1.微孔板化学发光检测试剂,其特征在于:其包括发光底物液A、发光底物液B和酶结合物稀释液;
所述发光底物液A采用以下方法制成:
准备原料十二水磷酸氢二钠5.8克,二水磷酸二氢钠0.59克,氯化钠8.5克,鲁米诺0.1克,对碘苯酚3克,Proclin300诊断试剂防腐剂0.5毫升,纯化水1升;
将以上各个组分混合均匀,即得到发光底物液A;
所述发光底物液B采用以下方法制成:
准备原料十二水磷酸氢二钠5.8克,二水磷酸二氢钠0.59克,氯化钠8.5克,鲁米诺0.1克,过氧化氢脲0.1克,Proclin300诊断试剂防腐剂0.5毫升,纯化水1升;
将以上各个组分混合均匀,即得到发光底物液B;
所述酶结合物稀释液采用以下方法制成:
准备原料三羟甲基氨基甲烷6.057克,浓度为37.5%的浓盐酸3.35克,酪蛋白钠10克,Proclin300诊断试剂防腐剂2.0毫升,苋菜红0.1克,新生牛血清100毫升,;
将以上各个组分与纯化水混合均匀并定容至1升,即得到酶结合物稀释液;
还包括20倍浓缩洗液、阴性对照和阳性对照,
所述20倍浓缩洗液为含有吐温20(TWEEN-20)的磷酸盐缓冲液;
所述阴性对照为含人血清的磷酸盐缓冲液;
所述阳性对照为含乙肝表面抗原HBsAg阳性样本的磷酸盐缓冲液。
2.如权利要求1所述的微孔板化学发光检测试剂的检测方法,其特征在于:包括如下步骤:
1)、用蒸馏水或纯化水将所述20倍浓缩洗液稀释20倍,配制成工作浓度洗液,待用;
2)、取包被板条,其上布设临界值控制品2孔,阴性对照和阳性对照各1孔,待检血液样品孔多个;
3)、分别加临界值控制品、阴性对照、阳性对照、待检血液样品各50μl入对应的孔中;
4)、在每个孔中分别加入所述酶结合物稀释液50μl,然后用封板膜封好包被板条,再于42℃振荡温育15分钟,或者是37℃振荡温育30分钟;
5)、洗板5次,然后在各个孔中加步骤1中配制的工作浓度洗液不少于350μl,再静置不少于30秒,再拍干;
6)、在各个孔中加发光底物液A50μl和发光底物液B50μl,振荡混均匀,室温避光放置5—10分钟,用化学发光免疫分析仪测量每孔的RLU值,即得到结果。
3.按照权利要求2所述的微孔板化学发光检测试剂的检测方法,其特征在于:所述发光底物液A、发光底物液B、酶结合物稀释液、20倍浓缩洗液、阴性对照和阳性对照在使用前平衡温度至室温。
4.按照权利要求3所述的微孔板化学发光检测试剂的检测方法,其特征在于:所述室温的温度为20℃—24℃ 。
5.按照权利要求4所述的微孔板化学发光检测试剂的检测方法,其特征在于:所述化学发光免疫分析仪为BK-L96C型化学发光免疫分析仪。