杜仲中松脂醇二葡萄糖苷含量的测量方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及化学检测技术领域，特别是一种杜仲中松脂醇二葡萄糖苷含量的测量 方法。
【背景技术】
[0002] 现有的检测杜仲中松脂醇二葡萄糖苷含量的方法多采用索氏提取器以加热回流 的方式进行，萃取时间长达12小时，操作非常不便。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供一种萃取迅速、精度高、标准偏差小的杜仲中松脂醇二葡萄 糖苷含量的测量方法。
[0004] 本发明提供的技术方案为：一种杜仲中松脂醇二葡萄糖苷含量的测量方法，包括 以下步骤：
[0005] 步骤1 :米用ASE萃取方法萃取粉碎过的杜仲样品，其中，ASE萃取方法包括先在 快速溶剂萃取仪中采用正己烷萃取，然后在快速溶剂萃取仪中用甲醇萃取，收集甲醇萃取 液；
[0006] 步骤2 :采用HPLC法检测甲醇萃取液中的松脂醇二葡萄糖苷含量。
[0007] 优选地，所述的步骤1具体包括以下子步骤：
[0008] Sl :将杜仲样品剪碎、粉粹，过三号筛，取过筛后的粉末Ig ;
[0009] S2 :将硅藻土和过筛后的粉末等重量比混合，装于IOml的萃取池中；
[0010] S3 :在萃取池中加入正己烷静态萃取，正己烷萃取液舍弃；
[0011] S4:在萃取池中加入甲醇静态萃取，收集并采用甲醇定容至50ml，过滤，得到甲醇 萃取液。
[0012] 优选地，所述的S4中，萃取参数为：萃取温度100~140°C、静态萃取时间5~ 9min、冲洗体积相当于萃取池体积的100%~150%、循环次数1~2次。
[0013] 优选地，所述的S3中，萃取参数为：萃取温度100~140°C、静态萃取时间5~ 9min、冲洗体积相当于萃取池体积的100%~150%、循环次数1~2次。
[0014] 优选地，所述的ASE萃取方法采用美国DIONEX公司的ASE350快速溶剂萃取仪进 行。
[0015] 优选地，所述的HPLC法的检测参数为：色谱柱为Agilent HC-C18⑵，5 μ m 4. 6X250nm ;流动相为甲醇/水，甲醇：水的体积比为25 :75 ;柱温：40°C;流速：1.0ml/min ; 检测波长：277nm ;进样量：5 μ 1〇
[0016] 优选地，所述的HPLC法采用日本岛津LC-2010型高效液相色谱仪。
[0017] 优选地，所述的HPLC法的理论塔板数不少于6000。
[0018] 本发明在采用上述技术方案后，其具有的有益效果为：
[0019] 本发明采用ASE萃取方法萃取，通过采用正己烷和甲醇分次萃取，先通过正己烷 萃取避免其他组分对检测的影响，使其他杂质的出峰不影响松脂醇二葡萄糖苷的出峰，另 外通过甲醇精确高效的萃取松脂醇二葡萄糖苷，使测量更加准确。
【附图说明】
[0020] 图1为本发明的标准样品检测的图谱；
[0021] 图2为本发明的实施例1的检测的图谱。
【具体实施方式】
[0022] 下面结合【具体实施方式】，对本发明的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制。
[0023] 实施例1 :
[0024] 萃取步骤
[0025] 设备为美国DIONEX公司的ASE350快速溶剂萃取仪。
[0026] 步骤1 :取杜仲样品，剪成碎片，粉碎，过三号筛，取约lg，精密称定，按重量比1 :1 的比例加入硅藻土后混匀，装于IOml萃取池（装样前在萃取池底部加入适量的硅藻土，装 样后用硅藻土填满萃取池）；
[0027] 步骤2 :先用正己烷进行静态萃取，弃去正己烷萃取液，继续用甲醇进行静态萃 取，回收甲醇提取液至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得甲醇萃取 液；
[0028] 其中，正己烷进行静态萃取的参数为萃取温度100°C、静态萃取时间5min、冲洗体 积相当于萃取池体积的100%、循环次数1次；
[0029] 甲醇进行静态萃取的参数为萃取温度100°C、静态萃取时间5min、冲洗体积相当 于萃取池体积的100%、循环次数1次。
[0030] 检测过程
[0031] 检测设备为日本岛津LC-2010型高效液相色谱仪。
[0032] 步骤3 :将步骤2得到的甲醇萃取液采用HPLC法进行检测，相关参数为：色谱柱 为 Agilent HC-C18 ⑵（5μπι 4. 6X250nm);流动相为甲醇：水（25 :75);柱温：40°C ;流速： 1.0 ml/min ;检测波长：277nm ;进样量：5 μ 1 ;理论塔板数7000。
[0033] 检测结果见图2。
[0034] 标准样品的检测
[0035] 精密称取松脂醇二葡萄糖苷对照品10. 12mg，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得，浓 度：0· 9169mg/ml。
[0036] 采用实施例1的步骤3所述的方法进行检测。
[0037] 检测结果见图1。
[0038] 实施例2
[0039] 萃取温度的考察
[0040] 称取同一批次（批号：140601)杜仲样品12份，每份约lg，精密称定，装于萃取池 中，在静态萃取时间为5min，冲洗体积为100%，循环次数为2次的条件下，分别设定80°C、 100°C、120°C、140°C四个程序萃取，萃取液定容至50ml量瓶中，按实施例1中的步骤3所述 的色谱条件进样，计算，结果见表1。
[0041] 表1萃取温度考察
[0043] 从表1可知，萃取温度为100°C以上时提取效率基本一致，虽然随着萃取温度升 高，溶剂的粘度下降，从而加强溶解目标分析物的能力，但同时共萃物的溶解能力也加强， 考虑温度过高共萃物干扰大，故选择萃取温度为l〇〇°C。
[0044] 实施例3
[0045] 静态萃取时间的考察
[0046] 称取同一批次（批号：140601)杜仲样品12份，每份约lg，精密称定，装于萃取池 中，在萃取温度为l〇〇°C，冲洗体积为100%，循环次数为2次的条件下，分别设定静态萃取 时间3min、5min、7min、9min四个程序萃取，萃取液定容至50ml量瓶中，按实施例1中的步 骤3色谱条件进样，计算，结果见表2。
[0047] 表2静态萃取时间考察
[0048]
[0049] 从表2可知，萃取时间为5min时基本提取完全，考虑节约时间和溶剂，故选择萃取 时间为5min。
[0050] 实施例4
[0051] 冲洗体积的考察
[0052] 称取同一批次（批号：140601)杜仲样品18份，每份约lg，精密称定，装于萃取池 中，在萃取温度为l〇〇°C，静态萃取时间为5m