一种癌胚抗原浓度的检测方法与流程

文档序号:12454055阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种癌胚抗原CEA浓度的检测方法,其特征在于:包括以下步骤:

1)在金纳米棒载体上修饰CEA适配体,得到CEA适配体/金纳米棒复合物;

2)将CEA抗体修饰到氧化石墨烯表面后,将所述氧化石墨烯固定到电极表面,再采用牛血清白蛋白对所述电极表面进行封闭,得到CEA抗体修饰电极;

3)取一系列不同浓度的标准CEA溶液分别滴加至所述CEA抗体修饰电极的表面进行CEA与CEA抗体之间的特异性结合反应,得到一系列CEA抗体—CEA修饰电极;

4)将所述CEA适配体/金纳米棒复合物滴加至各CEA抗体—CEA修饰电极表面进行CEA与CEA适配体之间的特异性结合反应,得到一系列含CEA抗体—CEA—CEA适配体/金纳米棒复合物三层夹心式结构的电极;

5)向各含CEA抗体—CEA—CEA适配体/金纳米棒复合物三层夹心式结构的电极表面分别滴加钼酸钠溶液进行反应后,采用方波伏安法进行测定,得到一系列方波伏安曲线;

6)将各方波伏安曲线中的峰电流值与对应的CEA浓度做标准曲线;

7)取待测CEA溶液替换标准CEA溶液按3)、4)和5)的步骤进行操作,得到相应峰电流值,依据标准曲线,即得待测CEA溶液的浓度。

2.根据权利要求1所述的CEA浓度的检测方法,其特征在于:在金纳米棒载体溶液中加入含末端巯基修饰的CEA适配体的溶液,在室温下反应,即得CEA适配体/金纳米棒复合物。

3.根据权利要求1或2所述的CEA浓度的检测方法,其特征在于:所述金纳米棒载体通过如下方法制备得到:先采用NaBH4还原HAuCl4,得到纳米金种子溶液,所述纳米金种子溶液加入到含十六烷基三甲基溴化铵、HAuCl4、AgNO3和抗坏血酸的溶液中反应,得到金纳米棒载体。

4.根据权利要求1所述的CEA浓度的检测方法,其特征在于:氧化石墨烯溶液采用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-N-羟基琥珀酰亚胺溶液活化后,与CEA抗体进行反应,得到CEA抗体修饰氧化石墨烯,所述CEA抗体修饰氧化石墨烯滴加到电极表面,得到CEA抗体修饰电极。

5.根据权利要求1所述的CEA浓度的检测方法,其特征在于:将浓度分别为1pg/mL、5pg/mL、10pg/mL、100pg/mL、1ng/mL和10ng/mL的一系列标准CEA溶液分别滴加到CEA抗体修饰电极的表面,进行特异性结合反应。

6.根据权利要求5所述的CEA浓度的检测方法,其特征在于:所述特异性结合反应的条件为:温度为36~37℃,时间为1~2h。

7.根据权利要求1所述的CEA浓度的检测方法,其特征在于:4)中的特异性结合反应的条件为:温度为36~37℃,时间为1~2h。

8.根据权利要求1所述的CEA浓度的检测方法,其特征在于:所述钼酸钠溶液的浓度为1~5mmol/L。

9.根据权利要求1所述类CEA浓度的检测方法,其特征在于:所述方波伏安法的测定条件为:以0.3~0.7mol/L的硫酸溶液为电解液,在0~0.5V电压范围内,频率为10~20Hz。

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