专利名称：一种香菇中二氧化硫含量的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种香菇中二氧化硫含量的检测方法，特别是一种基于离子色谱技术 的香菇中so32-的检测方法。
背景技术：
香菇(Lentinus edodes (Berk. ) sing)，又名花蕈、香信、椎茸、冬菰、厚菇、花菇，是 世界第二大食用菌，也是我国特产之一，在民间素有“山珍”之称[1]。我国香菇出口贸易量 近10年逐渐上升，年递增率约为2% ；目前中国的香菇年产量为8万吨，在全球10万吨中 占有80%以上，居世界第一位；出口 3. 6万吨，也居世界香菇出口国之首。然而，事实上我 国干香菇对日出口一直受二氧化硫和甲氰菊酯问题困扰，2007年1 9月我国输日干香菇 一共被查出8例违规案例，其中2例甲氰菊酯超标，6例二氧化硫超标[2]。特别值得一提的是二氧化硫问题，已经严重影响我国干香菇出口。据中国食品土 畜进出口商会食用菌分会调查了解，对二氧化硫是不是干香菇风味形成的成分之一，目前 国内外的业界对此尚处于摸索研究阶段，尚未有公认的结论。日本厚生省对干香菇二氧化 硫限量标准是30ppm，不同的口岸检测方法不同，横滨检疫所是采用比色法，而日本检疫所 用的是日本食品分析方法改良的滴定法，由于采取不同检验方法，结果自然不一样，我国输 日香菇二氧化硫超标六例中有四例是在横滨检出的[2]。我国现在针对食品中二氧化硫的检测执行的标准是GB/T5009. 34_2003[3]，为盐酸 副玫瑰苯胺法和碘量法，两法的吸收液分别含汞和铅，毒性较大且易造成实验室污染，同时 测定方法对实验条件要求严格；经试验证实，上述方法对香菇中二氧化硫检测的结果并不 稳定，重现性不理想。离子色谱法分析食品中的so32-—直是研究的热点，离子交换-电导检 测法，干扰小、灵敏度高、稳定性好、操作简单、无污染，不存在电极“中毒”现象[4_9]。但是， 目前尚没有利用离子色谱测定香菇样品中的so32-含量的方法。全文中提及的参考文献具体如下[1]陈宝田，张萍.香菇化学成分及药理作用研究进展[J].中外健康文摘，2009， 8(5) 197-198.「21中国食品土畜讲出口商会食用菌分会.http://id. china-embassy, org.[3]中华人民共和国国家标准.GB/T5009. 34-2003食品中亚硫酸盐的测定[s].[4]邹月利.离子色谱法测定腌制大蒜中亚硫酸盐含量[J].食品工业科技，2006， 8 172-175.[5]符继红，解成喜，张丽静.离子色谱法测定麻黄中的无机阴离子[J].色谱， 2004,22(1) 72[6]史亚利，刘京生，蔡亚岐，牟世芬，温美娟.离子色谱法测定高氯、高钠油田回 注水中的阴、阳离子及有机酸[J].色谱，2004，22(6) 646[7]邱洪灯，胡云雁，刘霞，蒋生祥.离子液体在色谱中的应用[J].色谱.2007， 25(3) 293
[8]钟志雄，李功科.离子色谱法测定海产品中磷酸盐、焦磷酸盐、偏磷酸盐和总 磷.色谱[J]，2009，27 (4) =499-504.[9]霍军生，魏峰，孙静等.食物成分与食品添加剂分析方法[J].中国轻工业出版 社 2008,8 294-295.
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种结果准确、使用方便的香菇中二氧化硫含量 的检测方法。为了解决上述技术问题，本发明提供一种香菇中二氧化硫含量的检测方法，包括 以下步骤1)、标准溶液的配置称取无水亚硫酸钠1. 000g，加入0. 2mL质量浓度30 40%的甲醛溶液、2. OOmL摩 尔浓度9 llmM的NaOH溶液和10. OmL去离子水，然后再用去离子水定容至1000. OOmL,作 为SO:的标准储备液；将标准储备液配制成阶梯浓度的标准溶液，过滤后，采用离子色谱进样，根据浓度 和出峰面积绘制标准曲线；离子色谱条件为分离柱IonPacASll-HC4X250mm ；保护柱IonPacASll_HC 4X50mm ；ASRS_4mm 自动再生抑制器，抑制电流44. 00mA ；电导检测器；淋洗液K0H溶液，K0H溶液的浓度14 16mM ；流速0. 9 1. lmL/min,柱温 28 32°C ；进样量 23 27 y L ；2)、样品处理①、以干香菇作为样品，在0. 5g干香菇中，加入0. lmL质量浓度30 40%的甲醛 溶液、1. OmL摩尔浓度9 llmM的NaOH溶液和18 22mL去离子水；然后再加入0. 9 1. lmL无水乙醇后，振荡混勻；②、将步骤①所得产物先进行超声处理；然后再静置；③、将步骤②所得产物离心，得离心液和沉淀；④、将步骤③的离心液过滤，得上清液；⑤、将上清液用去离子水定容至40 60mL，过滤后，得进样液，采用离子色谱进 样，离子色谱条件同步骤1)；将与步骤1)相同出峰时间下所得的出峰面积代入步骤1)所得的标准曲线中，得 进样液二氧化硫含量c ；3)、获得香菇中二氧化硫含量 X 香菇中二氧化硫含量，mg/kg ；c 根据标准曲线对应得出的进样液二氧化硫含量，mg/L ；v 步骤2)⑤中的定容体积，mL ；m 步骤2)①中干香菇的用量，g。作为本发明的香菇中二氧化硫含量的检测方法的改进步骤2)样品处理中，将步骤③离心所得的沉淀重复一次步骤① 步骤③的提取，得重提离心液；将步骤③所得离心 液和所述重提离心液混合后一起过滤，得上清液。作为本发明的香菇中二氧化硫含量的检测方法的进一步改进步骤1)中阶梯浓 度的标准溶液的制备方法如下分别将0. 5mL、l. OmLU. 5mL、2. 0mL、2. 5mL、3. 0mL、4. OmL 的标准储备液用去离子 水定容至100. OOmL，得阶梯浓度的标准溶液。作为本发明的香菇中二氧化硫含量的检测方法的进一步改进将阶梯浓度的标准 溶液采用0. 22微米滤膜进行过滤后，采用离子色谱进样，以标准品的出峰时间和峰面积对 应确认样品的进样液的二氧化硫含量。作为本发明的香菇中二氧化硫含量的检测方法的进一步改进步骤2)的样品处 理中步骤②超声处理时间为18 22分钟，静置时间为4 6小时；步骤③的离心条件为4800g，30分钟；步骤⑤的过滤为采用0. 22微米滤膜进行过滤。本发明的发明思路和内容具体如下1材料与方法1. 1仪器与试剂无水Na2S03(分析纯，成都科龙试剂厂，97. 5% )；去离子水的电阻率为18. 2MQ. cm(25°C )。甲醛(分析纯，37% 40% )，甘露醇(分析纯，阿拉丁试剂公司)，NaOH (分析纯， 天津市大陆化学试剂厂)；DI0NEXDX IC-3000离子色谱仪(美国戴安公司，美国)；低速台式离心机-TDL-60B (飞鸽牌，上海安亭设备公司)香菇样品浙江省庆元县食用菌科学技术研究中心提供1. 2色谱条件分离柱IonPacASll-HC4X250mm ；保护柱IonPacASll_HC 4X50mm ；ASRS_4mm 自动再生抑制器，抑制电流44. 00mA ；电导检测器；淋洗液K0H ；淋洗液浓度15mM ；流速 1. OmL/min,柱温 30 °C ；进样量 25 u L1. 3标准溶液的配置精确称取无水亚硫酸钠1. 000g,加入0. 2mL 37% (质量浓度)甲醛溶液，2. OOmL lOmMNaOH溶液，10. OmL去离子水，然后去离子水定容至1000. OOmL,作为S032_的标准储备 液。准确分别移取标准储备液0. 5mL、l. 0mL、l. 5mL、2. OmL,2. 5mL、3. OmL,4. OmL,分别 去离子水定容至 100. OOmL,相当于 5mg/L，10mg/L, 15mg/L, 20mg/L, 25mg/L, 30mg/L, 40mg/ L。过0. 22微米滤膜，离子色谱进样25 y L，绘制标准曲线。1.4样品处理方法称取0.5g干香菇样品，在50. OmL的离心管里+0. lmL 37% (质量浓度)甲醛溶液 +1. OmLlOmM NaOH溶液+20mL去离子水一加入lmL无水乙醇后振荡混勻一超声一静置一离 心4800g，30分钟一重复提取一次一过滤，得上清液一去离子水定容至50. OmL — 0. 22微米滤膜一离子色谱进样25PL
用于无机阴离子和有机酸阴离子分析，适合大体积进样测定痕量阴离子，本发明分别以 IonPacASll-HC 4X250mm ^P IonPacAS19_HC 4X250mm 分离柱进行了亚硫酸根的分离实 验，结果发现同样浓度的标样的分离度均能大于1.5，其中IonPacASll-HC 4X250mm分离 柱的响应值更高，所以，本发明以此柱作为香菇中S032—检测的首选色谱柱(图1)。图1的上图是标准品的色谱图，其中S032_的出峰时间为15. 063min ；图1的下图 为香菇样品的色谱图，其中S032-的出峰时间为14. 903min，在15分钟出峰判定为是S032_。 横坐标为出峰时间，纵坐标是样品各组分的电导检测响应值。0. 5mL、l. OmLU. 5mL、2. OmL、 2. 5mL、3. OmL,4. OmL这7个不同浓度的出峰时间没有差异。2)、已有研究证明，分离柱温度对分离度具有一定影响[8]，并且温度越高柱效越 高，分离效果越好，本发明进行了 20°C、25°C、3(TC、35°C的温度差异对柱效影响研究，结果 发现30°C时，S032_与S042_的分离效果最好，峰型对称性好。3)、本发明以K0H溶液作为淋洗液，淋洗液的浓度以10mM、15mM、20mM、25mM、30mM、 40mM进行分离，结果发现淋洗液浓度在15mM以上对分离效果和峰型并无显著影响，本发明 确定淋洗液浓度为15mM。4)、试验结果证明，过低的流速使出峰时间延长，不利于样品的及时处理，流速设 在1. 3mL/min时，柱压接近2800Psi。而柱压高对柱子的寿命影响会产生明显，所以，本发明 选择1. OmL/min的流速，柱压为1700Psi左右，能够满足分离要求。2. 2样品处理条件的优化研究亚硫酸盐不稳定，其水溶液极易水解、氧化。香菇中二氧化硫含量多少取决于香菇 的亚硫酸根含量的多少，利用蒸馏等样品前处理条件，不能保证样品中二氧化硫全部准确 蒸出，同时，由于温度升高，有可能使香菇中发香基团的巯基转化为亚硫酸根而影响测定准 确性。所以，本发明针对可能影响测定准确性的多个因素进行了研究。2. 2. 1稳定剂的选择亚硫酸根在中性或碱性溶液中相对稳定，在碱性环境下，结合型亚硫酸盐会释放 出来[3]，所以本发明以加入NaOH溶液作为S032_的提取剂。分别以甲醛(37%), Vc(lg/L) 和甘露醇(>98%)做为可选择的S032—稳定剂，防止S032—在提取过程中的氧化。以同一 干香菇样品按1. 4的样品处理步骤进行提取和色谱测定，结果如图2。
1.5结果计算方法
X 香菇中二氧化硫含量，mg/kg ； C 标准曲线对应得出的进样液二氧化硫含量，P g/mL ； V:样品最终定容体积，mL; m 样品称样量，g ；
0. 508 每克亚硫酸钠相当于二氧化硫的量；
2.结果与讨论
2. 1色谱条件的优化
1)、IonPac AS11-HC为高容量阴离子交换分离柱，用NaOH或K0H做淋洗液，
试验结果说明，甲醛作为稳定剂，加入量在对测定结果影响不大，试验处理间的误 差小而稳定。Ve和甘露醇作为稳定剂，实验误差相对较大，测定数据稳定性较甲醛差。所以， 选定甲醛作为样品处理稳定剂较适宜。2. 2. 2乙醇加入量沉淀多糖，对SO:检测效果的影响香菇中具有一定量的蛋白质、多糖、多肽等组分存在，其中由于溶液为碱性，蛋白 质以溶解状态存在，若与目标物进入分离柱，对柱效会有损伤，本发明以乙醇作为蛋白和多 糖的沉淀剂，在样品前处理时分别加入乙醇lmL、2mL、3mL、4mL、5mL，试验结果发现，乙醇加 入量对测定结果无影响，但样品更清澈，而且容易过滤膜，本发明选定乙醇的加入量为lmL。2. 2. 3Na0H加入量对SO:检测效果的影响对同一样品，研究了不同的NaOH溶液加入量(0. 5mL、1. OmL、1. 5mL、2. OmL、 2. 5mL)，对SO:检测效果的影响，结果证明，在NaOH溶液(摩尔浓度10mM)加入量为1. OmL 时，S032_的检出值最大，而NaOH加入量继续增加并不能继续提高S032_的检出量。2. 2. 4样品超声时间对SO:检测效果的影响本发明对同一样品，分别采用了同一超声频率40KHZ不同的超声时间(lOmin、 20min、30min、40min)，分析超声时间对检测效果的影响，结果证明，在超声20分钟时， S032—的检出值最大，而时间继续延长，检出值变低，说明随着超声时间增长，浸提出的 S032_可能因超声加热而挥发或者转化。本发明确定以20分钟超声时间为宜。2. 2. 5样品静置时间的选择法规中一般规定，食品中的亚硫酸盐分为游离型和结合型[9]。对于香菇中亚硫酸 盐(二氧化硫)的超标，具体是指游离型超标还是总亚硫酸盐超标，在已有的检测方法中没 有明确的表述。本发明认为，香菇中亚硫酸盐游离型和结合型可能具有相互转化性，以总亚 硫酸盐含量为指标更为确切。本发明以加入NaOH和甲醛的溶液作为提取液，目的是最大限 度的提取出香菇样品中的总亚硫酸盐，使所得数据最具代表性。而提取静置时间是重要因 素之一。本研究分别将香菇样品静置0. 5h、l. Oh,2. Oh,3. Oh,4. Oh,5. Oh,6. Oh,结果静置5 小时，检测得出的亚硫酸盐含量最高(图3)，6小时结果与5小时无显著差异。2. 2. 6标准溶液存放天数及方法稳定性研究按1. 3配制标准溶液，分别在第1天、第3天、第5天检测同一批标准溶液，比较 标准曲线方程的变化和测量准确度。结果(表1)显示，在第1天和第3天，标准曲线R2 = 0.999，说明方程回归系数很好，第5天，回归系数有所降低。以10mg/L进行单点验证，结果 3次检测结果与真值吻合，与真值的相对相差为2. 73%。出峰时间比较，第1天和第3天出 峰时间稳定在15分钟，第五天出峰时间为14. 88分钟，出现前移现象。所以，研究证明配制 好的标准溶液，在3天内使用能够保准准确有效。表1标准溶液贮存稳定性Table 1 the stability of standard solution 2. 2. 7方法检出限根据仪器的3倍噪声计算，得出此操作条件下，离子色谱仪对香菇样品处理液的 最低检出限为0. 0486mg/L。2. 28回收率和精密度试验采用本发明的方法对同一香菇样品，依据优化出的检测条件，分别对样品加标高、 中、低3个浓度，每个浓度3个重复，计算回收率和同一浓度的相对相差RSD值，结果见表 2。得出本发明的方法对香菇样品的加标回收率从低浓度到高浓度为86. 0% 94. 6%，检 测结果间的RSD值1. 2% 2. 3%。表2回收率和精密度试验结果Table 2.The results of recovery and RSD 根据表2，我们可以得出以下结论本发明的方法具有满意的回收率，样品重复性 较好。综上所述，本发明建立了基于离子色谱的香菇中so32-检测方法，试验选定了离子 色谱条件，优化得出了样品前处理条件。离子色谱仪对香菇样品处理液的最低检出限为 0. 0486mg/L，对香菇样品的加标回收率从低浓度到高浓度为86. 0% 94. 6%，检测结果间 的RSD值1. 2% 2. 3%。通过方法间比对和验证，说明本方法所得结果为香菇样品中总亚 硫酸盐(以二氧化硫计)含量，香菇与其他蘑菇相比具有品种特异性，其中的二氧化硫含量 限量标准依据香菇自身特点继续进行研究具有必要性。
下面结合附图对本发明的具体实施方式
作进一步详细说明。图1是20 ii g/mL亚硫酸盐标准品与样品出峰时间对比的离子色谱图；图1中上图是标准品的色谱图，下图为香菇样品的色谱图；图2是不同稳定剂对香菇中S032_(以二氧化硫计)测定结果的影响对比图；图3是静置时间对香菇中S032_(以二氧化硫计)测定结果的影响对比图；图4是标准曲线9
图5是实验1的香菇样品检测色谱图；图6是实验2的香菇样品检测色谱图；图7是实验3的香菇样品检测色谱图。图8是实验4的香菇样品检测色谱图。
具体实施例方式实施例1、一种香菇中二氧化硫含量的检测方法，依次进行以下步骤1)、标准溶液的配置称取无水亚硫酸钠1. 000g，加入0. 2mL质量浓度37%的甲醛溶液、2. OOmL摩尔浓 度10mM的NaOH溶液和10. OmL去离子水，然后再用去离子水定容至1000. OOmL,作为S0:的 标准储备液；分别准确移取标准储备液0. 5mL、l. 0mL、l. 5mL、2. OmL,2. 5mL、3. OmL,4. OmL,分别 用去离子水定容至100. 00mL，得阶梯浓度的标准溶液；相当于无水亚硫酸钠的浓度分别为 5u g/mL,10u g/mL,15u g/mL,20u g/mL,25u g/mL,30u g/mL,40u g/mL。将上述阶梯浓度的标准溶液分别进行如下操作采用0. 22微米滤膜进行过滤后，采用离子色谱进样，离子色谱条件为分离柱IonPacASll-HC4X250mm ；保护柱IonPacASll_HC 4X50mm ；ASRS_4mm 自动再生抑制器，抑制电流44. 00mA ；电导检测器；淋洗液K0H溶液；K0H溶液的浓度 15mM ；流速1. OmL/min，柱温 30°C ；进样量 25 y L ；以上述7种标准溶液的浓度为横坐标，以该标准品对应得峰面积为纵坐标，绘制 标准曲线，得出标准曲线的方程为Y = 0. 0659X+0. 0662，R2 = 0. 9998 ；该曲线如图4所示。2)、样品处理:①、称取0.5g干香菇样品放入50. OmL的离心管里，然后加入0. lmL质量浓度37% 的甲醛溶液、1. OmL摩尔浓度10mM的NaOH溶液和20mL去离子水；接着再加入lmL无水乙 醇后，振荡混勻；②、将步骤①所得产物先进行于40KHZ频率下超声处理20分钟；然后再静置5小 时；③、将步骤②所得产物离心(4800g，30分钟)，得离心液和沉淀；④、将步骤③离心所得的沉淀进行重新提取，S卩，以步骤③离心所得的沉淀替代 0. 5g干香菇样品，重复进行一次步骤① 步骤③提取，得重提离心液；将上述重提离心液和步骤③所得的离心液混合后一起过滤，得上清液。⑤、将上清液用去离子水定容至50mL，0. 22微米滤膜过滤后，采用离子色谱进样， 离子色谱条件同步骤1)；与标准品出峰时间对照，记录样品峰面积，并将该出峰面积代入步骤1)所得的标 准曲线(如图4所述)中，得进样液二氧化硫含量c;3)、获得香菇中二氧化硫含量
r n w /7、 cxvx0.508x1000 X 香菇中二氧化硫含量，mg/kg ；
c 根据标准曲线对应得出的进样液二氧化硫含量，P g/mL ；v 步骤2)⑤中的定容体积，即50mL ；m 步骤2)①中干香菇的用量，即0. 5g。0. 509 每克亚硫酸钠相当于二氧化硫的量。实验1、以市售浙江产干香菇作为香菇样品，按照实施例1的方法进行检测， 其S032—峰面积为0. 7983 ；然后代入图4所述的标准曲线，得进样液二氧化硫含量C = 11. 11 u g/mL ；根据 因此，X = (11. 11X50X0. 508X 1000)/(0. 5X 1000) = 565. 4mg/Kg。对比实验1 以同一香菇样品，采用GB/T5009. 34-2003中蒸馏法进行检测，结果为 54. lmg/Kg。再将国标蒸馏法后的样品残渣液浓缩后低温干燥后，利用本实施例1的方法进 行检测，得出结果为497. 6mg/Kg。54. lmg/Kg+497. 6mg/Kg = 551. 7mg/Kg,即残渣与蒸馏法 的检测结果之和达到本发明的离子色谱法结果的97. 6%，说明本发明的离子色谱法为检测 香菇中的总亚硫酸根含量。因为亚硫酸与香菇中本身含有的醛、酮和糖以及前处理加入的 甲醛等相结合，形成结合型亚硫酸。本法加入NaOH的目的是将结合型二氧化硫释放出来， 并在前处理溶液中稳定存在，以便于检测。而GB/T5009. 34-2003中蒸馏法原理是直接进行 酸化并加热蒸馏，以乙酸铅吸收二氧化硫，再碘标准溶液滴定。样品前处理过程的差异和检 测结果说明离子色谱法的结果为香菇中总亚硫酸根含量。实验2、以上海出产的干香菇作为香菇样品，其余同实验1，其出峰面积为0. 7727 ； 然后代入图4所述的标准曲线，得进样液二氧化硫含量c = 10. 72 u g/mL；根据 因此，X= (10. 72 X 50 X 0. 508 X 1000) / (0. 5 X 1000) = 544. 58mg/Kg。对比实验2:以上海出产的干香菇作为香菇样品，其余同对比实验1，蒸馏法和残 渣与的检测结果分别为47. 86mg/Kg和490. 7lmg/Kg0实验3、以上海出产的干香菇作为香菇样品，其余同实验1，其出峰面积为0.3471 ； 然后代入图4所述的标准曲线，得进样液二氧化硫含量c = 4. 26 u g/mL； 因此，X= (4. 26 X 50 X 0. 508 X 1000) / (0. 5 X 1000) = 108. 2mg/Kg。对比实验3:以上海出产的干香菇作为香菇样品，其余同对比实验1，蒸馏法和残 渣与的检测结果分别为29. 46mg/Kg和75. 42mg/Kg。实验4、以四川出产的干香菇作为香菇样品，其余同实验1，其出峰面积为0.8698 ； 然后代入图4所述的标准曲线，得进样液二氧化硫含量c = 12. 19 u g/mL；根据 因此，X= (12. 19 X 50 X 0. 508 X 1000) / (0. 5 X 1000) = 619. 25mg/Kg。对比实验4:以四川出产的干香菇作为香菇样品，其余同对比实验1，蒸馏法和残 渣与的检测结果分别为35. 87mg/Kg和572. 4lmg/Kg0
最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发 明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容 直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。
权利要求
一种香菇中二氧化硫含量的检测方法，其特征是包括以下步骤1)、标准溶液的配置称取无水亚硫酸钠1.000g，加入0.2mL质量浓度30～40％的甲醛溶液、2.00mL摩尔浓度9～11mM的NaOH溶液和10.0mL去离子水，然后再用去离子水定容至1000.00mL，作为SO32-的标准储备液；将标准储备液配制成阶梯浓度的标准溶液，过滤后，采用离子色谱进样，根据浓度和出峰面积绘制标准曲线；离子色谱条件为分离柱IonPacAS11-HC 4×250mm；保护柱IonPacAS11-HC 4×50mm；ASRS_4mm自动再生抑制器，抑制电流44.00mA；电导检测器；淋洗液KOH溶液，KOH溶液的浓度14～16mM；流速0.9～1.1mL/min，柱温28～32℃；进样量23～27μL；2)、样品处理①、以干香菇作为样品，在0.5g干香菇中，加入0.1mL质量浓度30～40％的甲醛溶液、1.0mL摩尔浓度9～11mM的NaOH溶液和18～22mL去离子水；然后再加入0.9～1.1mL无水乙醇后，振荡混匀；②、将步骤①所得产物先进行超声处理；然后再静置；③、将步骤②所得产物离心，得离心液和沉淀；④、将步骤③的离心液过滤，得上清液；⑤、将上清液用去离子水定容至40～60mL，过滤后，得进样液，采用离子色谱进样，离子色谱条件同步骤1)；将与步骤1)相同出峰时间下所得的出峰面积代入步骤1)所得的标准曲线中，得进样液二氧化硫含量c；3)、获得香菇中二氧化硫含量 <mrow><mi>X</mi><mrow> <mo>(</mo> <mi>mg</mi> <mo>/</mo> <mi>kg</mi> <mo>)</mo></mrow><mo>=</mo><mfrac> <mrow><mi>c</mi><mo>×</mo><mi>v</mi><mo>×</mo><mn>0.508</mn><mo>×</mo><mn>1000</mn> </mrow> <mrow><mi>m</mi><mo>×</mo><mn>1000</mn> </mrow></mfrac> </mrow>X香菇中二氧化硫含量，mg/kg；c根据标准曲线对应得出的进样液二氧化硫含量，mg/L；v步骤2)⑤中的定容体积，mL；m步骤2)①中干香菇的用量，g。
2.根据权利要求1所述的香菇中二氧化硫含量的检测方法，其特征是所述步骤2)样 品处理中，将步骤③离心所得的沉淀重复一次步骤① 步骤③的提取，得重提离心液；将步 骤③所得离心液和所述重提离心液混合后一起过滤，得上清液。
3.根据权利要求1或2所述的香菇中二氧化硫含量的检测方法，其特征是所述步骤 1)中阶梯浓度的标准溶液的制备方法如下分别将0. 5mL、l. 0mL、l. 5mL、2. OmL,2. 5mL、3. OmL,4. OmL的标准储备液用去离子水定 容至100. 00mL，得阶梯浓度的标准溶液。
4.根据权利要求3所述的香菇中二氧化硫含量的检测方法，其特征是将所述阶梯浓 度的标准溶液采用0. 22微米滤膜进行过滤后，采用离子色谱进样，以标准品的出峰时间和 峰面积对应确认样品的进样液的二氧化硫含量。
5.根据权利要求4所述的香菇中二氧化硫含量的检测方法，其特征是所述步骤2)的 样品处理中步骤②超声处理时间为18 22分钟，静置时间为4 6小时； 步骤③的离心条件为4800g，30分钟； 步骤⑤的过滤为采用0. 22微米滤膜进行过滤。
全文摘要
本发明公开了一种香菇中二氧化硫含量的检测方法，包括以下步骤1)标准溶液的配置以无水亚硫酸钠、甲醛溶液、NaOH溶液和去离子水制成标准储备液；再将标准储备液配制成阶梯浓度的标准溶液，过滤后，采用离子色谱进样，根据浓度和出峰面积绘制标准曲线；2)样品处理将干香菇作为样品，将其所得的上清液采用离子色谱进样，将与步骤1)相同出峰时间下所得的出峰面积代入步骤1)所得的标准曲线中，得进样液二氧化硫含量c；3)获得香菇中二氧化硫含量采用本发明方法检测香菇中的二氧化硫含量，具有结果准确、使用方便的特点。
文档编号G01N30/06GK101852786SQ201010202879
公开日2010年10月6日 申请日期2010年6月17日 优先权日2010年6月17日
发明者吴应淼, 张玉, 徐丽红, 王伟, 王建清, 黎天天 申请人:浙江省农业科学院