一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法。
【背景技术】
[0002] 血中的胆固醇在正常时只在有限狭小的范围内存在，由于会随着肝实质障碍而上 升，所以胆固醇成为肝功能检查重要的项目。但目前所使用的关于游离胆固醇测定试剂盒 其准确性低，且操作复杂，不易推广。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法，其通过酶比色 法，操作简单，准确性高，便于推广。
[0004] 为了达到上述目的，本发明的技术方案是：
[0005] -种游离胆固醇测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括聚乙 二醇、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶，原材料浓度比份为：聚乙二醇：抗坏血酸氧化酶：过 氧化物酶=(1一3) : (4 - 6) : (9 -11);第二检测液包括4一氨基安替吡啉、过氧化物酶、胆 固醇氧化酶，原材料浓度比份为：4一氨基安替P比啉：过氧化物酶：胆固醇氧化酶=(1 一 3) : (9一11) : (4一6) 〇
[0006] 第一检测液包括聚乙二醇、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶，原材料浓度比份为：聚 乙二醇：抗坏血酸氧化酶：过氧化物酶=2:5:10 ;第二检测液包括4一氨基安替吡啉、过氧 化物酶、胆固醇氧化酶，原材料浓度比份为：4一氨基安替吡啉：过氧化物酶：胆固醇氧化酶 =2:10:5〇
[0007] -种游离胆固醇测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤：首先准备第一试剂管、第 二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一检测液240 μ L，蒸馏水3 μ L混合均 匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液240 μ L，标准液3 μ L混合均匀并孵 育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240 μ L，检测液3 μ L混合均匀并孵育5分 钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白AU标准 AU检测Al ;接着在第一试剂管内加入第二检测液加入80 μ L混合均匀并孵育5分钟，同时 在第二试剂管内加入第二检测液加入80 μ L混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内 加入第二检测液加入80 μ L混合均匀并孵育5分钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂 管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白Α2、标准Α2、检测Α2 ;最后根据计算公式：
[0008]
[0009] 计算出检测人血清中游离胆固醇的浓度，ΔΑ检测=检测Α2-检测Α1，ΔΑ空白= 空白Α2-空白Α1，Δ A标准=标准Α2-标准Al，C为人体标准血清中游离胆固醇的浓度。
[0010] 所述孵育时的温度均为37°c。
[0011] 作为第1反应，通过抗坏血酸氧化酶（AOD)将样本中的抗坏血酸去除。在第2反 应中通过胆固醇氧化酶的的作用，从游离型的胆固醇中生成过氧化氢，过氧化氢在过氧化 物酶的存在下将4-氨基安替吡林氧化缩合成红紫色的醌色素。通过测定醌色素的吸光度 求得血中游离型胆固醇的值。
[0012] 本发明的有益效果是：一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法，其通过酶比色 法，操作简单，准确性高，便于推广。
【具体实施方式】
[0013] 实施例1
[0014] 一种游离胆固醇测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括聚乙 二醇、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶，原材料浓度比份为：聚乙二醇：抗坏血酸氧化酶：过氧 化物酶=2:5:10 ;第二检测液包括4一氨基安替吡啉、过氧化物酶、胆固醇氧化酶，原材料 浓度比份为：4一氨基安替啦啉：过氧化物酶：胆固醇氧化酶=2:10:5。
[0015] -种游离胆固醇测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤：首先准备第一试剂管、第 二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一检测液240 μ L，蒸馏水3 μ L混合均 匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液240 μ L，标准液3 μ L混合均匀并孵 育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240 μ L，检测液3 μ L混合均匀并孵育5分 钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白AU标准 AU检测Al ;接着在第一试剂管内加入第二检测液加入80 μ L混合均匀并孵育5分钟，同时 在第二试剂管内加入第二检测液加入80 μ L混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内 加入第二检测液加入80 μ L混合均匀并孵育5分钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂 管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白Α2、标准Α2、检测Α2 ;最后根据计算公式：
[0016]
[0017] 计算出检测人血清中游离胆固醇的浓度，ΔΑ检测=检测Α2-检测Α1，ΔΑ空白= 空白Α2-空白Α1，ΔΑ标准=标准Α2-标准A1，C为人体标准血清中游离胆固醇的浓度。所 述孵育时的温度均为37°C。
[0018] 本实施例的一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法，其通过酶比色法，操作简 单，准确性高，便于推广。
[0019] 实施例2
[0020] 一种游离胆固醇测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括聚乙 二醇、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶，原材料浓度比份为：聚乙二醇：抗坏血酸氧化酶：过氧 化物酶=1:4:9 ;第二检测液包括4一氨基安替吡啉、过氧化物酶、胆固醇氧化酶，原材料浓 度比份为：4一氨基安替吡啉：过氧化物酶：胆固醇氧化酶=1:9:4。
[0021] -种游离胆固醇测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤：首先准备第一试剂管、第 二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一检测液240 μ L，蒸馏水3 μ L混合均 匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液240 μ L，标准液3 μ L混合均匀并孵 育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240 μ L，检测液3 μ L混合均匀并孵育5分 钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白AU标准 AU检测Al ;接着在第一试剂管内加入第二检测液加入80 μ L混合均匀并孵育5分钟，同时 在第二试剂管内加入第二检测液加入80 μ L混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内 加入第二检测液加入80 μ L混合均匀并孵育5分钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂 管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白Α2、标准Α2、检测Α2 ;最后根据计算公式：
[0022]
[0023]
[0024] 计算出检测人血清中游离胆固醇的浓度，ΔΑ检测=检测Α2-检测Α1，ΔΑ空白= 空白Α2-空白Α1，ΔΑ标准=标准Α2-标准A1，C为人体标准血清中游离胆固醇的浓度。所 述孵育时的温度均为37°C。
[0025] 本实施例的一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法，其通过酶比色法，操作简 单，准确性高，便于推广。
[0026] 实施例3
[0027] -种游离胆固醇测定试剂盒，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括聚乙 二醇、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶，原材料浓度比份为：聚乙二醇：抗坏血酸氧化酶：过氧 化物酶=3:6:11 ;第二检测液包括4一氨基安替吡啉、过氧化物酶、胆固醇氧化酶，原材料 浓度比份为：4一氨基安替啦啉：过氧化物酶：胆固醇氧化酶=3:11:6。
[0028] -种游离胆固醇测定试剂盒的使用方法，包括如下步骤：首先准备第一试剂管、第 二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一检测液240 μ L，蒸馏水3 μ L混合均 匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液240 μ L，标准液3 μ L混合均匀并孵 育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240 μ L，检测液3 μ L混合均匀并孵育5分 钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白AU标准 AU检测Al ;接着在第一试剂管内加入第二检测液加入80 μ L混合均匀并孵育5分钟，同时 在第二试剂管内加入第二检测液加入80 μ L混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内 加入第二检测液加入80 μ L混合均匀并孵育5分钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂 管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白Α2、标准Α2、检测Α2 ;最后根据计算公式：
[0029]
[0030] 计算出检测人血清中游离胆固醇的浓度，ΔΑ检测=检测Α2-检测Α1，ΔΑ空白= 空白Α2-空白Α1，ΔΑ标准=标准Α2-标准A1，C为人体标准血清中游离胆固醇的浓度。所 述孵育时的温度均为37°C。
[0031] 本实施例的一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法，其通过酶比色法，操作简 单，准确性高，便于推广。
【主权项】
1. 一种游离胆固醇测定试剂盒，其特征在于：包括第一检测液、第二检测液，第一检测 液包括聚乙二醇、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶，原材料浓度比份为：聚乙二醇：抗坏血酸 氧化酶：过氧化物酶=(1一3):(4-6):(9 -11);第二检测液包括4一氨基安替吡啉、过氧 化物酶、胆固醇氧化酶，原材料浓度比份为：4一氨基安替吡啉：过氧化物酶：胆固醇氧化酶 =(1一3) : (9一11) : (4一6)。2. 根据权利要求1所述的一种游离胆固醇测定试剂盒，其特征在于：第一检测液包括 聚乙二醇、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶，原材料浓度比份为：聚乙二醇：抗坏血酸氧化酶： 过氧化物酶=2:5:10;第二检测液包括4一氨基安替吡啉、过氧化物酶、胆固醇氧化酶，原 材料浓度比份为：4一氨基安替啦啉：过氧化物酶：胆固醇氧化酶=2:10:5。3. 根据权利要求1所述的一种游离胆固醇测定试剂盒的使用方法，其特征在于包括 如下步骤：首先准备第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管；接着在第一试剂管内加入第一 检测液240yL，蒸馏水3yL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第一检测液 240yL，标准液3yL混合均匀并孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第一检测液240yL， 检测液3yL混合均匀并孵育5分钟；然后分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管 的吸光度依次记录为空白AU标准AU检测Al;接着在第一试剂管内加入第二检测液加入 80yL混合均匀并孵育5分钟，同时在第二试剂管内加入第二检测液加入80yL混合均匀并 孵育5分钟，同时在第三试剂管内加入第二检测液加入80yL混合均匀并孵育5分钟；然后 分别读取第一试剂管、第二试剂管、第三试剂管的吸光度依次记录为空白A2、标准A2、检测 A2 ;最后根据计算公式：计算出检测人血清中游离胆固醇的浓度，AA检测=检测A2-检测Al，AA空白=空白A2-空白Al，AA标准=标准A2-标准Al，C为人体标准血清中游离胆固醇的浓度。4. 根据权利要求3所述的一种游离胆固醇测定试剂盒的使用方法，其特征在于：所述 孵育时的温度均为37°C。
【专利摘要】本发明公开了一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法，包括第一检测液、第二检测液，第一检测液包括聚乙二醇、抗坏血酸氧化酶、过氧化物酶，原材料浓度比份为：聚乙二醇:抗坏血酸氧化酶:过氧化物酶=（1—3）:（4—6）:（9—11）；第二检测液包括4—氨基安替吡啉？、过氧化物酶、胆固醇氧化酶，原材料浓度比份为：4—氨基安替吡啉:过氧化物酶:胆固醇氧化酶=（1—3）:（9—11）:（4—6）。本发明所述的一种游离胆固醇测定试剂盒及其使用方法，其通过酶比色法，操作简单，准确性高，便于推广。
【IPC分类】G01N33/92
【公开号】CN105137100
【申请号】CN201510579285
【发明人】黄争上
【申请人】绍兴圣康生物科技有限公司
【公开日】2015年12月9日
【申请日】2015年9月14日