心力衰竭患者的检测方法、心脏疾病的识别方法、心力衰竭的检查试剂、心力衰竭的检查试剂盒、用于检测心力衰竭的装置及用于检测心力衰竭的程序与流程

本发明涉及心力衰竭患者的检测方法、心脏疾病的识别方法、心力衰竭的检查试剂、心力衰竭的检查试剂盒、用于检测心力衰竭的装置及用于检测心力衰竭的程序。
背景技术：
：心力衰竭是由心肌的收缩、扩张的不全而根据末梢器官的需要的血液的供给变得不充分，或由心肌的收缩、扩张的不全而发生器官间的血流的不均衡的临床综合征。心力衰竭由心肌梗塞等的缺血性心脏疾病、扩张型心肌症等的特发性心肌症等的基础疾病引起。心力衰竭的诊断从呼吸困难或倦怠感等的临床症状或由健康诊断的指出等，由医疗接见、心电图检查、胸部X线检查等的筛选检查确定诊断。另外，近年，通过测定脑钠利尿肽(BNP)或作为其前体的人脑性钠利尿肽前体N端片段(NT-proBNP)，进行心力衰竭的辅助诊断。细胞骨架关联蛋白4(Cytoskeleton-associatedprotein4：CKAP4)是也称为p63的、分子量63,000的存在于小胞体中的2型的膜蛋白(非专利文献1、2)。CKAP4一直被被认为是对于保持小胞体的结构发挥重要的作用(非专利文献2～4)，得知是对于抗生长因子、组织纤溶酶原活化因子、表面活化蛋白A等的细胞表面的受体(非专利文献1、5～7)。另外，CKAP4被报告抑制膀胱癌细胞的增殖(非专利文献8)、与肝细胞癌的进行或转移关联(非专利文献9)。现有技术文献非专利文献非专利文献1：GuptaN,ManevichY,KaziAS,TaoJQ,FisherAB,BatesSR.Identificationandcharacterizationofp63(CKAP4/ERGIC-63/CLIMP-63),asurfactantproteinAbindingprotein,ontypeIIpneumocytes.AmJPhysiolLungCellMolPhysiol.2006；291:L436-L446。非专利文献2：SchweizerA,EricssonM,BachiT,GriffithsG,HauriHP.Characterizationofanovel63kDamembraneprotein.ImplicationsfortheorganizationoftheER-to-Golgipathway.JCellSci.1993；104(pt3)：671-683。非专利文献3：NikonovAV,HauriHP,LauringB,KreibichG.Climp-63-medi-atedbindingofmicrotubulestotheERaffectsthelateralmobilityoftransloconcomplexes.JCellSci.2007；120(pt13):2248-2258。非专利文献4：ShibataY,ShemeshT,PrinzWA,PalazzoAF,KozlovMM,RapoportTA.Mechanismsdeterminingthemorphologyofthepe-ripheralER.Cell.2010；143:774-788。非专利文献5：BatesSR,KaziAS,TaoJQ,etal.RoleofP63(CKAP4)inbindingofsurfactantprotein-AtotypeIIpneumocytes.AmJPhysiolLungCellMolPhysiol.2008；295:L658-L669。非专利文献6：ConradsTP,TocciGM,HoodBL,etal.CKAP4/p63isareceptorforthefrizzled-8protein-relatedantiproliferativefactorfromintersti-tialcystitispatients.JBiolChem.2006；281:37836-37843。非专利文献7：ShahjeeHM,KochKR,GuoL,ZhangCO,KeaySK.Antiprolifera-tivefactordecreasesAktphosphorylationandaltersgeneexpressionviaCKAP4inT24bladdercarcinomacells.JExpClinCancerRes.2010；29:160。非专利文献8：ZhangJ,PlaneySL,CeballosC,StevensSMJr,KeaySK,ZachariasDA.IdentificationofCKAP4/p63asamajorsubstrateofthepalmi-toylacyltransferaseDHHC2,aputativetumorsuppressor,usinganovelproteomicsmethod.MolCellProteomics.2008；7:1378-1388。非专利文献9：LiS-X,TangG-S,ZhouD-Xetal.Prognosticsignificanceofcytoskeleton-associatedmembraneprotein4anditspalmitoylacyltransferaseDHHC2inhepatocellularcarcinoma.Cancer2014；120:1520-1531。技术实现要素：【发明要解决的技术课题】现在，为了诊断心力衰竭，进行血中的BNP、NT-proBNP的测定。但是，由于这些的标志物不仅在心力衰竭，在不引起心力衰竭的心房颤动或肥大型心肌症中也显示高值，基本上无法特异性检测心力衰竭患者是现状。本发明的目的在于，第一，提供心力衰竭患者的特异性高的检测方法。另外，作为其他目的在于，提供心脏疾病的识别方法、心力衰竭的检查试剂、用于检测心力衰竭患者的心力衰竭的检查试剂盒、以及用于检测心力衰竭的装置及程序。【解决课题的技术方案】本发明人经复锐意研究而发现，心力衰竭患者的血液试样中的CKAP4的测定值，但与未发生心力衰竭的症状的者的CKAP4的测定值比显著地减少。另外发现，在未引起高血压、肥大型心肌症、心房颤动等的心力衰竭的心脏疾病患者中，血液试样中的CKAP4的测定值与未发生心力衰竭的症状的个体同等。本发明是基于所述见解完成的，含以下的实施方式。I.心力衰竭患者的检测方法，其包括下述工序：(1)取得从受试体采集的血液试样中的CKAP4的测定值的工序，(2)将所述受试体的血液试样中的CKAP4的测定值与指定的基准值比较的工序，及(3)当所述受试体的血液试样中的CKAP4的测定值比所述指定的基准值低时，确定所述受试体是心力衰竭患者的工序。I-1.I.所述的方法，其中在上述取得工序中，使上述血液试样和抗CKAP4抗体接触，形成含上述血液试样中的CKAP4和上述抗CKAP4抗体的复合物，通过检测上述复合物，取得上述血液试样中的CKAP4的测定值。I-2.I.所述的方法，其中在上述取得工序中，使上述血液试样、固相、第1抗CKAP4抗体和第2抗CKAP4抗体和标记物质接触，在上述固相上形成含上述血液试样中的CKAP4、上述第1抗CKAP4抗体和上述第2抗CKAP4抗体和标记物质的复合物，通过检测上述复合物，取得上述血液试样中的CKAP4的测定值。I-3.I-2.记载的方法，其中上述复合物形成后，通过清洗上述固相除去不形成复合物的成分。II.心脏疾病的识别方法，包括下述工序：(A)取得从心脏疾病患者或疑似心脏疾病的受试体采集的血液试样中的CKAP4的测定值的工序，(B)所述患者或将所述受试体的血液试样中的CKAP4的测定值与指定的基准值比较的工序，及(C)当所述患者或所述受试体的血液试样中的CKAP4的测定值比所述指定的基准值低时，确定所述患者或所述受试体是心力衰竭的，或者当所述患者或所述受试体的血液试样中的CKAP4的测定值与所述指定的基准值同程度以上时，确定所述患者或所述受试体是心力衰竭以外的心脏疾病的工序。II-1.上述II.所述的方法，其中在上述取得工序中，使上述血液试样和抗CKAP4抗体接触，形成含上述血液试样中的CKAP4和上述抗CKAP4抗体的复合物，通过检测上述复合物，取得上述血液试样中的CKAP4的测定值。II-2.上述II.所述的方法，其中在上述取得工序中，使上述血液试样、固相、第1抗CKAP4抗体和第2抗CKAP4抗体和标记物质接触，在上述固相上形成含上述血液试样中的CKAP4、上述第1抗CKAP4抗体和上述第2抗CKAP4抗体和标记物质的复合物，通过检测上述复合物，取得上述血液试样中的CKAP4的测定值。II-3.上述II-2.所述的方法，其中上述复合物形成后，通过清洗上述固相除去不形成复合物的成分。在III.上述I.或II.所述的方法中使用的，含抗CKAP4抗体的，心力衰竭的检查试剂。III-1.上述抗CKAP4抗体被生物素或标记物质标记的，上述III.所述的检查试剂。IV.含第1抗CKAP4抗体、固相、第2抗CKAP4抗体及标记物质的，在上述I、I-1～I-3、II、及II-1～I-3之任一项所述的方法中使用的，心力衰竭的检查试剂盒。IV-1.标记物质是碱性磷酸酶，及/或固相是磁珠的，上述IV.所述的心力衰竭的检查试剂盒。V.心力衰竭患者的检测装置，其具备含处理器及在上述处理器的控制下的存储器的计算机：在上述存储器中记录有用于在上述计算机中执行下列工序的计算机程序，(1)所述受试体的血液试样中的CKAP4的测定值的工序，(2)将所述受试体的血液试样中的CKAP4的测定值与指定的基准值比较的工序，及(3)当所述受试体的血液试样中的CKAP4的测定值比所述指定的基准值低时，确定所述受试体是心力衰竭患者的工序。VI.在含处理器及在上述处理器的控制下的存储器的计算机中执行下列工序的计算机程序：(1)取得从受试体采集的血液试样中的CKAP4的测定值的工序，(2)将所述受试体的血液试样中的CKAP4的测定值与指定的基准值比较的工序，及(3)当所述受试体的血液试样中的CKAP4的测定值比所述指定的基准值低时，确定所述受试体是心力衰竭患者的工序。【发明效果】由本发明可提供特异性检测心力衰竭患者的方法。另外，可提供心力衰竭和其他心脏疾病的识别方法。【附图说明】【图1】显示使用各组的血清时的CKAP4的测定值的分布。横轴表示，各疾病组、即，由扩张型心肌症导致的心力衰竭患者组(2组)、由缺血性心脏疾病导致的心力衰竭患者组(1组)、健康者组(6组)、高血压患者组(3组)、心房颤动患者组(5组)、肥大型心肌症患者组(4组)。纵轴显示CKAP4的测定值(pg/ml)。【图2】显示由缺血性心脏疾病导致的心力衰竭患者组(1组)和健康者组(6组)的ROC曲线。【图3】显示由扩张型心肌症导致的心力衰竭患者组(2组)和健康者组(6组)的ROC曲线。【图4】显示由缺血性心脏疾病导致的心力衰竭患者组(1组)和高血压患者组(3组)的ROC曲线。【图5】显示由扩张型心肌症导致的心力衰竭患者组(2组)和高血压患者组(3组)的ROC曲线。【图6】显示由缺血性心脏疾病导致的心力衰竭患者组(1组)和心房颤动患者组(5组)的ROC曲线。【图7】显示由扩张型心肌症导致的心力衰竭患者组(2组)和心房颤动患者组(5组)的ROC曲线。【图8】显示由缺血性心脏疾病导致的心力衰竭患者组(1组)和肥大型心肌症患者组(4组)的ROC曲线。【图9】显示由扩张型心肌症导致的心力衰竭患者组(2组)和肥大型心肌症患者组(4组)的ROC曲线。【图10】是显示检查试剂盒的一例的概略图。【图11】是显示心力衰竭患者的检测装置的一例的概略图。【图12】是显示心力衰竭患者的检测装置的硬件构成的框图。【图13】是使用心力衰竭患者的检测装置的心力衰竭患者的检测方法的流程图。【实施方式】【1.用语的说明】首先对于在本说明书、权利要求、摘要中使用的用语进行说明。“心力衰竭”是指是充血性心力衰竭，且为可基于表1所示的Framingham研究(Framinghamstudy)的充血性心力衰竭诊断基准被诊断为心力衰竭的疾病。【表1】在本发明的“心力衰竭”中，含急性心力衰竭及慢性心力衰竭的两方。急性心力衰竭的诊断基准可适用关于例如循环器病的诊断和治疗的指南(2010年左右同研究班报告)急性心力衰竭治疗指南(2011年改订版)(日本循环器学会、他)中记载的基准。慢性心力衰竭的诊断基准可适用关于例如循环器病的诊断和治疗的指南(2009年左右同研究班报告)慢性心力衰竭治疗指南(2010年改订版)(日本循环器学会、他)中记载的基准。另外，作为成为心力衰竭的原因的基础疾病，可举出心绞痛、急性心肌梗塞、缺血性心肌症等的缺血性心脏疾病；扩张型心肌症、限制型心肌症、肥大型心肌症、蛸壺型心肌症、产褥性心肌症等的心肌症；高血压症；心内膜炎、腱索断裂、起因于大动脉解离等的瓣逆流症；心肌炎；大动脉瓣狭窄；心压塞、收缩性心膜炎等的心膜疾病；心房中隔缺损、心室中隔缺损等的先天性心脏疾病；大动脉解离；瓣狭窄症等的瓣膜疾病；肺塞栓症或肺血栓症；败血症、甲状腺中毒症、贫血、短络疾病、脚气心、Paget病等的高心输出量综合征等。作为基础疾病，优选是缺血性心脏疾病、心肌症、心肌炎，更优选为缺血性心脏疾病或心肌症。“个体”不特别限制，在个体中包括人及人以外的哺乳动物。作为哺乳动物，例如可举出牛、马、绵羊、山羊、猪、狗、猫、兔、猴等。优选为人。另外，与个体的年龄、性别无关。作为个体，优选是活着的个体。“受试体”可为有任何疾病的个体，也可为无任何疾病的个体。另外，受试体可为有劳作性或非劳作性的气促，呼吸困难、起座呼吸、倦怠感、易疲劳感、胸部不快感、胸痛等的自觉症状者，也可为无症状的者。再者，所述受试体包括由医疗接见；血压检查；心音检查及心机图检查等的理学检查；胸部X线检查；胸部CT检查；心MR检查；标准12衍生等的心电图检查；心回波检查；测定肌酸酐激酶(CK)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、BNP、NT-proBNP等的值的血清或血浆的生物化学检查等、根据公知的诊断基准而疑似心脏疾病的个体。“心脏疾病患者”是指根据在上述“受试体”的说明中记载的公知的诊断基准被诊断为心脏疾病的患者。作为心脏疾病，可举出心绞痛、急性心肌梗塞、缺血性心肌症等的缺血性心脏疾病；扩张型心肌症、限制型心肌症、肥大型心肌症、蛸壶型心肌症、产褥性心肌症等的心肌症；高血压症；心室心动过速、心室颤动、心房颤动、心房扑动、上室性心动过速等的心律失常；心内膜炎、腱索断裂、起因于大动脉解离等的瓣逆流症；心肌炎；大动脉瓣狭窄；心压塞、收缩性心膜炎等的心膜疾病；心房中隔缺损、心室中隔缺损等的先天性心脏疾病；大动脉解离；瓣狭窄症等的瓣膜疾病；肺塞栓症或肺血栓症；败血症、甲状腺中毒症、贫血、短络疾病、脚气心、Paget病等的高心输出量综合征等。作为心脏疾病，优选是缺血性心脏疾病、心肌症、心肌炎，更优选为缺血性心脏疾病或心肌症。“血液试样”是指从受试体采集的血液(全血)、或者从所述血液调制的血清、或者血浆。更优选为血清或血浆，再优选为血清。在采集血浆时使用的抗凝固剂的种类不特别限制。确定在测定中使用的受试体的血液试样和指定的基准值的血液试样可为同种，也可为异种，优选同种。另外，在作为血液试样使用血浆时，用于确定指定的基准值的血浆优选从使用与受试体的血浆相同的抗凝固剂采血的血液调制。再者，血液试样可为新鲜的，也可为保存的。在保存血液试样时，可在室温环境、冷藏环境或冷冻环境中保存，优选为冷冻保存。“CKAP4的测定值”是指反映CKAP4蛋白质(以下，简称为“CKAP4”)的量或浓度的值。在将所述测定值用“量”标记时，可为摩尔，也可为质量，优选用质量标记。另外，在将值用“浓度”表示时，可为摩尔浓度，也可为血液试样的相对于一定容量的质量的比例(质量/容量)，优选为质量/容量。作为反映量或浓度的值，除了上述之外，也可为荧光或发光等的信号的强度。“指定的基准值”是指CKAP4的测定值的基准值。所述基准值可基于未发生心力衰竭的症状的个体的血液试样中的CKAP4的测定值及/或发生心力衰竭的症状的个体的血液试样中的CKAP4的测定值确定。例如，取得使用发生心力衰竭的症状的多个个体的血液试样测定的CKAP4测定值和使用未发生心力衰竭的症状的多个个体的血液试样测定的CKAP4测定值。可以可基于这些多个值最高精度分类阳性和阴性的值作为“基准值”。其中，“可最良精度分类的值”可由检查的目的基于灵敏度、特异性、阳性的中率、阴性的中率等的指标适宜设定。作为例如一实施方式，在从未发生心力衰竭的症状的多个个体得到的各自的血液试样中的CKAP4的测定值之中，也可以最低的测定值作为基准值。例如，如筛选检查一样，欲尽可能降低假阳性时可适宜地使用所述基准值。另外，作为别的实施方式，在基于发生心力衰竭的症状的个体的血液试样中的CKAP4的测定值确定基准值时，可从发生心力衰竭的症状的多个个体的血液试样中的CKAP4的测定值之中，将最高的测定值确定为基准值。例如，如筛选检查一样，欲尽可能降低假阴性时可适宜地使用所述基准值。另外，作为别的实施方式，基准值也可作为未发生心力衰竭的症状的个体的血液试样中的CKAP4的测定值本身，或者未发生心力衰竭的症状的个体的多个CKAP4的测定值的平均值、中位值或最频值。另外，也可基于未发生心力衰竭的症状的个体的多个血液试样中的CKAP4的测定值确定。在此时，可以所述多个血液试样中的[CKAP4的测定值的平均值]作为基准值，优选可以[使从“所述平均值”减去“所述多个血液试样中的CKAP4的测定值的标准偏差的值扩大1倍而得到的值”的值]作为基准值，或者更优选可以[使从“所述平均值”减去“所述标准偏差的值扩大2倍而得到的值”的值]作为基准值。另外，还作为基准值，也可使用相同受试体而所述受试体发生心力衰竭之前、优选为发生心脏疾病之前取得的过去的CKAP4的测定值(可为一个测定值，也可为多个测定值的平均值、中位值、最频值等)。在基于未发生心力衰竭的症状的个体的血液试样中的CKAP4的测定值和发生心力衰竭的症状的个体的血液试样中的CKAP4的测定值确定基准值时，可以未发生心力衰竭的症状的1个体的血液试样中的CKAP4的测定值和发生心力衰竭的症状的1个体的血液试样中的CKAP4的测定值的平均值作为基准。另外，也可以将“未发生心力衰竭的症状的个体的多个血液试样中的CKAP4的测定值的平均值”和“发生心力衰竭的症状的个体的多个血液试样中的CKAP4的测定值的平均值”进一步平均的值作为基准值。作为其他实施方式，也可以未发生心力衰竭的症状的个体和发生心力衰竭的症状的个体作为一组，以此一组的血液试样中的CKAP4的测定值的中位值作为基准值。作为进一步的其他实施方式，在确定上述基准值的方法中，也可代替未发生心力衰竭的症状的个体的血液试样中的CKAP4的测定值而使用健康个体的血液试样中的CKAP4的测定值。这些基准值可为在取得受试体的血液试样的CKAP4的测定值时确定，也可为预先确定。“受试体的血液试样中的CKAP4的测定值比指定的基准值低”或“心脏疾病患者或疑似心脏疾病的受试体的血液试样中的CKAP4的测定值比指定的基准值低”是指受试体、心脏疾病患者或疑似心脏疾病的受试体的血液试样中的CKAP4的测定值示比指定的基准值低的值时。此时的下限值不特别限制，但优选为“0”。“心脏疾病患者或疑似心脏疾病的受试体的血液试样中的CKAP4的测定值是指定的基准值和同程度以上”是指心脏疾病患者或疑似心脏疾病的受试体的血液试样中的CKAP4的测定值与指定的基准值相同或比其高。此时的上限值不特别限制，优选为可在个体的血液试样中示的值的最高值。作为进一步的别的实施方式，也可代替基于上述之一的基准值检测心力衰竭患者的方法、或者识别心脏疾病的方法而进行组合多个基准值而检测心力衰竭患者或识别心脏疾病。例如，预先测定的心力衰竭患者及无心力衰竭的个体的多个CKPA4的测定值分为“高”、“中”、“低”等的多个数值范围。此时，在受试体、心脏疾病患者或疑似心脏疾病的受试体的血液试样中的CKAP4的测定值分布在“低”的数值范围时，提供所述血液试样的个体可被判断为有心力衰竭。另外，在受试体、心脏疾病患者或疑似心脏疾病的受试体的血液试样中的CKAP4的测定值分布在“高”的数值范围时，可判断为提供所述血液试样的个体无心力衰竭。再者，在受试体、心脏疾病患者或疑似心脏疾病的受试体的血液试样中的CKAP4的测定值分布在“中”的数值范围时，也可组合此外的检查数据或医学所见而判断心力衰竭的有无。“健康个体”是指，不特别限制，优选为“个体”的项中记载的人或人以外的哺乳动物，在生物化学检查、血液检查、尿检查、血清检查、生理学检查等中不示异常数据的个体。健康个体的年龄、性别不特别限制。“未发生心力衰竭的症状的个体”不特别限制，优选为“个体”的项中记载的人或人以外的哺乳动物，是无法根据公知的诊断基准诊断为发生心力衰竭的症状的个体。“多个血液试样”是2个以上、优选为5个以上、更优选为10个以上的血液试样。这些可为从不同的个体采集的血液试样，也可为采集时不同的相同个体的多个血液试样。“多个测定值”是2个以上、优选为5个以上、更优选为10个以上的CKAP4的测定值。“多个个体”是2个以上、优选为5个以上、更优选为10个以上的个体。为了确定基准值取得CKAP4的测定值的个体与受试体的种、年龄、性别等没必要必然相同，但优选为同种。另外，优选上述个体与受试体同年代及/或相同性别。“抗CKAP4抗体”只要与CKAP4特异性结合就无限制，也可使用以CKAP4或其一部分作为抗原免疫人以外的动物而得到的多克隆抗体、单克隆抗体、及它们的片段(例如，Fab、F(ab)2等)的任一种。另外，免疫球蛋白的类及亚类不特别限制。作为为了制作抗CKAP4抗体而使用的成为抗原的CKAP4，优选是人(例如UniProtKB/Swiss-Prot：Q07065.2)、小鼠(例如NCBIReferenceSequence：NP_780660.1)、大鼠(例如CBIReferenceSequence：NP_001102210.1)等来源的CKAP4，更优选为有SEQIDNO:1所示的氨基酸序列的人CKAP4。作为抗原使用的CKAP4可为从哺乳类细胞根据公知的方法提取的，也可为由重组基因工程学技术得到的重组体蛋白质。在以CKAP4的一部分作为抗原时，也可使用将CKAP4用酶等消化而得到的片段，另外，也可以有与CKAP4的一部分的氨基酸序列相同的序列的肽作为抗原。所述肽可由公知的方法合成。再者，作为抗CKAP4抗体，例如，也可使用与由MyBioSource公司出售的抗人CKAP4抗体(货号MBS6009861等)、由Abcam公司(英国、Cambridge)出售的人CKAP4反应的抗CKAP4抗体(ab84712)等的市售品。【2.心力衰竭患者的检测方法】在本实施方式中，取得血液试样中的CKAP4的测定值，使用所述CKAP4的测定值而检测心力衰竭患者。(i)取得CKAP4的测定值的工序在本工序中，首先，取得从受试体采集的血液试样中的CKAP4的测定值。血液试样中的CKAP4的测定值的取得方法只要可取得血液试样中所含的CKAP4的测定值，就不特别限定。在本工序中，为了取得CKAP4的测定值，能使用能与CKAP4特异性结合的抗体、即抗CKAP4抗体。另外，也可使用后述的“4.含抗CKAP4抗体的心力衰竭的检查试剂”或“5.心力衰竭的检查试剂盒”。混合血液试样和抗CKAP4抗体的顺序不特别限定，可为将这些基本上同时混合，也可为依次混合。在本实施方式中，可首先使抗CKAP4抗体和血液试样中的CKAP4的复合物形成后将所述复合物固定化在固相上，或者将预先抗CKAP4抗体固定化在固相上，使固定化的抗CKAP4抗体和血液试样中的CKAP4形成复合物。更优选为，首先使上述复合物形成后在固相上固定化所述复合物的实施方式。进而，通过将固定化在固相上的所述复合物或在固相上形成的复合物用在现有技术中公知的方法检测，可测定血液试样中所含的CKAP4的量或浓度。首先使抗CKAP4抗体和血液试样中的CKAP4的复合物形成后在固相上固定化所述复合物时，使经生物素等修饰的抗CKAP4抗体与血液试样中的CKAP4接触而使复合物形成。另行，通过使亲和素类预先结合于固相，可经生物素和亲和素类的结合而将所述复合物固定化在固相上。另外，预先将抗CKAP4抗体固定到固相时，向固相固定抗CKAP4抗体的实施方式不特别限定。例如，可为使抗CKAP4抗体和固相直接键合，也可为使抗CKAP4抗体和固相之间经别的物质间接结合。作为直接的结合，例如，可举出物理的吸附等。作为间接的结合，例如，可举出经生物素和亲和素或链霉亲和素(以下，也称为“亲和素类”)的组合结合。此时，通过将抗CKAP4抗体预先用生物素修饰，使亲和素类预先结合于固相，可经生物素和亲和素类的结合而使抗CKAP4抗体和固相间接结合。在本实施方式中，抗CKAP4抗体和固相的结合优选经生物素和亲和素类的间接结合。固相的原料不特别限定，例如，可从有机高分子化合物、无机化合物、生物体高分子等选择。作为有机高分子化合物，可举出乳胶、聚苯乙烯、聚丙烯等。作为无机化合物，可举出磁性体(氧化铁、氧化铬及铁素体等)、氧化硅、氧化铝、玻璃等。作为生物体高分子，可举出不溶性琼脂糖、不溶性葡聚糖、明胶、纤维素等。也可将这些中的2种以上组合使用。固相的形状不特别限定，例如，可举出粒子、膜、微平板、微管、试管等。在它们之中也优选粒子，特别优选磁性粒子。在本工序中，复合物的形成后，优选为复合物形成后，标记物质的检测之前，也可进行除去不形成复合物的未反应的游离成分的B/F分离。未反应的游离成分是指不构成复合物的成分。例如，可举出不与CKAP4结合的抗CKAP4抗体等。B/F分离的手段不特别限定，如果固相是粒子，就通过由离心分离回收仅捕获复合物的固相可进行B/F分离。如果固相是微平板或微管等的容器，就通过除去含未反应的游离成分的液可进行B/F分离。另外，当固相是磁性粒子时，通过在用磁铁磁性约束磁性粒子的状态下由喷嘴吸除含未反应的游离成分的液可进行B/F分离。所述方法在自动化的观点优选。除去未反应的游离成分之后，也可将捕获复合物的固相用PBS等的适宜的水性介质清洗。在本工序中，上述复合物的检测可使用被标记物质标记的抗CKAP4抗体进行，或使用未标记的抗CKAP4抗体和被可与所述未标记的抗CKAP4抗体结合的标记物质标记的抗免疫球蛋白抗体等进行，优选使用被标记的抗CKAP4抗体。另外，在被标记的抗CKAP4抗体的CKAP4中的表位和与固相结合的抗CKAP4抗体的CKAP4中的表位优选不同。在标记抗CKAP4抗体或标记抗免疫球蛋白抗体中使用的标记物质只要发生能检测的信号，不特别限定。例如，可为其自身发生信号的物质(以下，也称为“信号发生物质”)，也可为催化其他物质的反应而使信号发生的物质。作为信号发生物质，例如，可举出荧光物质、放射性同位元素等。作为催化其他物质的反应而发生能检测的信号的物质，例如，可举出酶。作为酶，可举出碱性磷酸酶、过氧化物酶、β-半乳糖苷酶、荧光素酶等。作为荧光物质，可举出异硫氰酸荧光素(FITC)、若丹明、AlexaFluor(注册商标)等的荧光染料、GFP等的荧光蛋白质等。作为放射性同位元素，可举出125I、14C、32P等。在它们之中，作为标记物质，优选酶，特别优选碱性磷酸酶。标记抗CKAP4抗体由现有技术公知的标记方法，将抗CKAP4抗体用上述的标记物质标记而得到。另外，也可使用市售的标记试剂盒等标记。另外，标记免疫球蛋白抗体可使用与抗CKAP4抗体的标记相同的方法，也可使用市售的。在本工序中，通过检测由复合物中所含的标记抗CKAP4抗体的标记物质发生的信号，可取得血液试样中所含的CKAP4的测定值。其中，“检测信号”包括，对信号的有无进行定性检测，对信号强度进行定量，及对信号的强度进行半定量检测。半定量的检测是指将信号的强度如“不信号发生”、“弱”、“中”、“强”等一样阶段性地显示。在本工序中，优选将信号的强度定量或半定量检测。检测信号的方法自体是在现有技术中公知的。在本工序中，也可适宜选择根据来源于上述的标记物质的信号的种类的测定方法。例如，标记物质是酶时，可通过使用光度计、分光光度计等的公知的装置测定通过使对于该酶的底物反应而发生的光、色等的信号进行。酶的底物可根据该酶的种类从公知的底物适宜选择。例如，作为酶使用碱性磷酸酶时，作为底物，可举出CDP-Star(注册商标)(4-氯-3-(甲氧基螺[1,2-二氧杂环丁烷-3,2'-(5'-氯)三环[3.3.1.13,7]癸烷]-4-基)苯基磷酸2钠)、CSPD(注册商标)(3-(4-甲氧基螺[1,2-二氧杂环丁烷-3,2-(5'-氯)三环[3.3.1.13,7]癸烷]-4-基)苯基磷酸2钠)等的化学发光底物、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸(BCIP)、5-溴-6-氯-吲哚基磷酸2钠、p-硝基苯基磷酸等的显色底物。特别优选为CDP-Star(注册商标)。所述底物的发光优选用光度计检测。标记物质是放射性同位素时，可使用闪烁计数器等的公知的装置测定作为信号的放射线。另外，标记物质是荧光物质时，可使用荧光酶标仪等的公知的装置测定作为信号的荧光。再者，激发波长及荧光波长可根据使用的荧光物质的种类适宜确定。信号的检测结果可作为CKAP4的测定值使用。例如，对信号的强度进行定量检测时，可以从信号强度的测定值自体或该测定值算出的值作为，CKAP4的测定值使用。作为从信号强度的测定值算出的值，例如，可举出从该测定值减去阴性对照试样的测定值的值、该测定值除以阳性对照试样的测定值的值、及它们的组合等。作为阴性对照试样，可举出不含生理盐水等的CKAP4的试样。作为阳性对照试样，可举出以指定的量或浓度含CKAP4的血液试样。另外，为了取得CKAP4的测定值，例如，也可使用MyBioSource公司(美国、California、SanDiego)的cytoskeleton-associatedprotein4,ELISAKit(货号MBS926308)等的检测有UniProtKB/Swiss-Prot：Q07065.2的氨基酸序列(SEQIDNO:1)的蛋白质的市售的ELISA试剂盒。在使用市售的试剂盒取得血液试样中的CKAP4的测定值时，可根据试剂盒附带的流程取得。(ii)CKAP4的测定值的比较工序及心力衰竭患者的确定工序接下来，将上述(i)工序中取得的受试体的血液试样中的CKAP4的测定值和指定的基准值根据单纯比较法或统计学的检验等的公知的方法比较。进而，根据用于确定为上述“1.用语的说明”中记载的“受试体的血液试样中的CKAP4的测定值比指定的基准值低”的定义，在受试体的血液试样中的CKAP4的测定值比指定的基准值低时，可确定采集血液试样的受试体是心力衰竭患者。可将“受试体”、“血液试样中”、“CKAP4的测定值”、“指定的基准值”等中涉及的上述“1.用语的说明”的记载在其中援用。再者，由本发明的“心力衰竭患者的检测方法”得到的检测结果提供给医师等，辅助由医师等的心力衰竭的诊断。也可将此检测结果与其他检查数据或医学所见组合而进行心力衰竭的确定诊断。【3.心脏疾病的识别方法】本发明是取得血液试样中的CKAP4的测定值，基于所述CKAP4的测定值，识别心脏疾病患者或疑似心脏疾病的受试体发生心力衰竭的症状与否的方法。(i)CKAP4的测定值的取得工序在本发明的识别方法中，首先，取得从心脏疾病患者或疑似心脏疾病的受试体采集的血液试样中的CKAP4的测定值。CKAP4的测定值的取得方法可同样地使用上述“2.心力衰竭患者的检测方法”的(i)工序中记载的方法，所述记载可在其中援用。(ii)CKAP4的测定值的比较工序及心脏疾病的识别工序接下来，将在上述(i)的工序中取得的所述患者或所述受试体的血液试样中的CKAP4的测定值和指定的基准值根据单纯比较法或统计学的检验等的公知的方法比较。进而，根据用于确定为上述“1.用语的定义”中记载的“心脏疾病患者或疑似心脏疾病的受试体的血液试样中的CKAP4的测定值比指定的基准值低”或“心脏疾病患者或疑似心脏疾病的受试体的血液试样中的CKAP4的测定值与指定的基准值同程度以上”的定义，当所述患者或所述受试体的血液试样中的CKAP4的测定值比所述指定的基准值低时，确定所述患者或所述受试体是心力衰竭的，或者当所述患者或所述受试体的血液试样中的CKAP4浓度与所述指定的基准值同程度以上时，可确定所述患者或所述受试体是心力衰竭以外的心脏疾病。可将“心脏疾病患者”、“疑似心脏疾病的受试体”、“血液试样中”、“CKAP4的测定值”、“指定的基准值”等中涉及的上述“1.用语的说明”的记载在其中援用。再者，由本发明的“心脏疾病的识别方法”得到的识别结果提供给医师等，辅助由医师等的心脏疾病的诊断。也可将此识别结果与其他检查数据或医学所见组合而进行心脏疾病的确定诊断。【4.含抗CKAP4抗体的心力衰竭的检查试剂】本发明提供在上述“2.心力衰竭患者的检测方法”或“3.心脏疾病的识别方法”中使用的含抗CKAP4抗体的心力衰竭的检查试剂。抗CKAP4抗体可使用上述“1.用语的说明”中记载的。在本实施方式的检查试剂中，至少只要含1种以上抗CKAP4抗体即可。在抗CKAP4抗体是多克隆抗体时，可为用1种抗原免役而得到的多克隆抗体，也可为用2种以上的抗原并行免役相同个体而得到的多克隆抗体。另外，也可将向各自不同的动物接种2种以上的抗原而得到的各自的多克隆抗体混合。在抗CKAP4抗体是单克隆抗体时，可为从1种杂交瘤产生的单克隆抗体，也可为作为从2种以上的杂交瘤产生的单克隆抗体而含2种以上各单克隆抗体识别相同或不同的表位的多个单克隆抗体。另外，也可将多克隆抗体和单克隆抗体混合各1种以上含有。所述检查试剂中所含的抗CKAP4抗体的形态，不特别限制，也可为含抗CKAP4抗体的抗血清或腹水等的干燥状态或液体状态。另外，抗CKAP4抗体的形态也可为纯化抗CKAP4抗体、含抗CKAP4抗体的免疫球蛋白级分或含抗CKAP4抗体的IgG级分的干燥状态或水溶液。上述形态是含抗CKAP4抗体的抗血清或腹水的干燥状态或液体状态时，也可再含者β-巯基乙醇、DTT等的稳定化剂；白蛋白等的保护剂；聚氧乙烯(20)山梨坦单月桂酸酯、聚氧乙烯(10)辛基苯基醚等的表面活性剂、叠氮化钠等的防腐剂等的至少一种。另外，抗CKAP4抗体的形态是纯化抗CKAP4抗体、含抗CKAP4抗体的免疫球蛋白级分或含抗CKAP4抗体的IgG级分的干燥状态或水溶液时，也可再含磷酸缓冲液等的缓冲液成分；β-巯基乙醇、DTT等的稳定化剂；白蛋白等的保护剂；氯化钠等的盐；聚氧乙烯(20)山梨坦单月桂酸酯、聚氧乙烯(10)辛基苯基醚等的表面活性剂等、叠氮化钠等的防腐剂的至少一种。在本发明中，所述抗CKAP4抗体可为未标记，也可为被生物素或上述的标记物质标记，优选被生物素或上述的标记物质标记。标记物质可使用在上述“2.心力衰竭患者的检测方法”的项中例示的，优选为碱性磷酸酶。另外，在本发明中，抗CKAP4抗体也可为在固定化在固相表面等的状态下提供的。对于固相及固定化如在上述“2.心力衰竭患者的检测方法”的项中例示的。作为固相，优选是磁珠。【5.心力衰竭的检查试剂盒】本发明是含上述“4.含抗CKAP4抗体的心力衰竭的检查试剂”的，在心力衰竭患者的检测方法或心脏疾病的识别方法中使用的心力衰竭的检查试剂盒。更具体而言是含有含被生物素标记的抗CKAP4抗体的检查试剂、及含被标记物质标记的抗CKAP4抗体的检查试剂的，心力衰竭的检查试剂盒。作为标记物质，优选是碱性磷酸酶。本实施方式也可还含固相、优选为结合了亲和素类的固相、更优选为结合了亲和素类的磁珠。另外，本实施方式也可含底物。作为底物，优选是CDP-Star(注册商标)。再者，标记物质、固相、底物的详细如“2.心力衰竭患者的检测方法”中记载，所述记载可在其中援用。本实施方式的检查试剂盒优选含与CKAP4的不同的表位结合的2种抗CKAP4抗体(第1抗CKAP4抗体、第2抗CKAP4抗体)。此时，在固相上形成了第1抗CKAP4抗体、CKAP4、第2抗CKAP4抗体及标记物质的复合物。这样的检测方法一般称为夹心ELISA。在此复合物中，第1抗CKAP4抗体固定于固相，第2抗CKAP4抗体与标记物质直接或间接结合。其中，第2抗CKAP抗体和标记物质间接结合是指标记物质经抗体等结合于第2抗CKAP4抗体。例如，可举出识别第2抗CKAP4抗体的标记抗体与第2抗CKAP4抗体结合的状态。当第1抗CKAP4抗体预先与固相结合时，本实施方式的检查试剂盒可含固定化第1抗CKAP4抗体的固相、第2抗CKAP4抗体和标记物质。第2抗CKAP4抗体和标记物质可为收容到分别的容器中，也可为收容到相同的容器中。再者，当标记物质是酶，上述检查试剂盒还含底物时，酶和底物有收容到分别的容器中的必要。当提供给使用者时，固相、第2抗CKAP4抗体和标记物质中的至少2种可为同装，也可为分别捆包。当第1抗CKAP4抗体不预先与固相结合时，本实施方式的检查试剂盒可含固相、第1抗CKAP4抗体、第2抗CKAP4抗体和标记物质。第1抗CKAP4抗体、第2抗CKAP4抗体和标记物质中的至少2种可为收容到相同的容器中，也可为收容到分别的容器中。再者，当标记物质是酶，上述检查试剂盒还含底物时，酶和底物有收容到分别的容器中的必要。提供给使用者时，固相、第1抗CKAP4抗体、第2抗CKAP4抗体和标记物质的中至少2种可为同装，也可为分别捆包。上述的检查试剂盒可作为如图10所示的试剂盒提供给使用者。心力衰竭的检查试剂盒50含外装箱55、含多个磁性粒子作为固相的第1容器51、含能与固相结合的第1抗CKAP4抗体的第2容器52、被酶标记的第2抗CKAP4抗体含的第3容器53和检查试剂盒的附带文书54。在附带文书54中，可记载检查试剂盒的对待方法、储存条件、使用期限等。含底物试剂的容器、含清洗用的水性介质的容器等也可同装到外装箱55中。【6.心力衰竭患者的检测装置及心力衰竭患者的检测程序】接下来，参照附图说明用于实施上述的本实施方式的方法的检测装置及检测程序的一实施方式。图11是检测装置1的概略图。检测装置1含测定装置2和与测定装置2连接的计算机系统3。测定装置2测定从受试体采集的血液试样中的CKAP4的测定值。测定装置2不特别限定，可根据CKAP4的测定方法适宜选择。本实施方式的测定装置2是能由使用生物素标记抗CKAP4抗体、固定亲和素类的磁性粒子及经标记物质标记的抗CKAP4抗体的ELISA法检测发生的信号的测定装置。此种的测定装置只要能基于使用的标记物质的信号的检测，就不特别限定，可根据标记物质的种类适宜选择。如果将含固定生物素标记抗CKAP4抗体、亲和素类的磁性粒子的检查试剂、含被标记物质标记的抗CKAP4抗体的试剂及从患者采集的血液试样设置于测定装置2，则测定装置2使用各试剂而执行抗原抗体反应，作为基于与CKAP4特异性结合的标记抗体的光学信息取得信号，将得到的光学信息发送到计算机系统3。计算机系统3含计算机4、输入数据等的输入部5及显示受试体的信息或检测结果等的显示部6。计算机系统3基于从测定装置2接收的光学信息，取得从受试体采集的血液试样中的CKAP4的测定值，由所述CKAP4的测定值检测受试体是心力衰竭患者与否。再者，计算机系统3如图11所示，可与测定装置2独立的机器，也可集成到测定装置2。计算机4如图12所示，具备处理器(CPU)40、ROM41、RAM42、硬盘(HDD)43、输入输出界面44、读取装置45、通信接口46及图像输出界面47，这些由总线48能数据通信地连接。另外，测定装置2由通信接口46，与计算机4能通信地连接。CPU40在一系列控制输入输出各部的动作的同时，执行ROM41或硬盘43中存储的计算机程序。即，CPU40在进行根据计算机程序，从测定装置2接收的光学信息的处理，算出血液试样中的CKAP4的测定值的同时，阅读出ROM41或硬盘43中存储的指定的基准值(截止值)，当所述CKAP4的测定值比指定的基准值低时，确定采集血液试样的受试体是心力衰竭患者。进而，CPU40输出确定结果而在显示部5显示。ROM41由掩模型ROM、PROM、EPROM、EEPROM等构成。在ROM41中，如上所述记录由CPU40执行的用于心力衰竭患者的检测的计算机程序(心力衰竭患者检测程序)及在所述心力衰竭患者检测程序的执行中使用的数据。另外，在ROM41中，除了指定的基准值之外，也可记录所述受试体的过去的CKAP4的测定值等。RAM42由SRAM、DRAM等构成。RAM42在ROM41及硬盘43中记录的计算机程序的阅读出中使用。RAM42，另外，在CPU40执行这些计算机程序之时，作为CPU40的作业区域利用。硬盘43记录用于使CPU40执行的操作系统、应用程序(心力衰竭患者检测程序)等的计算机程序及在所述计算机程序的执行中使用的数据。在硬盘43中，除了指定的基准值(截止值)之外，也可记录所述受试体的过去的CKAP4的测定值等。读取装置45由软盘驱动器、CD-ROM驱动器、DVDROM驱动器等构成。读取装置45可读取在可移动型记录介质7中记录的计算机程序或数据。输入输出界面44，例如，由USB、IEEE1394、RS-232C等的串行接口，SCSI、IDE、IEEE1284等的并行接口和D/A变换器、A/D变换器等构成的模拟接口构成。键盘、鼠标等的输入部5连接到输入输出界面44。操作者可由输入部5向计算机3输入各种的指令。通信接口46是例如，Ethernet(注册商标)界面等。计算机3可由通信接口46，向打印机等进行印刷数据的发送。图像输出界面47与由LCD、CRT等构成的显示部6连接。显示部6可输出根据从CPU40发出的图像数据的影像信号。显示部6根据输入的影像信号显示图像。接下来，使用图13，基于心力衰竭患者检测程序，对于由检测装置1执行的心力衰竭患者的检测方法进行说明。首先，在步骤ST1中，CPU40从测定装置2接收光学信息(信号)的发送，则从取得的光学信息算出血液试样中的CKAP4的测定值，存储到ROM41或硬盘43。进而，在步骤ST2中，CPU40对取得的CKAP4的测定值和ROM41或硬盘43中存储的指定的基准值(截止值)进行比较。当CKAP4的测定值比指定的基准值(截止值)低时，步骤ST3成为“YES”而进到ST4，CPU40确定采集血液试样的受试体是心力衰竭患者，在步骤ST6中，CPU40输出确定结果，显示在显示部5，或由打印机印刷。另外，也可将采集血液试样的受试体是心力衰竭患者的结果存储在ROM41或硬盘43中。一方面，CKAP4的测定值与指定的基准值(截止值)相同或比指定的基准值(截止值)高(同程度以上)，则步骤ST3成“NO”而进到步骤ST5，CPU40确定采集血液试样的受试体不是心力衰竭患者。进而，在步骤ST6中，CPU40输出确定结果，显示在显示部5，或由打印机印刷。另外，也可将采集血液试样的受试体不是心力衰竭患者的结果存储在ROM41或硬盘43中。此时，在受试体是心脏疾病患者或疑似心脏疾病者时，可确定所述受试体是心力衰竭以外的心脏疾病，可CPU40输出该确定结果。由此，在本实施方式中，也可识别心脏疾病患者或疑似心脏疾病者发生心力衰竭的症状与否。以上，对于本发明涉及的心力衰竭患者的检测装置及心力衰竭患者的检测程序的一实施方式进行说明，但本发明不限于上述实施方式，只要不脱离本发明的宗旨，能进行各种变更。【实施例】以下，展示实施例而进一步详细地说明本发明，但本发明不解释为限于实施例的实施方式。【实施例：血清中CKAP4浓度的测定】为了对各疾病的患者血清中CKAP4浓度进行比较，测定表2所示的6组的各受试者的血清中的CKAP4浓度。【1.对象】受试者的明细示于表2。【表2】其中，1及2组的患者是被诊断为有缺血性心脏疾病或扩张型心肌症作为基础疾病、并且发生心力衰竭的症状的患者，3～5组的患者是尽管有基础疾病，但尚未发生心力衰竭的症状的患者。6组的健康者是不仅不包含心脏疾病，也不包含其他疾病的非疑似患疾病者。【2.测定方法】从受试者进行采血，分离血清后，于-80℃冷冻保存至测定。血清中的CKAP4使用从MyBioSource公司(美国、SanFrancisco、SanDiego)购入的ELISA试剂盒，根据附带的流程测定。在统计解析中，使用StatFlex，进行单因素方差分析，在多组比较中使用Turkey检验。另外，在灵敏度、特异性的检验中进行ROC解析而求出AUC。【3.结果】(1)血清中CKAP4浓度各组的血清中的CKAP4浓度的平均值±标准偏差(pg/ml)示于表3。【表3】组编号血清中CKAP4浓度(pg/ml)1342±42*2393±49*3742±344639±505726±266773±15＊对于高血压患者组(3组)、心房颤动患者组(4组)、肥大型心肌症患者组(5组)健康者组(6组)以p<0.05表示有显著差异。从上述结果得知，1组的由缺血性心脏疾病导致的心力衰竭患者及2组的由扩张型心肌症导致的心力衰竭患者的血清中的CKAP4浓度显示比健康者低的值。另外得知，在高血压患者、心房颤动患者、肥大型心肌症患者中，血清中的CKAP4浓度不变化。从结果提示，发生心力衰竭的症状的患者的血液试样中的CKAP4浓度变得比其他心脏疾病患者或健康者更低。(2)ROC解析(受试者操作特性分析)为了评价血清中的CKAP4浓度的值是否对心力衰竭具有特异性，进行ROC解析。由ROC解析得到的AUC值示于表4。AUC值越接近1.0，表示特异性越高。另外，各组的ROC曲线示于图2～9。【表4】对6组对3组对4组对5组1组1.00.990.930.932组0.960.910.840.93由缺血性心脏疾病导致的心力衰竭患者组(1组)相对于健康者组(6组)显示高的AUC值，显示血中的CKAP4浓度的测定对于由缺血性心脏疾病导致的心力衰竭的有无的检测非常地有效。另外，对于高血压患者组(3组)、肥大型心肌症患者组(4组)、及心房颤动患者(5组)也显示高的值，显示对于这些疾病和由缺血性心脏疾病导致的心力衰竭的鉴别诊断有效。另外，由扩张型心肌症导致的心力衰竭患者组(2组)也相对于健康者组(6组)显示高的AUC值，显示血液试样中的CKAP4浓度的测定对于由扩张型心肌症导致的心力衰竭的有无的检测非常地有效。另外，对于高血压患者组(3组)、肥大型心肌症患者组(4组)及心房颤动患者(5组)也显示高的值，显示对于这些疾病和由扩张型心肌症导致的心力衰竭的鉴别诊断有效。从此解析，认为血液试样中的CKAP4浓度的降低对心力衰竭具有特异性。【符号的说明】1：检测装置2：测定装置3：计算机系统4：计算机40：处理器(CPU)41：ROM42：RAM43：硬盘(HDD)50：检查试剂盒55：外装箱51：第1容器52：第2容器53：第3容器54：附带文书55：外装箱序列表<110>MATSUMORI,Akira<120>心力衰竭患者的检测方法、心脏疾病的识别方法、心力衰竭的检查试剂、心力衰竭的检查试剂盒、用于检测心力衰竭的装置及用于检测心力衰竭的程序<130>P15-151<150>JP2014-208914<151>2014-10-10<160>1<170>PatentInversion3.5<210>1<211>602<212>PRT<213>智人（Homosapiens）<400>1MetProSerAlaLysGlnArgGlySerLysGlyGlyHisGlyAlaAla151015SerProSerGluLysGlyAlaHisProSerGlyGlyAlaAspAspVal202530AlaLysLysProProProAlaProGlnGlnProProProProProAla354045ProHisProGlnGlnHisProGlnGlnHisProGlnAsnGlnAlaHis505560GlyLysGlyGlyHisArgGlyGlyGlyGlyGlyGlyGlyLysSerSer65707580SerSerSerSerAlaSerAlaAlaAlaAlaAlaAlaAlaAlaSerSer8590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