本发明属于体外诊断试剂
技术领域：
，具体涉及一种过氧化氢检测干化学试纸及其制备方法。
背景技术：
：细菌性阴道病是育龄妇女最常见的阴道感染性疾病，细菌性阴道病的致病机制是由于各种原因导致阴道内乳酸杆菌大量减少，阴道分泌物中乳酸含量下降，大量厌氧菌繁殖，产生挥发性有机胺含量增加，同时还伴有阴道加德纳菌类杆菌属及支原体的大量增殖，阴道内正常存在的乳酸杆菌对维持阴道正常菌群起着关键的作用，乳酸杆菌是阴道正常菌群中最重要、数量最多的常住菌。而女性阴道易被各种细菌、真菌和微生物定植。在正常女性阴道中，每毫升的阴道流体中通常含有多于约104个乳酸杆菌，温和的酸性阴道环境有助于防止病原微生物的入侵。然而这种阴道平衡状态很容易地被外界各种因素扰乱，而最终导致阴道感染的发生。女性一生中，年龄以及生理激素的变化影响阴道微生态的构成，阴道上皮的糖原经乳酸杆菌的作用，分解成乳酸使阴道的局部形成弱酸环境(ph＜4.5，一般在3.8～4.4)，可以抑制其他寄生菌的过度生长，其代谢产物乳酸和过氧化氢等物质能保持阴道正常酸性环境，此外，部分乳酸杆菌尚合成过氧化氢，产生的过氧化氢也可抑制其他病原细菌的生长。另一方面，乳酸杆菌形成的酸性环境又有利于减少细菌表面负电荷和去除覆盖于受体表面的糖基和暴露受体而有助于细菌黏附。因此，乳酸杆菌是通过正反两方面调节正常阴道的菌群。阴道和乳酸杆菌形成共生关系，其中阴道上皮细胞以糖原的形式提供维持乳酸杆菌群体的营养，乳酸杆菌菌群提供对其他病原体的防御。具体而言，乳酸杆菌产生酸化阴道的乳酸，以及防止病原体增长的过氧化氢，健康阴道的乳酸杆菌群体能够大量产生杀微生物的化合物，如乳酸、细菌素和过氧化氢。而过氧化氢在阻止阴道中病原体增长中发挥特别重要的作用，乳酸杆菌利用黄素蛋白，将氧转化为过氧化氢。过氧化氢可以抑制细菌、真菌、病毒和哺乳动物细胞，这是由于许多细菌缺乏被称为过氧化氢酶的酶，过氧化氢酶能够分解过氧化氢并保护细菌免受过氧化氢的氧化，大量临床试验证实，单独的过氧化氢或其与引导分泌物中的卤化物和过氧化酶结合时，也可以显示毒性，表现为对hiv1、阴道加德纳菌、拟杆菌属、淋病奈瑟菌和白色念球菌的杀害。除此之外，乳酸杆菌产生过氧化氢，尚可以治疗bv，可提高宿主的免疫水平，克服bv复发作用。阴道分泌物中过氧化氢(h2o2)、白细胞酯酶(le)、唾液酸酶(sna)三者作为经典的联合检测，用于对阴道清洁度联合诊断的依据。根据阴道分泌物中所见的上皮细胞、白细胞或脓细胞、阴道杆菌与杂菌的数量进行判断，并划分清洁度为ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ度四个等级。ⅰ、ⅱ度为正常，ⅲ、ⅳ度为不清洁。表1阴道分泌物清洁度分级清洁度阴道杆菌杂菌上皮细胞白细胞(个/hp)ⅰ度多无或少许满视野0-5ⅱ度中+1/2视野6-15ⅲ度少++少许16-30ⅳ度—++++无或少许>30技术实现要素：本发明的目的是提供一种具有配制和使用简便、检测速度快、灵敏度高、特异性好的过氧化氢检测干化学试纸及其制备方法，主要用作检验阴道清洁度的辅助评判指标。本发明为解决技术问题所采用的技术方案如下：本发明的一种过氧化氢检测干化学试纸，包括：浸液a，包括缓冲溶液、稳定剂、络合剂、酶类物质和表面活性剂；浸液b，包括反应底物和溶剂，所述反应底物为3,3’,5,5’-四甲基联苯胺，所述溶剂为无水乙醇溶液；滤纸，将滤纸依次经浸液a和浸液b的干燥后制成过氧化氢检测干化学试纸。作为优选的实施方式，所述缓冲溶液为柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液、柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液或磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液。作为优选的实施方式，所述缓冲溶液的ph为4.5～6.5，浓度为0.5～5mol/kg。作为更优选的实施方式，所述缓冲溶液的ph为5.0～5.5，浓度为1～3mol/kg。作为优选的实施方式，所述稳定剂为10～30％(v/v)明胶或10～30％(v/v)阿拉伯胶。作为优选的实施方式，所述络合剂为0.5～3.0mg/mledta。作为优选的实施方式，所述酶类物质为0.2～0.6mg/ml辣根过氧化物酶。作为优选的实施方式，所述表面活性剂为1.0～5.0mg/ml十二烷基硫酸钠或1.0～5.0mg/ml十二烷基苯磺酸钠。作为优选的实施方式，所述滤纸为7218型滤纸、31et型滤纸、3mm型滤纸、526型滤纸或319型滤纸。作为优选的实施方式，所述3,3’,5,5’-四甲基联苯胺的浓度为0.5～3.0mg/ml。本发明的一种过氧化氢检测干化学试纸的制备方法，包括以下步骤：步骤一、浸液a的配制将缓冲溶液、稳定剂、络合剂、酶类物质和表面活性剂混合均匀形成浸液a；步骤二、浸液b的配制将反应底物溶解于无水乙醇溶液中形成浸液b；步骤三、浸液a的干燥将浸渍干燥机的温度主加热设定为65～85℃，副加热设定为50～60℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃时开始浸液，同时将浸渍干燥机的走纸速度设定为11.5～15.5hz；步骤四、浸液b的干燥将浸渍干燥机的温度主加热设定为65～85℃，副加热设定为50～60℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃时开始浸液，同时将浸渍干燥机的走纸速度设定为23.0～27.0hz；步骤五、经两次浸液的干燥，再经裁切制成过氧化氢检测干化学试纸。作为优选的实施方式，步骤三中，浸渍干燥机的温度主加热设定为70～80℃。作为优选的实施方式，步骤四中，浸渍干燥机的温度主加热设定为70～80℃。本发明的有益效果是：本发明的过氧化氢检测干化学试纸可作为检验阴道清洁度的辅助评判指标，并结合ph值联合对阴道清洁度进行更为准确划分，h2o2直接由产h2o2的乳酸杆菌分泌，其浓度与乳酸杆菌的数量成正比，直接反应维持阴道正常内生态的乳酸杆菌数量，能直接反应阴道内生态状况。乳酸杆菌在维持阴道自净及抗感染中起着关键作用。它可分解阴道粘膜上皮细胞内的糖原，产生一定量的乳酸，使阴道保持酸性环境。有利于阴道的自净作用。同时它可提高机体的免疫功能，激活巨噬细胞，维持阴道局部的抗感染能力。此外它亦具有防止宫颈阴道上皮化生的作用。唾液酸酶是由阴道菌群中厌氧菌分泌的，其活性与厌氧菌数量成正比，酶活性高反映阴道内厌氧菌过度生长，特异性较好。有部分引发bv的厌氧菌不产生唾液酸酶或产酶量少，造成部分bv漏检。故将唾液酸酶活性与h2o2浓度结合分析作为临床诊断bv的指标，兼顾阴道内产h2o2乳酸杆菌的数量，减少部分造成唾液酸酶假阴性或假阳性的发生，使诊断bv指标更客观。此外有形成分乳酸杆菌与干化学过氧化氢联合辅助检测阴道清洁度，可以有效降低由于医生在采集样本的过程中操作方法所带来的误差，使测试结果之间相互佐证，相辅相成，联合评判，对临床诊断具有重大意义。本发明以3,3’,5,5’-四甲基联苯胺为反应底物，阴道微生态环境中存在过氧化氢，在辣根过氧化物酶的水解作用下，释放出新生态氧，底物发生自缩合反应而显色，检测阴道分泌物样本中过氧化氢浓度，呈色深度与浓度成正比。本发明的过氧化氢检测干化学试纸配制简便、使用方便、易于操作，检测时不需要显微镜等特殊设备，结合迪瑞gmd-s600全自动妇科分泌物分析系统，在8-10min内即可出结果，具有检测速度快，灵敏度高、特异性好的优势，与类似产品相比操作简单，适宜普及。本发明所采用的浸渍干燥机自动化浸渍干燥方法具有便捷、省时、可自动化的优势，有效控制试纸制备过程中人工误差带来的影响，浸渍干燥机主副加热，对温度全面进行监控，温度设定在规定的范围内，可以大大降低试纸批次之间的误差，保证试纸制备的准确性、稳定性及均一性。具体实施方式本发明的一种过氧化氢检测干化学试纸，主要包括：浸液a、浸液b、滤纸。浸液a由缓冲溶液和辅助试剂组成，辅助试剂包括稳定剂、络合剂、酶类物质和表面活性剂；将缓冲溶液、稳定剂、络合剂、酶类物质和表面活性剂混合均匀形成浸液a。浸液b由反应底物和溶剂组成，其中，反应底物为3,3’,5,5’-四甲基联苯胺，溶剂为无水乙醇溶液；将反应底物溶解于无水乙醇溶液中形成浸液b；其中，3,3’,5,5’-四甲基联苯胺的浓度为0.5～3.0mg/ml。其中，3,3’,5,5’-四甲基联苯胺的结构式如下：将滤纸依次经浸液a和浸液b的干燥后制成过氧化氢检测干化学试纸。其中，缓冲溶液最好选用柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液、柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液或磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液。缓冲溶液的ph优选为4.5～6.5，更优选为5.0～5.5，浓度优选为0.5～5mol/kg，更优选为1～3mol/kg。其中，辅助试剂中的稳定剂即保湿剂优选为10～30％(v/v)明胶或10～30％(v/v)阿拉伯胶。其中，辅助试剂中的络合剂优选为0.5～3.0mg/mledta。其中，辅助试剂中的酶类物质优选为0.2～0.6mg/ml辣根过氧化物酶。其中，辅助试剂中的表面活性剂优选为1.0～5.0mg/ml十二烷基硫酸钠或1.0～5.0mg/ml十二烷基苯磺酸钠。其中，滤纸类型优选选用7218型滤纸、31et型滤纸、3mm型滤纸、526型滤纸或319型滤纸等。本发明的一种过氧化氢检测干化学试纸的制备方法，主要采用浸渍干燥机自动化干燥方法，具体的浸渍干燥流程如下：(1)浸液a的配制将缓冲溶液、稳定剂、络合剂、酶类物质和表面活性剂混合均匀形成浸液a。(2)浸液b的配制将反应底物溶解于无水乙醇溶液中形成浸液b。(3)浸渍干燥机干燥温度和走纸速度的设定按照开机流程和操作规范要求打开将浸渍干燥机，根据需要设置干燥温度、走纸速度，待干燥温度达到设定值并且各干燥室温度达到规定温度时才能开始进行浸液，具体的干燥温度和走纸速度设定如下：1)浸液a浸渍干燥机温度的设定：将浸渍干燥机的温度主加热设定为65～85℃，优选设定为70～80℃，副加热设定为50～60℃；浸渍干燥机走速的设定：将浸渍干燥机的走纸速度设定为11.5～15.5hz。2)浸液b浸渍干燥机温度的设定：将浸渍干燥机的温度主加热设定为65～85℃，优选设定为70～80℃，副加热设定为50～60℃；浸渍干燥机走速的设定：将浸渍干燥机的走纸速度设定为23.0～27.0hz。(4)将浸液使用的滤纸进行悬挂，安装好浸渍槽a和浸渍槽b。(5)将配制好的浸液a倒入浸渍槽a中，浸液量应在浸渍槽a的1/2处，然后将剩余的浸液a倒入盛药瓶a中，调节浸液a注入的速度，将盛药瓶a密封；将配制好的浸液b倒入浸渍槽b中，浸液量应在浸渍槽b的1/2处，然后将剩余的浸液b倒入盛药瓶b中，调节浸液b注入的速度，将盛药瓶b密封。(6)浸液的干燥1)浸液a的干燥开启浸渍干燥机走纸开关，按照之前设定的干燥温度和走纸速度进行浸液a的干燥，即待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃时，用压纸轮将滤纸浸入浸液a中，记录浸液a的位置高度。2)浸液b的干燥完成浸液a的干燥后，按照之前设定的干燥温度和走纸速度进行浸液b的干燥，即待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃时，用压纸轮将滤纸浸入浸液b中，记录浸液b的位置高度。(7)浸液烘干过程注意观察浸液剂量，干燥室温度应符合实验要求。(8)浸液后的滤纸全部从干燥室走出，关闭浸渍干燥机走纸开关，将滤纸做好标识，放入装有干燥剂的自封袋中并放入干燥器中待用。本发明的制备方法中，浸渍干燥机走速的设定是根据试纸在验证过程中逐步确认的，走速的快慢会影响试纸的干燥程度，对试纸的外观及准确度有一定影响。因此，经过试验证实浸液a干燥时，浸渍干燥机的走纸速度设定为11.5～15.5hz，浸液b干燥时，浸渍干燥机的走纸速度设定为23.0～27.0hz，在此走速条件下，试纸的干燥程度最好，并且试纸的外观最佳，准确度最高。本发明的一种过氧化氢检测干化学试纸的检测方法如下：结合迪瑞gmd-s600全自动妇科分泌物分析系统，取经过稀释的样本(阴道分泌物)，滴加一滴在试纸上，于37℃温浴8～10min，观察过氧化氢检测干化学试纸的的颜色变化，若试纸由无色或浅黄色变成淡蓝色或蓝色，即判定为过氧化氢阴性，指示阴道中可能有大量乳酸杆菌存在，阴道菌群正常。采用本发明的过氧化氢检测干化学试纸对样本(阴道分泌物)进行检测，检测过程采用一步法，检测过程简单易行，检测方法安全可靠。本发明以3,3’,5,5’-四甲基联苯胺为反应底物，利用自缩合反应对样本(阴道分泌物)进行检测。具体的检测反应原理如下：阴道分泌物中过氧化氢经过过氧化物酶的作用，释放出新生态氧，经过自缩合反应，生成呈蓝色的物质偶氮化合物，呈色深度与过氧化氢浓度呈正比。生成的蓝色偶氮化合物的结构式如下：具体的判断方法如下：(1)当阴道分泌物中不含有过氧化氢时，不显色(标记为“+”)表示阳性，指示阴道菌群失调，阴道环境病态或处于亚健康状态。(2)阴道分泌物中过氧化氢浓度小于2umol/l，显淡蓝色(标记为“±”)，指示阴道中可能有中量乳酸杆菌存在，需结合临床进行判断，通常判定为阴性，阴道菌群开始呈现不正常趋势或处于恢复期。(3)当阴道分泌物中过氧化氢浓度不小于2umol/l，显蓝色(标记为“-”)表示阴性，指示阴道中可能有大量乳酸杆菌存在，阴道菌群正常。检测反应原理如下：下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。实施例1过氧化氢检测干化学试纸的制备(1)浸液a的配制将1.0mol/kg柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液、15.0％(v/v)明胶、1.5mg/mledta、0.5mg/ml辣根过氧化物酶和2.0mg/ml十二烷基硫酸钠混合均匀形成浸液a。(2)浸液b的配制将0.5mg/ml3,3’,5,5’-四甲基联苯胺溶解于无水乙醇溶液中形成浸液b。(3)浸渍干燥机干燥温度和走纸速度的设定按照开机流程和操作规范要求打开将浸渍干燥机，根据需要设置干燥温度、走纸速度，待干燥温度达到设定值并且各干燥室温度达到规定温度时才能开始进行浸液，具体的干燥温度和走纸速度设定如下：1)浸液a浸渍干燥机温度的设定：将浸渍干燥机的温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃；浸渍干燥机走速的设定：将浸渍干燥机的走纸速度设定为11.5～15.5hz。2)浸液b浸渍干燥机温度的设定：将浸渍干燥机的温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃；浸渍干燥机走速的设定：将浸渍干燥机的走纸速度设定为23.0～27.0hz。(4)将浸液使用的3mm型滤纸进行悬挂，安装好浸渍槽a和浸渍槽b。(5)将配制好的浸液a倒入浸渍槽a中，浸液量应在浸渍槽a的1/2处，然后将剩余的浸液a倒入盛药瓶a中，调节浸液a注入的速度，将盛药瓶a密封；将配制好的浸液b倒入浸渍槽b中，浸液量应在浸渍槽b的1/2处，然后将剩余的浸液b倒入盛药瓶b中，调节浸液b注入的速度，将盛药瓶b密封。(6)浸液的干燥1)浸液a的干燥开启浸渍干燥机走纸开关，按照之前设定的干燥温度和走纸速度进行浸液a的干燥，即待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃时，用压纸轮将滤纸浸入浸液a中，记录浸液a的位置高度。2)浸液b的干燥完成浸液a的干燥后，按照之前设定的干燥温度和走纸速度进行浸液b的干燥，即待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃时，用压纸轮将滤纸浸入浸液b中，记录浸液b的位置高度。(7)浸液烘干过程注意观察浸液剂量，干燥室温度应符合实验要求。(8)浸液后的滤纸全部从干燥室走出，关闭浸渍干燥机走纸开关，将滤纸做好标识，放入装有干燥剂的自封袋中并放入干燥器中待用。实施例2过氧化氢检测干化学试纸的制备(1)浸液a的组成如下：2.0mol/kg柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液；15.0％(v/v)明胶；1.5mg/mledta；0.5mg/ml辣根过氧化物酶；2.0mg/ml十二烷基硫酸钠。(2)浸液b的组成如下：1.0mg/ml3,3’,5,5’-四甲基联苯胺；无水乙醇溶液。(3)滤纸类型：3mm型滤纸。(4)浸渍干燥机温度设定：浸液a：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液；浸液b：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液。(5)浸渍干燥机走速设定：浸液a：11.5～15.5hz；浸液b：23.0～27.0hz。(6)其他步骤同实施例1。实施例3过氧化氢检测干化学试纸的制备(1)浸液a的组成如下：3.0mol/kg柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液；15.0％(v/v)明胶；1.5mg/mledta；0.5mg/ml辣根过氧化物酶；2.0mg/ml十二烷基硫酸钠。(2)浸液b的组成如下：2.0mg/ml3,3’,5,5’-四甲基联苯胺；无水乙醇溶液。(3)滤纸类型：3mm型滤纸。(4)浸渍干燥机温度设定：浸液a：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液；浸液b：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液；(5)浸渍干燥机走速设定：浸液a：11.5～15.5hz；浸液b：23.0～27.0hz。(6)其他步骤同实施例1。实施例4过氧化氢检测干化学试纸的制备(1)浸液a的组成如下：1.0mol/kg柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液；15.0％(v/v)明胶；1.5mg/mledta；0.5mg/ml辣根过氧化物酶；2.0mg/ml十二烷基硫酸钠。(2)浸液b的组成如下：0.5mg/ml3,3’,5,5’-四甲基联苯胺；无水乙醇溶液。(3)滤纸类型：3mm型滤纸。(4)浸渍干燥机温度设定：浸液a：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液；浸液b：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液.浸渍干燥机走速设定：浸液a：11.5～15.5hz；浸液b：23.0～27.0hz。(6)其他步骤同实施例1。实施例5过氧化氢检测干化学试纸的制备(1)浸液a的组成如下：2.0mol/kg柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液；15.0％(v/v)明胶；1.5mg/mledta；0.5mg/ml辣根过氧化物酶；2.0mg/ml十二烷基硫酸钠。(2)浸液b的组成如下：1.0mg/ml3,3’,5,5’-四甲基联苯胺；无水乙醇溶液。(3)滤纸类型：3mm型滤纸。(4)浸渍干燥机温度设定：浸液a：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液；浸液b：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液。(5)浸渍干燥机走速设定：浸液a：11.5～15.5hz；浸液b：23.0～27.0hz。(6)其他步骤同实施例1。实施例6过氧化氢检测干化学试纸的制备(1)浸液a的组成如下：3.0mol/kg柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液；15.0％(v/v)明胶；1.5mg/mledta；0.5mg/ml辣根过氧化物酶；2.0mg/ml十二烷基硫酸钠。(2)浸液b的组成如下：2.0mg/ml3,3’,5,5’-四甲基联苯胺；无水乙醇溶液。(3)滤纸类型：3mm型滤纸。(4)浸渍干燥机温度设定：浸液a：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液；浸液b：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液。(5)浸渍干燥机走速设定：浸液a：11.5～15.5hz；浸液b：23.0～27.0hz。(6)其他步骤同实施例1。实施例7过氧化氢检测干化学试纸的制备(1)浸液a的组成如下：1.0mol/kg磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液；15.0％(v/v)明胶；1.5mg/mledta；0.5mg/ml辣根过氧化物酶；2.0mg/ml十二烷基硫酸钠。(2)浸液b的组成如下：0.5mg/ml3,3’,5,5’-四甲基联苯胺；无水乙醇溶液。(3)滤纸类型：3mm型滤纸。(4)浸渍干燥机温度设定：浸液a：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液；浸液b：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液。(5)浸渍干燥机走速设定：浸液a：11.5～15.5hz；浸液b：23.0～27.0hz。(6)其他步骤同实施例1。实施例8过氧化氢检测干化学试纸的制备(1)浸液a的组成如下：2.0mol/kg磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液；15.0％(v/v)明胶；1.5mg/mledta；0.5mg/ml辣根过氧化物酶；2.0mg/ml十二烷基硫酸钠。(2)浸液b的组成下：1.0mg/ml3,3’,5,5’-四甲基联苯胺；无水乙醇溶液。(3)滤纸类型：3mm型滤纸。(4)浸渍干燥机温度设定：浸液a：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液；浸液b：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液.(5)浸渍干燥机走速设定：浸液a：11.5～15.5hz浸液b：23.0～27.0hz(6)其他步骤同实施例1。实施例9过氧化氢检测干化学试纸的制备(1)浸液a的组成为：3.0mol/kg磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液；15.0％(v/v)明胶；1.5mg/mledta；0.5mg/ml辣根过氧化物酶；2.0mg/ml十二烷基硫酸钠。(2)浸液b的组成为：2.0mg/ml3,3’,5,5’-四甲基联苯胺；无水乙醇溶液。(3)滤纸类型：3mm型滤纸。(4)浸渍干燥机温度设定：浸液a：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液；浸液b：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液.(5)浸渍干燥机走速设定：浸液a：11.5～15.5hz；浸液b：23.0～27.0hz。(6)其他步骤同实施例1。实施例10过氧化氢检测干化学试纸的制备(1)浸液a的组成为：1.5mol/kg柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液；15.0％(v/v)明胶；1.5mg/mledta；0.5mg/ml辣根过氧化物酶；1.0mg/ml十二烷基苯磺酸钠。(2)浸液b的组成为：1.0mg/ml3,3’,5,5’-四甲基联苯胺；无水乙醇溶液。(3)滤纸类型：3mm型滤纸。(4)浸渍干燥机温度设定：浸液a：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液；浸液b：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液。(5)浸渍干燥机走速设定：浸液a：11.5～15.5hz；浸液b：23.0～27.0hz。(6)其他步骤同实施例1。实施例11过氧化氢检测干化学试纸的制备(1)浸液a：1.5mol/kg柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液；15.0％(v/v)明胶；1.5mg/mledta；0.5mg/ml辣根过氧化物酶；1.5mg/ml十二烷基苯磺酸钠。(2)浸液b的组成如下：1.0mg/ml3,3’,5,5’-四甲基联苯胺；无水乙醇溶液。(3)滤纸类型：3mm型滤纸。(4)浸渍干燥机温度设定：浸液a：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液；浸液b：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液。(5)浸渍干燥机走速设定：浸液a：11.5～15.5hz；浸液b：23.0～27.0hz。(6)其他步骤同实施例1。实施例12过氧化氢检测干化学试纸的制备(1)浸液a：1.5mol/kg柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液；15.0％(v/v)明胶；1.5mg/mledta；0.5mg/ml辣根过氧化物酶；2.0mg/ml十二烷基苯磺酸钠。(2)浸液b的组成如下：1.0mg/ml3,3’,5,5’-四甲基联苯胺；无水乙醇溶液。(3)滤纸类型：3mm型滤纸。(4)浸渍干燥机温度设定：浸液a：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液；浸液b：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液。(5)浸渍干燥机走速设定：浸液a：11.5～15.5hz；浸液b：23.0～27.0hz。(6)其他步骤同实施例1。实施例13过氧化氢检测干化学试纸的制备(1)浸液a的组成如下：2.0mol/kg柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液；15.0％(v/v)明胶；1.5mg/mledta；0.5mg/ml辣根过氧化物酶；2.0mg/ml十二烷基硫酸钠。(2)浸液b的组成如下：1.0mg/ml3,3’,5,5’-四甲基联苯胺；无水乙醇溶液。(3)滤纸类型：31et型滤纸。(4)浸渍干燥机温度设定：浸液a：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液；浸液b：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液。浸渍干燥机走速设定：浸液a：11.5～15.5hz；浸液b：23.0～27.0hz。(6)其他步骤同实施例1。实施例14过氧化氢检测干化学试纸的制备(1)浸液a的组成如下：2.0mol/kg柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液；15.0％(v/v)明胶；1.5mg/mledta；0.5mg/ml辣根过氧化物酶；2.0mg/ml十二烷基硫酸钠。(2)浸液b的组成如下：1.0mg/ml3,3’,5,5’-四甲基联苯胺；无水乙醇溶液。(3)滤纸类型：319型滤纸。(4)浸渍干燥机温度设定：浸液a：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液；浸液b：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液。(5)浸渍干燥机走速设定：浸液a：11.5～15.5hz；浸液b：23.0～27.0hz。(6)其他步骤同实施例1。实施例15过氧化氢检测干化学试纸的制备(1)浸液a的组成如下：2.0mol/kg柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液；15.0％(v/v)明胶；1.5mg/mledta；0.5mg/ml辣根过氧化物酶；2.0mg/ml十二烷基硫酸钠；(2)浸液b的组成如下：1.0mg/ml3,3’,5,5’-四甲基联苯胺；无水乙醇溶液。(3)滤纸类型：319型滤纸。(4)浸渍干燥机温度设定：浸液a：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液；浸液b：开机后将设备温度主加热设定为75℃，副加热设定为55℃，待主机加热温度达到75℃，各干燥室温度≥55℃左右时开始浸液。(5)浸渍干燥机走速设定：浸液a：11.5～15.5hz；浸液b：23.0～27.0hz。(6)其他步骤同实施例1。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。当前第1页12