冬虫夏草产品中微粉硅胶的检测试剂盒及检测方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种冬虫夏草产品中添加药用辅料的鉴别方法。
【背景技术】
[0002]冬虫夏草系麦角菌科真菌冬虫夏草菌Cordyceps sinensis (BerK.) Sacc寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体，为我国传统名贵中药。目前，市场上以冬虫夏草为主要原材料生产的产品种类逐渐增多，很多产品已价比黄金，这也导致了市场混乱，各种伪品和夸大宣传层出不穷。随着现代人对纯天然产品的追求，人们希望冬虫夏草的制剂中不含有任何添加物。于是，各个商家开始推出所谓的不添加任何辅料，即为纯冬虫夏草制剂产品，来吸引消费者。而冬虫夏草纯粉制剂存在着一定的技术难度，微粉硅胶被广泛应用于片剂的制作。因此，开发一种快速便捷的检测冬虫夏草产品中是否添加辅料微粉硅胶的试剂盒及方法显得十分重要。
[0003]微粉硅胶的化学成分为二氧化硅，2010年版《中国药典》中对辅料二氧化硅的定性鉴别方法，显色时间短且显色不稳定，同时不能有效排除一些如磷酸根离子的干扰。药典中记载的二氧化硅含量测定法为炽灼失重法，需要先后经过熔融、蒸发、酸解、凝聚、溶解、过滤、灰化和灼烧等复杂过程，具有耗时长和精密度不高，不能对微量的微粉硅胶进行准确定量检测的不足。文献中报道的其他定量方法如:挥散法在用硫酸和氢氟酸去杂的过程中需要掌握好温度、杂质是否除尽以及过量酸的消除等影响因素；容量法与操作者掌握操作的熟练程度有很大关系，很难对沉淀的条件把握好。虽然也有文献报道了运用分光光度法对矿石中二氧化硅的定量检测的方法，但是也具有显色不稳定，易受杂质干扰，实验操作繁琐的问题。目前，尚没有文献报道对中药制剂中微量的微粉硅胶准确定量的方法。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是针对上述现有技术的缺陷，提出一种快速便捷地半定量检测冬虫夏草产品中辅料微粉硅胶的试剂盒，及检测冬虫夏草产品中辅料微粉硅胶含量的方法。为达到上述目的，本发明提出了如下技术方案。
[0005]本发明的第一方面的技术方案提供了一种快速检测冬虫夏草产品中微粉硅胶的试剂盒，包括试剂瓶、比色卡、比色管，其中，所述的试剂瓶共5个，分别含有试剂A、试剂B、试剂C、试剂D和试剂E ；
[0006]所述的试剂A的配制方法为:将分析纯的碳酸钾与氢氧化钾按照3:4质量进行均匀混合即得；
[0007]所述的试剂B的配制方法为:取钼酸6.5g，加水14mL与25 %的氨水14.5mL，振摇使溶解，冷却，在搅拌下缓缓加入已冷却的32mL65%硝酸与40mL水的混合液中，静置48h，滤过，取滤液即得；
[0008]所述的试剂C的配制方法为:取草酸7.5g于10mL容量瓶中，用少量水溶解，稀释、定容至刻度，即得；
[0009]所述的试剂D为无水乙醇；
[0010]所述的试剂E为微粉硅胶标准品；
[0011 ] 所述的比色卡制作方法为:
[0012]I)取5份冬虫夏草原粉，每份0.3g，置于镍i甘祸中，分别加入0mg、L 5mg、3.6mg、7.5mg、15mg微粉娃胶与之混合；
[0013]2)将混合物与碳酸钾150mg，氢氧化钾200mg，在650°C炽灼15min，冷却，加水10mL，混匀，离心，取上清液ImL于1mL比色管中，加无水乙醇lmL，0.04M钼酸铵试液lmL，混匀，反应1min后，加入ImL0.833M草酸溶液；
[0014]3)按照不同百分含量微粉硅胶在试管中显现出来的颜色制成比色卡。
[0015]在一些实施方式中，所述的比色卡从左到右的颜色依次为:淡黄色、浅黄色、米黄色、中黄色、柠檬黄色，代表相应的冬虫夏草中添加微粉硅胶的浓度为0%、0.5%、1.2%、2.5%和
[0016]本发明第二方面的技术方案提供了一种鉴别冬虫夏草产品中是否添加微粉硅胶的方法，利用本发明第一方面的技术方案提供的试剂盒，包括以下步骤:
[0017]将冬虫夏草产品研磨粉碎，取0.3g置于镍坩祸中，加入试剂A 350mg，在650°C炽灼15min，冷却，加水10mL，混勾，离心，取上清液ImL于1mL比色管中，加试液D ImL,试液B lmL，混匀，反应1min后，加入试液C lmL，观察实验现象，并将颜色同试剂盒中的比色卡的颜色进行比对，找出其颜色对应的梯度范围，即可确定该产品中的微粉硅胶百分比含量范围。
[0018]本发明第三方面的技术方案提供了一种定量检测冬虫夏草产品中是否添加微粉硅胶的方法，利用本发明第一方面的技术方案提供的试剂盒，包括以下步骤:
[0019](I)分别取试剂 E 0mg、0.9mg、2.4mg、3.6mg、4.5mg、6mg、9mg、12mg 8 份，置于镍i甘祸中，另取I份研磨成粉的待测冬虫夏草产品0.3g ;
[0020](2)往步骤(I)的9个样品中分别加入试液A 350mg，在650°C炽灼15min，冷却，加水10mL，混匀，离心，取上清液Iml加入4ml水，摇匀，取稀释后的溶液Iml于1mL比色管中，加试液D ImL,试液B ImL,混勾，反应1min后，加入试液C ImL ；
[0021](3)利用紫外分光光度计测定以上9个样品在410nm处紫外吸收值；
[0022](4)建立微粉硅胶的百分比含量与紫外吸收值的函数关系；在本发明的一些实施方式中，所建立的标准方程为I = 30.61x+0.442，相关系数R = 0.998 ;
[0023](5)将冬虫夏草产品吸收值代入方程计算得微粉硅胶的精确百分比含量。
[0024]本发明的技术方案的第一方面提供的试剂盒能够稳定显色，排除很多干扰，可以对微量的微粉硅胶进行定量检测，对冬虫夏草产品检测具有很好的稳定性、重复性和特异性；本发明的技术方案的第二方面提供的冬虫夏草产品中添加微粉硅胶进行半定量的方法不需要任何其他试剂，不需要任何检测仪器，操作也便捷，利用比色卡半定量的范围从0-5%，覆盖了一般冬虫夏草制剂中添加微粉硅胶的范围；本发明的技术方案的第三方面提供的定量检测方法，由于对反应溶液进行了适当比例的稀释，使得该检测方法在微粉硅胶在实际添加范围内(0-5% )有很好的线性关系。
【附图说明】
[0025]图1为实施例2建立的微粉硅胶的含量与吸收值的函数关系的标准曲线。
【具体实施方式】
[0026]以下所述的是本发明的优选实施方式，本发明所保护的不限于以下优选实施方式。应当指出，对于本领域的技术人员来说在此发明创造构思的基础上，做出的若干变形和改进，都属于本发明的保护范围。实施例中所用的产品均为通过商业途径获得。
[0027]实施例1