所含的免疫球蛋白G的多克隆抗体。(d)本发明的第4特征涉及根据(C)的免疫层析检测装置,该装置基本上由试样添加部、标记物保持部、层析介质、检测部和吸收部构成。(e)本发明的第5特征涉及针对来自生猪肉的蛋白质的免疫层析检测用试剂盒,该试剂盒基本上由试样添加部、标记物保持部、层析介质、检测部和吸收部构成,其中,所述标记物保持部保持有标记抗体,该标记抗体通过将猪免疫球蛋白G对山羊进行免疫得到,可特异性识别生猪肉中所含的免疫球蛋白G的多克隆抗体,并用标记物标记;所述检测部固定有可特异性识别生猪肉中所含的免疫球蛋白G的多克隆抗体。(f)本发明的第6特征涉及根据上述(e)的免疫层析检测用试剂盒,其中,标记抗体和固定于检测部的抗体是用同一方法对山羊免疫得到的。发明效果在根据本发明的针对非加热食品中来自生猪肉的蛋白质的免疫层析检测法中,使用通过生猪肉中所含的特定蛋白质IgG对山羊或兔(采用兔抗体时需进行预备操作)免疫所得的多克隆抗体作为检测抗体(生物物质),因此与使用单克隆抗体的情形相比,价格便宜、可稳定且容易地获得,因此该检测法可适用于针对众多需求者、例如医疗领域中的很多的食物变态反应患者或者在饮食文化上对猪肉有所避忌的一般消费者的食品成分识别。在本发明中,使用通过生猪肉中所含的特定蛋白质IgG对山羊或兔(采用兔抗体时需进行预备操作)免疫所得的多克隆抗体作为检测抗体(生物物质),因此,不仅对大豆等来自植物的蛋白质没有交叉反应,对来自牛、鸡、羊等的猪以外动物的蛋白质也没有交叉反应,灵敏度不会降低,可正确且容易地进行非加热食品中来自生猪肉的蛋白质的免疫层析法的检测结果的判定。根据本发明的针对来自生猪肉的蛋白质的免疫层析检测法不仅能简便且低成本地应用于检测来自非加热食品中的生猪肉的蛋白质,而且能同样地应用于检测实施了不会引起蛋白质改性的加工处理(加热、成型、干燥等)的健康食品、药品、家畜饲料、宠物食品等中的来自生猪肉的蛋白质。因此,本发明能够低成本地、简单地、正确地解决与食肉相关的各问题,从而可以处理对于生猪肉可引发变态反应的患者、或者基于嗜好上或饮食文化上不食用猪肉等理由的所谓与饮食生活相关的社会理念相关的问题。 与PCR或ELISA法相比,本发明的免疫层析检测用试剂盒不仅装置简便,操作容易,可迅速且正确地检测非加热食品中来自生猪肉的蛋白质,而且其器具的供给也非常便宜,因此对一般消费者的需求具有普及和贡献的优点。


图I是显示了针对来自生猪肉的蛋白质的免疫层析检测用试剂盒的使用方法的概略图。
具体实施例方式以下详细说明本发明。作为通过免疫测定法来将非加热食品中所含的生猪肉与其它肉类进行区别并特异性识别生猪肉的方法,本发明着眼于生猪肉中所含的蛋白质、特别是免疫球蛋白G (以下称为“IgG”),发现了用于IgG的免疫层析检测的多克隆抗体,它可在免疫层析法中作为识别上述免疫球蛋白G的抗体而有效地发挥功能。已经知道,酶标记的标记抗体(偶联物)作为检测该IgG的抗体在CEIA法中是有效的,但其识别的性能、灵敏度和所需时间等方面无法令人满意。作为IgG检测用抗体,人们考虑过采用各种具有特异性的抗体,例如免疫能力精密且抗体生成能力也胜过一筹的来自鸟类的典型代表为鸡的单(或多)克隆抗体、来自小鼠的单(或多)克隆抗体、来自马的单(或多)克隆抗体、来自山羊的单(或多)克隆抗体或来自兔的单(或多)克隆抗体。但是经进一步深入研究,结果发现,在这些单(或多)克隆抗体中,用IgG对山羊或兔进行免疫得到的多克隆抗体(对于来自兔的多克隆抗体需制成抗原结合性片段使用)是最简便且性能良好且能低成本地供给的检测抗体。并且,来自山羊的多克隆抗体和来自兔的多克隆抗体的抗原结合性片段在进行非加热食品中生猪肉的IgG的检测中不会引起非特异性反应,可以迅速、高性能且高灵敏度地进行非加热食品中生猪肉的IgG的检测,因此非常有效。
来自山羊的多克隆抗体和来自兔的多克隆抗体的抗原结合性片段的识别性能具备最适合免疫层析检测法的性能。更具体地说,一个最佳的实施方案是可提供简便且高精度的免疫层析检测法以及针对于此的检查用试剂盒,其中该检测法使用由来自山羊的多克隆抗体或来自兔的多克隆抗体的抗原结合性片段所构成的多克隆抗体作为可特异性识别特定蛋白质IgG的检测抗体,从而可将非加热食品中所含的生猪肉与其它肉类区分开。来自山羊的多克隆抗体可以直接作为抗体使用。然而在采用来自兔的多克隆抗体的情况下,至少在作为标记成分ー侧的检测抗体使用时,需要用酶切割脂溶性较高的Fe区域以制成抗原结合性片段,作为识别用抗体直接使用。以下将说明根据本发明的使用来自山羊的多克隆抗体或来自兔的多克隆抗体的试验试剂盒以检测非加热食品中生猪肉的IgG的实施方案。 本发明中使用的展开液组成或试验试剂盒中使用的化学物质(非生物物质)的组成是以往的免疫层析法中常用的试剂。作为上述免疫层析用试剂,可以使用各种化学物质,例如非离子性表面活性剤、盐、防腐剤,根据情况使用的缓冲剂、螯合剂等,以实现其功能/作用。可在本发明的免疫层析用试剂组合物中使用的非离子性表面活性剂的例子有聚氧こ烯烷基醚、聚氧こ烯/聚氧丙烯烷基醚、聚氧こ烯失水山梨醇脂肪酸酷(商品名“Tween”系列)、聚氧こ烯对叔辛基苯基醚(商品名“Triton”系列)、聚氧こ烯对叔壬基苯基醚(商品名“TritonN”系列)、烷基聚葡糖苷、脂肪酸ニこ醇酰胺、烷基单甘油基醚等。非离子性表面活性剂可以単独地使用,或将两种以上混合使用。在本发明的免疫层析用试剂组合物中使用的非离子性表面活性剂的含量为相对于免疫层析用试剂组合物的O. 01-10%重量的范围,优选在O. 05-5%重量的范围。含量低于O. 01%重量、例如为O. 005%重量,则无法进行正确的判定。低于O. 05%重量时,无法抑制非特异性反应,显示较难进行正确判定的倾向。含量为10%重量以上、例如12%重量或18%重量,则高于所需的浓度,不仅不会对非特异性反应的抑制带来有利的影响,并且在技术上无意义,不经济,浪費。非离子性表面活性剂还可以任意配合其它非离子性表面活性剤、离子性表面活性剂等结合使用。作为在本发明的免疫层析用试剂组合物如提取展开液中使用的盐的典型例子有氯化钠、氯化钾、氯化钙和氯化镁等。优选氯化钠。在本发明的免疫层析用试剂组合物如提取展开液中使用的盐的浓度为O. 02-2M的范围,优选O. 05-1M的范围,更优选O. 1-0. 5M的范围。浓度低于O. 02M、例如少至O. 002M,则蛋白质的提取作用不足。浓度为2M以上、例如多至5M或10M,则在技术上是无意义的量,高于所需浓度,不经济,浪費。作为本发明的免疫层析用试剂组合物中使用的盐,可以只使用ー种,也可以将两种以上配合使用。在本发明的免疫层析用试剂组合物如提取展开液中,根据需要使用的缓冲剂没有特别的限定,只要它能够实现其作用(缓冲作用),不会因试样的添加、或试样的蒸发或稀释所导致的浓度变化、也不会因为自外部混入少许杂质而产生显著的影响。
本发明的缓冲剂的例子有乙酸缓冲液(乙酸+乙酸钠)、磷酸缓冲液(磷酸+磷酸钠)、柠檬酸缓冲液(柠檬酸+柠檬酸钠)、硼酸缓冲液、Tris盐酸缓冲液(三(羟基甲基)氨基甲烷+盐酸)、TE缓冲液(Tris+乙二胺四乙酸)、TAE缓冲液(Tris+乙酸+乙二胺四乙酸)、TBE缓冲液(Tris+硼酸+乙二胺四乙酸)或HEPES缓冲液(2-[4_(2_羟基乙基)_1_哌嗪基]乙磺酸)等。这些缓冲剂可以单独地使用,或将至少两种相结合地使用。优选乙酸缓冲液、磷酸缓冲液、Tris盐酸缓冲液等,更优选Tris盐酸缓冲液。在本发明的免疫层析用试剂组合物中,根据需要使用的缓冲剂的浓度为O. 01-250mM的范围,优选10_200mM的范围,更优选30_180mM的范围。浓度低于O. OlmM、例如少至O. 008mM,则缓冲作用不足。浓度为250mM以上、例如多至260mM、280mM,则在技术上
是无意义的量,高于所需浓度,不经济,浪费。作为本发明的免疫层析用试剂组合物中的根据需要使用的缓冲剂,可以是将两种以上配合使用。

在本发明的免疫层析用试剂组合物中,根据需要使用的螯合剂没有特别限定,只要它可用作具有多个配位基的配位体即可。在本发明中,螯合剂的例子有乙二胺、二吡啶、乙二胺四乙酸(以下称为“EDTA”)、EDTA · 2Na、EDTA · 3Na、EDTA · 4Na、EDTA 衍生物(例如 EDTA · 2NH4、EDTA · 3K、EDTA ·特殊铵盐等)、EDTA金属盐(例如EDTA .Ca *2Na等)、羟基乙基乙二胺三乙酸(HEDTA)系、二羟基乙基乙二胺二乙酸(DHEDDA)系、1,3-丙烷二胺四乙酸(1,3_PDTA)系、二乙烯三胺五乙酸(DTPA)系、三乙烯四胺六乙酸(TTHA)系、亚硝基三乙酸(NTA)系、葡糖酸系、羟乙基亚氨基二乙酸(HMDA)系、L-天冬氨酸-N,N-二乙酸(ASDA)系、氨基三亚甲基膦酸(NTMP)系、羟基乙烷膦酸(HEDP)系、3-羟基-2,2’-亚氨基二琥珀酸四钠、菲咯啉、叶啉、冠醚等。在本发明的免疫层析用试剂组合物中,根据需要含有的螯合剂的浓度为O. Ol-IOmM的范围,优选O. l-5mM的范围,更优选O. 5_2mM的范围。浓度低于O. OlmM、例如少至O. 008mM,则无法抑制非特异性反应,无法进行正确的判定。浓度为IOmM以上、例如多至12mM或18mM,则高于所需浓度,不经济,浪费。在本发明的免疫层析用试剂组合物中,可以添加公知的能抑制基于生物学亲和性的副反应或抑制非特异性反应的添加剂,例如用于促进抗原抗体反应或抑制非特异性反应的蛋白质(例如牛血清白蛋白、酪蛋白、明胶等)、高分子化合物(例如聚乙二醇、甲基纤维素、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙烯基醇、葡聚糖等)、离子性表面活性剂或聚阴离子(例如硫酸葡聚糖、肝素、聚苯乙烯磺酸、硫酸软骨素等),以及防腐剂或抗菌剂等。这些添加剂可以单独地使用,或两种以上相结合地使用,其使用有效,没有任何妨碍。这些用于促进抗原抗体反应或抑制非特异性反应的蛋白质、高分子化合物、离子性表面活性剂或聚阴离子以及防腐剂或抗菌剂等中的一种或多种添加剂可以保持在构成固定相的层析介质上的流动相的流路上,其使用有效,没有任何妨碍。本发明的免疫层析用试剂组合物的使用方法可以是将组合物涂布在免疫层析装置的样品板(试样添加部分)中,或将样品板浸溃在组合物中,然后进行干燥,由此将组合物保持在样品板上。将本发明的免疫层析用试剂组合物保持在免疫层析介质上的其它方式可以是在试样添加部位的端部和吸收部位之间的适当位置处设置添加剂保持部,以这样的方式将组合物保持在其中。例如,组合物的施加区域可以在试样添加部分的附近、标记物保持部位或其附近。其中,优选将组合物只保持在试样添加部分和/或标记物保持部上。本发明的免疫层析用试剂组合物的使用方法并不限于上述使用方式,该组合物可以提取展开液的形式使用,也可以试样的稀释液的形式使用。例如,本发明的提取展开液是超纯水或缓冲液,其中加入了非离子性表面活性剂(如Tween 20、Triton-100等)、氯化钠、防腐剂(如叠氮化钠)等,并且还可添加公知的能抑制基于生物学亲和性的副反应或抑制非特异性反应的上述添加剂(例如牛血清白蛋白、PVP等)。提取展开液通常是使用超纯水作为溶剂,在其中加入非离子表面活性剤、蛋白质和高分子化合物,还可以根据需要进ー步加入缓冲液或螯合剂等。加入的顺序没有特别限定,也可以同时加入。在该组合物作为提取展开液使用时,可以根据所要检测的试样的状态、例如为固体状还是糊剂状来选择合适提取展开液的使用方式。可以将所要检测的试样与展开液预先混合,将混合物供给/滴加到样品板(试样添加部)上以展开,也可以先将试样供给/滴加到样品板(试样添加部)上,然后将展开液供给/滴加到样品板(试样添加部)上以展开。在该组合物作为试样稀释液使用时,将试样稀释为稀释液,然后以展开液的形式供 给、滴加到样品板(试样添加部)上,也可以将样品板部分(试样添加部)浸溃在稀释液中以进行展开。本发明的含有检测对象物的试样(检体)的代表性例子有非加热食品,在蛋白质未改性的温度下进行了主要用于干燥或灭菌处理等处理的食品、健康食品和宠物食品等,但并不限于此,家畜饲料或药品等也可以作为试样(检体)使用。在本发明中,优选使用多克隆抗体作为检测抗体,其中,所述多克隆抗体是通过将猪血清中所含的IgG (市售商品)作为免疫用抗原对兔或山羊进行免疫得到的,其可特异性识别上述IgG。本发明的多克隆抗体的制备方法如下所述。[多克隆抗体的制备]使用猪血清中所含的IgG (市售商品)按照常规方法对兔进行免疫,获得抗血清。由抗血清中纯化来自兔的抗猪IgG抗体,这通过用50%饱和硫酸铵进行盐析,然后用DEAE柱(阴离子交換柱)进行纯化、回收而实现。但是,该来自兔的抗猪IgG抗体如果直接在免疫层析检测法或ELISA检测法中作为检测抗体使用,虽然会与生猪肉显著反应,但是也会与标准缓冲液(背景)反应,因此无法作为检测抗体使用。因此,没有对牛肉、羊肉、鸡肉实施。该试验结果如“表I”所示。表中的“HamaPhoto”是“Hamamatsu光密度计”的简称。[表 I]
权利要求
1.ー种利用多克隆抗体作为检测抗体的针对来自生猪肉的蛋白质的免疫层析检测法,其中,所述多克隆抗体通过用猪免疫球蛋白G对山羊进行免疫得到,并且能特异性识别生猪肉中所含的免疫球蛋白G。
2.一种针对来自生猪肉的蛋白质的免疫层析检测装置,包括保持有标记抗体的标记物保持部,所述标记抗体是用猪免疫球蛋白G对山羊进行免疫得到的、能特异性识别生猪肉中所含的免疫球蛋白G且用标记物标记的多克隆抗体;以及检测部,其中固定有能特异性识别生猪肉中所含的免疫球蛋白G的多克隆抗体。
3.根据权利要求2所述的免疫层析检测装置,其特征在于,所述装置基本上由试样添加部、标记物保持部、层析介质、检测部和吸收部构成。
4.一种针对来自生猪肉的蛋白质的免疫层析检测用试剂盒,所述试剂盒基本上由试样添加部、标记物保持部、层析介质、检测部和吸收部构成,其中,所述标记物保持部保有标记抗体,所述标记抗体是用猪免疫球蛋白G对山羊进行免疫得到的、能特异性识别生猪肉中所含的免疫球蛋白G且用标记物标记的多克隆抗体;所述检测部固定有能特异性识别生猪肉中所含的免疫球蛋白G的多克隆抗体。
5.根据权利要求4所述的免疫层析检测用试剂盒,其特征在于,所述标记抗体和固定于所述检测部的抗体是用同一方法对山羊进行免疫得到的。
全文摘要
本发明提供一种检测抗体的制备方法,以及使用该检测抗体进行的简便且高精度的检测方法及其检查试剂盒。该检测抗体适合用于特异性地、高性能且高灵敏度地通过免疫测定法对非加热食品中生猪肉的进行检测,且不会引发非特异性反应。本发明还提供了一种非加热食品中来自生猪肉的蛋白质的免疫层析检测法,其中,以可特异性识别非加热食品中的生猪肉所含的免疫球蛋白G的抗体作为检测抗体;以及用于实施该检测法的免疫层析检测装置和免疫层析检测用试剂盒。
文档编号G01N33/543GK102687012SQ201180004957
公开日2012年9月19日 申请日期2011年2月24日 优先权日2010年2月25日
发明者岩本久彦, 望月一芳, 榊原雄広, 芝井勇亮 申请人:田中贵金属工业株式会社
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