纸基双极性电极电化学发光分子开关系统用于快速灵敏基因检测致病菌的方法与流程

文档序号:12267833阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种纸基双极性电极电化学发光分子开关系统用于快速灵敏基因检测致病菌的方法,其特征在于包括如下步骤:

将致病细菌的靶毒力基因的DNA分子片段与含有“光开关”分子和TPrA的PBS溶液进行混合,得到混合液;然后将混合液滴到pBPE上;将pBPE正面朝向PMT,然后将该pBPE放置到暗盒里;最后,将pBPE的一对驱动电极连接到直流电源上,施加驱动电压;在pBPE的阳极获得一个ECL信号,将在10s内观察到的最大的可再现的发光信号作为有效的信号值,即实现快速灵敏基因检测致病菌的目的。

2.根据权利要求书1所述的纸基双极性电极电化学发光分子开关系统用于快速灵敏基因检测致病菌的方法,其特征在于:所述的致病细菌为致病性李斯特菌、致病性大肠杆菌、致病性沙门氏菌、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)、志贺氏杆菌(Shigella)、空肠弯曲菌(campylobacter jejuni)或金黄色葡萄球菌(staphylococcus aureus)。

3.根据权利要求书2所述的纸基双极性电极电化学发光分子开关系统用于快速灵敏基因检测致病菌的方法,其特征在于:所述的致病性李斯特菌为单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)。

4.根据权利要求书2所述的纸基双极性电极电化学发光分子开关系统用于快速灵敏基因检测致病菌的方法,其特征在于:所述的致病性大肠杆菌为大肠杆菌O157:H7(Escherichia coli O157:H7)。

5.根据权利要求书2所述的纸基双极性电极电化学发光分子开关系统用于快速灵敏基因检测致病菌的方法,其特征在于:所述的致病性沙门氏菌为鼠伤寒沙门氏菌(salmonella typhimurium)。

6.根据权利要求书3所述的纸基双极性电极电化学发光分子开关系统用于快速灵敏基因检测致病菌的方法,其特征在于:所述的单增李斯特菌的靶毒力基因hlyA特异性的引物如下:

上游引物:5'-AGGAATGACTAATCAAGACAAT-3';

下游引物:5'-GGAAGGTCTTGTAGGTTCAT-3'。

7.根据权利要求书1所述的纸基双极性电极电化学发光分子开关系统用于快速灵敏基因检测致病菌的方法,其特征在于:

所述的“光开关”分子为[Ru(bpy)2dppz]2+或[Ru(phen)2dppz]2+

8.根据权利要求书1或7所述的纸基双极性电极电化学发光分子开关系统用于快速灵敏基因检测致病菌的方法,其特征在于:

所述的“光开关”分子的浓度为30μM~0.1mM。

9.根据权利要求书1所述的纸基双极性电极电化学发光分子开关系统用于快速灵敏基因检测致病菌的方法,其特征在于:

所述的TPrA的浓度为10mM~50mM。

10.根据权利要求书1所述的纸基双极性电极电化学发光分子开关系统用于快速灵敏基因检测致病菌的方法,其特征在于:

所述的驱动电压设定为850V。

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