一种快速制备单细胞悬液的过滤器的制作方法

本发明涉及一种快速制备单细胞悬液的过滤器，属于免疫研究技术领域。

背景技术：

流式细胞技术（flow cytometry，FCM）是利用流式细胞仪进行的一种单细胞定量分析和分选技术。流式细胞术是单克隆抗体及免疫细胞化学技术、激光和电子计算机科学等高度发展及综合利用的高技术产物。流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，具有速度快、精度高、准确性好的优点，是当代最先进的细胞定量分析技术之一。

流式细胞分选术指样品管中经荧光染料染色或标记的单细胞悬液，经高压压进入流动室内。流动室充满鞘液，单细胞悬液在鞘液的包裹及推动下，细胞被排成单个细胞列，以一定速度从流动室喷嘴喷出。在流动室的喷嘴上配有一个超高频的压电晶体，充电后可发生振动，使喷出的液流按照一定频率断裂为一个个均匀的液滴，待测的单个细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以不同的电荷，当液滴流通过带有几千伏电压的偏转板时，在高压电场作用下发生偏转，落入各自的收集容器里，没有被充电的液滴则落入中间的废液缸，从而实现细胞的分离。

流式细胞术及流式细胞分选都是针对单个细胞进行的分析及分选过程，且流式细胞仪为高精密度高通量仪器，对样品制备的要求较为严格，故无论是利用流式细胞术进行分析，还是利用流式细胞术进行细胞的分选，都是基于单个细胞进行的，所以单细胞悬液的制备对实验的进行都起到至关重要的影响。

流式细胞术上机前，需要将上机样品进行过滤，以制备单细胞混悬液，尤其是进行流式细胞术分选细胞时，成团的细胞会堵塞喷嘴使仪器无法正常运行，甚至会对仪器造成一定的损害。而现有样品过滤方法主要为手工将滤膜套于两个tip头之间，在通过移液枪配1mL tip头将细胞悬液喷出，最后收集于流式上样管，这么做不仅浪费tip头，而且制备过程中耗时较长，滤过面积太小容易造成堵塞，细胞滤过率不高，对实验效率也会有很大的影响。手工制备过程中滤膜容易污染，导致分选后的细胞也受到波及，无法进行后续实验。本过滤器操作简便，经济便捷，可进行高压消毒，过滤后的单细胞悬液可直接收集于1.5mL eppendorf管或流式管中，尤其适用于小体积（200μL~1mL）的单细胞悬液、尤其是原代细胞的单细胞悬液的制备，大大简化了流式上机前样品制备的步骤，缩短了流式细胞术实验的时间，减少单细胞悬液制备过程中细胞的污染。

技术实现要素：

本发明的目的是为了解决现有流式上机前制备单细胞滤器的空缺、手工制备滤器的不便捷、细胞耗损大、细胞易污染、费时且浪费tip头的问题，从而提供一种适用于小体积细胞悬液的快速、便捷地制备单细胞悬液的滤器。

本发明的技术方案：一种快速制备单细胞悬液的过滤器，包括tip头插入孔、流式上样管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽、和滤膜；所述tip头插入孔设置于流式上样管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽上方，流式上样管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽底部设有滤膜。

所述滤膜为尼龙滤膜。

所述滤膜过滤孔目数为300、400、500、700、800或1000目。

所述tip头插入孔所插入的tip头为1mL。

所述tip头插入孔的直径a为7mm，高度b为10mm；流式上样管卡槽或1.5 mL eppendorf管卡槽的高度c为25mm；滤膜直径d为10mm。

所述快速制备单细胞悬液的过滤器总高度e为35mm。

本发明的有益效果：本发明提供的过滤器操作简便，经济便捷，可存放于市面上大部分1mL tip盒并进行高压消毒，过滤后的单细胞悬液可直接收集于1.5mL eppendorf管或流式管中，适用于小体积细胞悬液的制备，大大简化了实验步骤，缩短了实验时间，极大减少了单细胞悬液制备过程中细胞污染。

附图说明

图1是本发明结构示意图。

图2是本发明使用示意图。

附图标记说明：1、tip头插入孔；2、流式上样管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽；3、滤膜；A、1mL tip头；B、1.5mL eppendorf管。

具体实施方式

如图1所示：一种快速制备单细胞悬液的过滤器，包括tip头插入孔1、流式上样管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽2、滤膜3；所述tip头插入孔1设置于流式上样管卡槽或1.5 mL eppendorf管卡槽2上方，流式上样管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽2底部设有滤膜3。

所述滤膜3为尼龙滤膜。所述滤膜3过滤孔目数为300、400、500、700、800或1000目。

所述tip头插入孔1所插入的tip头为1mL。

所述tip头插入孔1的直径a为7mm，高度b为10mm；流式上样管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽2的高度c为25mm；滤膜3直径d为10mm。

所述快速制备单细胞悬液的过滤器总高度e为75mm。

本发明使用时，具体如图2所示，先用1mL移液枪配1mL tip头A将待测细胞悬液吸起，将本过滤器置于流式上样管或1.5mL eppendorf管上，把吸有细胞悬液的tip头插入本过滤器的tip头插入孔，通过按压移液枪使细胞悬液从tip头中喷出，经过本过滤器滤膜最后收集于流式上样管或1.5mL eppendorf管，即可直接上机或进行后续培养。