酒中二氧化硫的检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种检测方法，尤其涉及酒中二氧化硫的检测方法，属于检测分析领 域。
【背景技术】
[0002] 在食品生产加工过程中，厂商常加入漂白剂等破坏食品的变色因子，保持食品免 于发生褐变，从而来保持食品的特有光泽及控制其组分。而在我国食品行业中，使用最大的 组分为二氧化硫及亚硫酸盐，近年来，由于食品中亚硫酸盐的超量使用及滥用的情况日益 严重，直接导致食品中二氧化硫含量明显增加。另外，也有部分不法产家，在食品中直接添 加大量二氧化硫。
[0003] 二氧化硫残留量是亚硫酸盐在食品中存在的计量形式，亚硫酸盐主要包括亚硫酸 钠、亚硫酸氢钠、低亚硫酸钠（又名保险粉）、焦亚硫酸钠、焦亚硫酸钾和硫磺燃烧生成的二 氧化硫等。这些物质于食品中解离成具有强还原性的亚硫酸，起到漂白、脱色、防腐和抗氧 化作用。但亚硫酸盐具有一定的毒性，可与蛋白质的巯基进行可逆反应，刺激消化道黏膜， 出现恶心、呕吐、腹泻等症状.摄入过量的亚硫酸盐，会影响人体对钙的吸收，并破坏B族维 生素，长期摄入则会对肝脏造成损害。美国食品与药物管理局（FDA)要求对亚硫酸盐使用 量尚于l〇mg/kg的食品予以标明。我国《食品添加剂使用卫生标准》对食品中的二氧化硫 及亚硫酸盐等允许的残留量有严格的限量标准，但目前食品中二氧化硫及亚硫酸盐等超标 的现象仍较普遍。
[0004] 葡萄酒是以葡萄为原料的发酵酒，特别是干红，因具有一定的营养价值，深受国内 消费者的喜爱。葡萄酒的进口量也逐年增加。在葡萄酒酿造过程中，亚硫酸盐作为防腐剂被 广泛应用，由于目前并没有找到更好的添加剂替代品，所以作为配料的一部分，葡萄酒中， 包括进口葡萄酒都有不同含量水平的二氧化硫残留。同样，葡萄酒中的二氧化硫过高也会 对消费者带来危害。国家强制性标准GB15037-2006《葡萄酒》也制定了 250mg/L(以二氧 化硫计）的限量标准。
[0005] 亚硫酸盐含量的检测方法很多，常用的有：盐酸副玫瑰苯胺比色法、蒸馏一碘量滴 定法、直接滴定法等。但是，比色法对于本身有红色或玫瑰红色的样品（如红葡萄酒），会产 生明显干扰，且难以扣除；直接滴定法，也因葡萄酒的深红色影响滴定终点的判断而导致测 定结果的不准确。所以，国家标准GB/T15038-2006《葡萄酒、果酒通用试验方法》规定了 蒸馏一碘量滴定法来测定葡萄酒中的亚硫酸盐，但是该方法大约需蒸馏1个多小时，耗时 较长，大批量检测速度太慢。在大样品量的情况下，例如口岸进口葡萄酒检测，该方法显然 不能满足快速简便的检测需求。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于提供一种酒中二氧化硫的检测方法，用于克服现有技术过程繁 琐、检测时间长、操作要求高等不足，建立一种葡萄酒中二氧化硫的快速检测方法，方便、快 捷、准确、尚效地完成匍甸酒中^?氧化硫含量检测。
[0007] 为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下：
[0008] 酒中二氧化硫的检测方法，其特征在于，样品经吸附剂净化脱色后，通过盐酸副玫 瑰苯胺比色法进行含量检测。
[0009] 优选的，所述检测方法包括如下步骤：
[0010] (1)二氧化硫标准溶液制备：利用二氧化硫标准贮备溶液，加入甲醛缓冲吸收液 配置成二氧化硫含量为0-50μg的系列标准溶液；
[0011] (2)样品脱色处理：准确移取0. 2-0. 5ml的所述样品，用水稀释10-50倍，然后取 样品稀释液，经吸附剂净化脱色，取滤液并加入甲醛缓冲吸收液进行稳定，获得样品溶液；
[0012] (3)显色反应：向步骤（1)中制备好的系列二氧化硫标准溶液和步骤（2)中处理 好的样品溶液中，分别加入氨磺酸钠水溶液和氢氧化钠水溶液，混匀，然后加入盐酸副玫瑰 苯胺水溶液，在10-30°C下反应5-40分钟，获得相应的系列二氧化硫标准显色液和样品显 色液；
[0013] (4)检测：步骤（3)中显色反应完成后，利用食品快速检测仪在波长577nm处对步 骤（3)获得的系列二氧化硫标准显色液和样品显色液分别进行吸光度测定，根据系列二氧 化硫标准显色液的吸光度和浓度绘制标准曲线，然后根据样品显色液的吸光度对照标准曲 线计算得出样品溶液中二氧化硫的含量。
[0014] 优选的，所述系列二氧化硫标准浓度溶液和所述样品溶液的体积为5mL，所述氨 磺酸钠水溶液和氢氧化钠水溶液的加入量为5滴，所述盐酸副玫瑰苯胺水溶液的加入量为 0. 5mL〇
[0015] 优选的，所述的吸附剂为强阳离子交换树脂、碳纳米管。
[0016] 优选的，所述的吸附剂为强阳离子交换树脂、碳纳米管等吸附材料所制成的固相 萃取小柱。
[0017] 优选的，所述吸附剂为WatersMCX小柱或碳纳米管。
[0018] 优选的，所述甲醛缓冲吸收液的配置方法为：将体积浓度为36%~38%的甲醛水 溶液3-6mL、环己二胺四乙酸二钠水溶液10-25mL、和含1. 5-2. 5g邻苯二甲酸氢钾的邻苯二 甲酸氢钾水溶液混合，再用水稀释至l〇〇mL，得到甲醛缓冲吸收贮备液，然后再用水将甲醛 缓冲吸收贮备液稀释10倍，即得到所述甲醛缓冲吸收液。
[0019] 优选的，所述甲醛缓冲吸收液的配置使用的环己二胺四乙酸二钠水溶液的浓度为 0.05mol/L〇
[0020] 优选的，所述氨磺酸钠水溶液的质量浓度为4. 0-6.Og/L，所述氢氧化钠水溶液的 浓度为 〇· 5-1. 5mol/L。
[0021] 优选的，所述盐酸副玫瑰苯胺水溶液的质量浓度为0. 3-0. 6g/L，配置方法为：吸 取15-30mL质量浓度为2.Og/L的副玫瑰苯胺贮备液于100mL容量瓶中，加25-35mL体积浓 度为85%的浓磷酸和8-16mL的12mol/L浓盐酸，用水稀释至标线，摇勾，放置过夜后使用。
[0022] 优选的，所述食品快速检测仪为便携式比色计或分光光度计。
[0023] 与现有技术相比，本发明提供的酒中二氧化硫的检测方法的优势在于：
[0024] 1.利用本方法实现了葡萄酒特别是深色葡萄酒中二氧化硫的快速检测，与现有的 蒸馏法相比，可将检测时间大大缩短。现有技术中，采用蒸馏法检测样品时，需要对样品进 行蒸馏处理，以排除样品中色素的干扰，单个样品至少需要45分钟，而单套装置完成10个 样品至少6小时；而本发明采用吸附剂对样品进行净化脱色处理，单个样品可在半小时内 完成检测，单套装置可在1小时内至少完成10个样品的检测；
[0025] 2.本法所用装置为便携式装置，充电后无需交流电，可在实验室或现场完成检测； 而蒸馏法需要复杂的玻璃蒸馏装置，只能在实验室内完成检测。
[0026] 3.本法操作简单，且有商业化试剂盒出售，经简单培训即可完成检测，提高了检测 效率；而蒸馏法操作需要加热、蒸馏、相关试剂的配制等分析步骤，操作繁复，需要一定化学 分析水平的人员才可完成。
【具体实施方式】
[0027] 以下结合具体实施例对本发明提出的酒中二氧化硫的检测方法作进一步详细说 明。根据下面说明和权利要求书，本发明的优点和特征将更清楚。
[0028] 实施例1 :酒中二氧化硫的检测方法
[0029] 实验所用试剂和样品均为市购商品。
[0030] 一种酒中二氧化硫的检测方法，样品经吸附剂净化脱色后，通过盐酸副玫瑰苯胺 比色法进行含量检测。具体步骤包括：
[0031] (1)系列二氧化硫标准浓度溶液配制：
[0032] a)二氧化硫标准溶液：配制浓度为10. 0μg/mL的二氧化硫标液。用甲醛缓冲吸 收液将市售的二氧化硫标准溶液稀释成每毫升含10. 〇μg二氧化硫的校准溶液。此溶液用 于绘制校准曲线，在4~5°C下冷藏，可稳定1个月。
[0033] b)分别移取二氧化硫标准溶液 0mL，0. 5mL，1. 00mL，2. 00mL，3. 00mL，5.OOmL于 15mL刻度离心管中，用水定容至5.OmL，再在各管中分别加入0. 5mL甲醛缓冲吸收液。对应 的二氧化硫标准溶液系列中二氧化硫的含量范围为0-50μg。
[0034] (2)样品前处理：定量吸取葡萄酒样品进行稀释，对于颜色较深的葡萄酒，利用吸 附剂对样品进行净化脱色处理。
[0035] a)红色或桃红色等颜色较深的葡萄酒样品前处理：
[0036] 按试样中二氧化硫不同含量，准确移取0. 2mL~0. 5mL试样，用水稀释至10.OmL。 准确移取〇. 5mL样品稀释液（可根据初测浓度确定相应的稀释液取样量，若初测浓度较 低，则应加大取样量），经吸附剂进行净化脱色处理后，收集滤液至离心管中，用水定容至 5.OmL，再加入0. 5mL甲醛缓冲吸收液。
[0037] b)白色等浅色或无色葡萄酒样品前处理：
[0038] 按试样中二氧化硫不同含量，准确移取0. 2mL~0. 5mL试样，用水稀释至10.OmL。 准确移取〇. 5mL样品稀释液（可根据初测浓度确定相应的稀释液取样量，若初测浓度较低， 则应加大取样量），用水定容至5.OmL，再加入0. 5mL甲醛缓冲吸收液。
[0039] (3)显色反应：对上述配置好的系列二氧化硫标准浓度溶液和样品进行显色反 应，具体的显色反应步骤为：
[0040] 向上述系列二氧化硫标准浓度溶液和样品溶液中加入5滴氨磺酸钠溶液和5 滴氢氧化钠溶液，混匀，加入〇. 5mL盐酸副玫瑰苯胺溶液（PRA溶液），在10-30 °C下反应 5-40min〇
[0041] (4)检测：显色反应完成后，对系列二氧化硫标准浓度溶液和样品溶液上机进行 吸光度测定，根据如下步骤进行操作：
[0042] a)标准曲线绘制：利用食品快速检测仪对系列二氧化硫标准浓度溶液进行检测， 在波长577nm处，用光纤探头，以水为参比测量吸光度，以空白校正后各二氧化硫标准浓度 溶液管的吸光度为纵坐标，以二氧化硫的含量（μg)为横坐标，建立标准曲线的线性回归 方程。
[0043] b)样品中二氧化硫含量测定：利用食品快速检测仪，在波长577nm处，用光纤探 头，以水为参比测量吸光度，测量以空白校正后样品溶液的吸光度，根据标准曲线