检测齐帕特罗的化学发光免疫检测试剂盒的制作方法
【专利摘要】本发明提供了一种检测齐帕特罗的化学发光免疫检测试剂盒，属于免疫学检测领域。本发明的试剂盒由包被有齐帕特罗-载体蛋白偶联物的不透明白色酶标板、齐帕特罗标准品、齐帕特罗-过氧化物酶标记抗体工作液、发光底物液、浓缩样品稀释液、浓缩洗涤液组成。所述齐帕特罗-载体蛋白偶联物是将齐帕特罗与载体蛋白通过混合酸酐法或碳二亚胺法偶联得到，浓缩洗涤液含有0.05%吐温-20。与传统的酶联免疫吸附分析法比较，本发明的试剂盒具有更高的灵敏度，且检测时间短、费用低，可用于动物尿液、血样、组织及内脏等样品中齐帕特罗的残留量检测。
【专利说明】检测齐帕特罗的化学发光免疫检测试剂盒
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种检测齐帕特罗的化学发光免疫检测试剂盒，用于检测动物源性食品中如动物组织、内脏、血液、尿液和饲料、饲料原料中的齐帕特罗含量或残留量。属于免疫学检测领域。
【背景技术】
[0002]用β 2_肾上腺素受体激动剂能增加肌肉/脂肪比，可明显提高饲养动物瘦肉率。但大量使用或长期超量使用，且不遵守安全停药期，则会在饲养动物组织中蓄积，人食用了这种动物组织后会引起中毒甚至死亡，因此很多国家和国际组织已经禁止这类化合物用于食品动物饲养。运动员大剂量使用该类药物，可以增加肌肉/脂肪比并提高肌肉力量，还对呼吸系统和神经系统有兴奋作用，可以在比赛中瞬间爆发，获得超常水平的发挥，有违公平竞赛的原则，所以国际奥委会明令禁止参赛运动员使用此类药物。
[0003]齐帕特罗(ZilpateiOl)是一种新型β 2 -肾上腺素能激动剂，其化学结构(见式I)与常见的苯胺类-肾上腺素类激动剂(克仑特罗和沙丁胺醇)和苯酚类β -肾上腺素类激动剂(莱克多巴胺)是完全不同的，它的作用效果相当于克仑特罗的十分之一，但比莱克多巴胺更有效。在墨西哥和南非齐帕特罗被允许作为宰杀期牛的饲料添加剂使用，但是在欧盟被明令禁止使用。
【权利要求】
1.一种检测齐帕特罗的化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于试剂盒中的以下成份: (1)包被有齐帕特罗-载体蛋白偶联物的不透明白色酶标板；所述齐帕特罗-载体蛋白偶联物是将齐帕特罗与载体蛋白通过混合酸酐法或碳二亚胺法偶联得到，所述载体蛋白为人血清白蛋白、牛血清白蛋白、鸡蛋白蛋白、鼠血清蛋白或兔血清蛋白； (2)齐帕特罗标准品； (3)齐帕特罗-过氧化物酶标记抗体:该成分为用过氧化物酶标记的齐帕特罗抗体，所述齐帕特罗抗体为单克隆抗体； (4)发光底物液:该发光底物液是以鲁米诺货异鲁米诺为发光剂的化学发光底物液，分为A液和B液保存，在使用前按1:1混合使用；其中A液为发光增强剂加鲁米诺货发光增强剂加异鲁米诺，B液为过氧化氢溶液或尿素过氧化氢溶液； (5)2倍浓缩稀释液； (6)20倍浓缩洗涤液； 根据权利要求1的齐帕特罗的化学发光免疫检测试剂盒，其中，所述不透明白色酶标板为96孔的可拆卸或不可拆卸的不透明白色酶标板。
2.根据权利要求1的齐帕特罗的化学发光免疫检测试剂盒，其中，所述齐帕特罗标准品的浓度为0.01-16.0 Pg/L的浓度区间。
3.根据权利要求1的齐帕特罗的化学发光免疫检测试剂盒，其中，所述齐帕特罗-过氧化物酶标记抗体工作液是用抗体稀释液稀释成1:20000比例； 根据权利要求1的齐帕特罗的化学发光免疫检测试剂盒，其中，所述发光底物液为商品化的任一种以鲁米诺货异鲁米诺为发光剂的化学发光底物液。
4.根据权利要求1的齐帕特罗的化学发光免疫检测试剂盒，其中，所述2倍浓缩稀释液，其成分为0.01mol/L, pH7.4的磷酸缓冲液、甘氨酸-HCl缓冲液或Tris-HCl缓冲液，使用前请按1:1稀释(1份浓缩样品稀释液+1份去离子水)。
5.根据权利要求1的齐帕特罗的化学发光免疫检测试剂盒，其中，所述20倍浓缩洗涤液，其包含0.05%吐温-20，0.01mol/L的PBST，pH值范围7.0-7.5之间，使用前请按I:19稀释(1份浓缩稀释液+19份去离子水)。
【文档编号】G01N21/76GK103808933SQ201210438102
【公开日】2014年5月21日 申请日期:2012年11月6日 优先权日:2012年11月6日
【发明者】杜道林, 洪霞 申请人:江苏维赛科技生物发展有限公司