.31 %，0.88mg/g、1.83 %，7.10mg/g、0.47 %，1.58mg/g、0.68 %，0.91mg/g、 0· 50%〇
[0072] 实施例7稳定性试验
[0073] 取同一批FKIV号颗粒（140901批次），按实施例1供试品制备方法制备供试品溶 液，按实施例1色谱条件分别于0、170min、340min、680min、1700min、34h进样测定，计算各 指标成分的峰面积的RSD值，结果：没食子酸1. 88%、丹参素钠1. 23%、绿原酸1. 54%、芍 药苷1.52%、虎杖苷1.84%、苯甲酸1.71%、丹酚酸B0.53%、大黄素1.24%、大黄素甲醚 0. 33%，说明供试品溶液中各指标成分在34h内稳定。
[0074] 实施例8加样回收试验
[0075] 取已知含量的同一批FKIV号颗粒（140901批次）0. 25g，3份，精密称定， 置于50mL容量瓶中，分别加入混合对照品溶液（没食子酸344. 31μg·mL1、丹参 素钠 627. 86μg·mL\ 绿原酸 246. 32μg·mL\ 芍药苷 1136. 52μg·mL\ 虎杖 苷 807. 95μg·mL\ 苯甲酸 227. 13μg·mL\ 丹酚酸B1778. 11μg·mL\ 大黄素 396. 73yg.mL\大黄素甲醚 227. 71yg.mL30. 8mL、l. 0mL、l. 2mL，各平行 3 份，加 70% 的 甲醇定容，按实施例1供试品制备方法制备供试品溶液，进样，测定，计算回收率与RSD值。
[0076] 结果显示：没食子酸回收率100. 15%、RSD值1.39%，丹参素钠回收率99. 89%、 RSD值1. 71 %，绿原酸回收率99. 92 %、RSD值0. 67 %，芍药苷回收率99. 28 %、RSD值 0. 60 %，虎杖苷回收率99. 89 %、RSD值0. 80 %，苯甲酸回收率99. 72 %、RSD值1. 83 %，丹 酚酸B回收率99.91%、RSD值0.79%，大黄素回收率100.06%、RSD值0.94%，大黄素甲 醚回收率99.97%、RSD值1.36%。可见，本发明提供的检测方法加样回收率在99. 28%~ 100. 15%之间（RSD〈1.83% )。
[0077] 实施例9样品含量测定
[0078] 取3批FKIV号颗粒，按实施例1供试品溶液制备方法制备样品溶液，按实施例1 色谱条件进样，测定，结果见表3。
[0079] 表3样品含量测定结果（η= 2)
[0080]
[0081] 实施例10指纹图谱的建立
[0082] 1、精密度试验
[0083] 取同一批FKIV号颗粒（140901批次），按照实施例1方法制备供试品溶液，按实 施例1色谱条件连续进样6次，记录色谱图，结果表明，各色谱峰相对保留时间的RSD在 0. 36~0. 77%之间，相对峰面积的RSD在0. 73~2. 84%之间，表明仪器精密度较好。
[0084] 2、重复性试验
[0085] 取同一批FKIV号颗粒（140901批次），按照实施例1方法制备供试品溶液6份， 按实施例1色谱条件进行测定，记录色谱图，结果表明，各色谱峰相对保留时间的RSD在 0. 15~0. 93%之间，相对峰面积的RSD在0. 82~2. 69%之间，表明该方法重复性较好。
[0086] 3、稳定性试验
[0087] 取同一批FK IV号颗粒（140901批次），按照实施例1方法制备供试品溶液，按实施 例1色谱条件分别在0、170min、340min、680min、1700min、34h进样测定，结果表明，各色谱 峰相对保留时间的RSD在0. 24~0. 91%之间，相对峰面积的RSD在0. 95~2. 60%之间， 表明供试品溶液在34h内稳定。
[0088] 4、指纹图谱的建立
[0089] 利用实施例1方法，测定15批FKIV号颗粒（批号分别为：140801，140901，140902， 140903,140915,140925,141001，141003,141005,141007,141015,141020,141111，141112， 141113)指纹图谱，叠加图谱见图3。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价2004A版》进行 分析，共标定22个共有峰，其中9个为已知峰（1-没食子酸，2-丹参素钠，4-绿原酸，8-芍 药苷，11-虎杖苷，12-苯甲酸，15-丹酚酸B，21-大黄素，22-大黄素甲醚），13个为未知 峰。以中位数法生成对照指纹图谱，15批FKIV号颗粒指纹图谱与对照指纹图谱的相似度分 别为 0· 977、0· 977、0· 976、0· 977、0· 992、0· 992、0· 992、0· 993、0· 992、0· 994、0· 994、0· 993、 0. 993、0. 993、0. 993,相似度均达0. 977以上。可见，15批FKIV号颗粒含量测定和指纹图谱 研究结果表明该制剂15批样品之间差异较小，批次之间质量较稳定性，本发明提供的方法 可用于FKIV号颗粒的质量控制。指纹图谱定量分析方法用于成分复杂的中药复方质量控 制，在监测指标性成分含量的同时，又对复方中的无效或未知成分进行了控制，对全面控制 中药复方制剂的质量具有指导意义。
[0090] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应 视为本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种FKIV号颗粒成分检测方法，其特征在于，取FKIV号颗粒供试品溶液以及标准品 溶液进行HPLC检测，所述HPLC检测的色谱条件为： 以乙腈为流动相A相、磷酸水溶液为流动相B相，梯度洗脱程序为：0~16min，5 % A - 14% A ;16~20min，14% A - 17% A ;20~35min，17% A - 19% A ;35~60min，19% A - 35 % A ;60~62min，35 % A - 75 % A ;62~75min，75 % A;根据HPLC检测结果，获得 FK IV号颗粒成分及其含量。2. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述HPLC检测的波长为228~ 232nm〇3. 根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述HPLC检测的波长为230nm。4. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述磷酸水溶液的体积百分含量为 0· 05%~0· 15%〇5. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述HPLC检测的流动相流速为 0· 8~L2mL/min〇6. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述HPLC检测的柱温20°C~35°C。7. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述HPLC检测的色谱柱为C18色谱 柱或苯基柱。8. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述标准品为没食子酸、丹参素钠、 绿原酸、芍药苷、虎杖苷、苯甲酸、丹酚酸B、大黄素或大黄素甲醚中的一种或两者以上的混 合物。9. 根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述FKIV号颗粒供试品溶液的制备 方法为：取FKIV号颗粒与甲醇水溶液混合，超声提取，冷却，甲醇水溶液补足减失质量，混 匀，过滤，取续滤液，离心，得到FKIV号颗粒供试品溶液。10. 如权利要求1至9中任一项所述的检测方法在构建FKIV号颗粒指纹图谱中的应 用。
【专利摘要】本发明涉及分析化学领域，特别涉及一种FKⅣ号颗粒成分检测方法。该检测方法包括：取FKⅣ号颗粒供试品溶液以及标准品溶液进行HPLC检测，HPLC检测的色谱条件为：以乙腈为流动相A相、磷酸水溶液为流动相B相，根据HPLC检测结果，获得FKⅣ号颗粒成分及其含量。本发明提供的检测方法具有良好的精密度、线性关系、稳定性、重复性，回收率高，耐用性良好，为FKⅣ号颗粒的质量控制提供依据。
【IPC分类】G01N30/02
【公开号】CN105424833
【申请号】CN201510819417
【发明人】萧伟, 孙仙玲, 季园, 秦建平, 吴云, 孙永成, 丁岗, 王振中, 周习
【申请人】江苏康缘药业股份有限公司
【公开日】2016年3月23日
【申请日】2015年11月23日