同时检测聚维酮k30中2-吡咯烷酮和甲酸方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及同时检测2-吡咯烷酮和甲酸的方法，尤其是同时检测聚维酮K30中2-吡咯烷酮和甲酸的方法。
【背景技术】
[0002] 根据《中华人民共和国药典》2015年版四部可知，聚维酮K30的质量标准只有对N-乙烯基吡咯烷酮的限度进行滴定检测，滴定检测法所受主观因素影响太大，使精确度受到 很大的影响。另外标准中缺乏2-吡咯烷酮含量限定的检测项目，导致其对聚维酮K30的质量 控制不够全面和准确，从而成隐患。
[0003] 根据美国药典，聚维酮K30的质量标准中要求检测的杂质有、N-乙烯基吡咯烷酮、 2_吡咯烷酮、甲酸，醛，过氧化物，前三种杂质要求使用液相来检测，检测项目繁多，不利于 进行大量样品检测。
【发明内容】
[0004] 为了克服现有检测技术的不足，本发明的目的在于提供一种同时检测聚维酮K30 中2-吡咯烷酮和甲酸，该方法能准确有效的控制聚维酮K30的质量，从而确保用药安全性。
[0005] 为了实现上述的发明目的，本发明提供以下技术方案：
[0006] 同时检测聚维酮K30中2-吡咯烷酮和甲酸，该方法是利用液相色谱法对2-吡咯烷 酮和甲酸的含量进行测定，操作步骤如下：
[0007] 色谱条件：
[0008] a、十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱；
[0009] b、以体积比95:5的磷酸氢二钾溶液-乙腈为流动相，所述磷酸氢二钾溶液浓度为 0.01mol/L，所述pH值为3.0;
[0010]c、检测波长为210nm;
[0011] 对照品溶液制备：取2-吡咯烷酮对照品加水制成第一对照品溶液，取甲酸对照品 加水制成第二对照品，将第一对照液和第二对照液混合，制得对照品溶液；
[0012] 供试品溶液的制备:取聚维酮K30加水制成供试品溶液；
[0013] 测定法:分别吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪进行测定。
[0014] 优选的是:所述对照品溶液及供试品溶液制备的具体过程如下：
[0015] 对照品溶液制备:取2-吡咯烷酮对照品加水制成25ug/ml的溶液，作为第一对照品 溶液，取甲酸对照品加水制成25ug/ml的溶液作为第二对照品，将第一对照液和第二对照液 按1:1体积比混合，制得对照品溶液；
[0016] 供试品溶液的制备:取聚维酮K30加水制成5mg/ml的溶液作为供试品溶液。
[0017]优选的是:所述测定法中对照品溶液和供试品溶液进样量均为20μ1。
[0018]本发明利用液相色谱法对2-吡咯烷酮和甲酸进行检测，该检测方法准确度高、线 性范围广、专属性强、精密度与重复性均良好、灵敏度高，可以作为同时检测2-吡咯烷酮和 甲酸含量限度控制依据。可以更好的控制聚维酮K30质量，可以有效的监督生产，保证产品 质量的稳定，患者用药的安全性。
【附图说明】
[0019]图l:2.576、6.44、12.88、25.76、64.4、128.8、193.2、257.6ug/ml的2-吡咯烷酮溶 液系列浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标绘制的线性回归图。
【具体实施方式】
[0020] 下面进一步描述本发明的技术方案，但要求保护的范围并不局限于所述。下面结 合具体实施例，对本发明作进一步详细的阐述，但本发明的实施方式并不局限于实施例表 示的范围。这些实施例仅用于说明本发明，而非用于限制本发明的范围。此外，在阅读本发 明的内容后，本领域的技术人员可以对本发明作各种修改，这些等价变化同样落于本发明 所附权利要求书所限定的范围。
[0021] 以下实施例及考察性试验中对照品均由中国药品生物制品检定所提供。
[0022]所述的液相色谱法按照中国药典2010年版一部附录液相色谱法进行。
[0023] 实施例
[0024]对照品溶液制备:取2-吡咯烷酮对照品加水制成25ug/ml的溶液，作为第一对照品 溶液，取甲酸对照品加水制成25ug/ml的溶液作为第二对照品，将第一对照液和第二对照液 按1:1体积比混合，制得对照品溶液；
[0025]供试品溶液的制备:取聚维酮K30加水制成5mg/ml的溶液作为供试品溶液。
[0026] 色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充柱，以体积比95:5的磷酸氢二钾 溶液-乙腈为流动相，所述磷酸氢二钾溶液浓度为0.01m〇l/L，所述pH用磷酸调节至3.0,设 定检测波长为210nm。分别吸取对照品溶液和供试品溶液20μ1，注入液相色谱仪进行测定。
[0027]利用液相色谱法同时检测聚维酮Κ30中2-吡咯烷酮和甲酸的方法可行性考察试验 如下：
[0028]根据美国药典，2-吡咯烷酮检测方法为：
[0029]取2-吡咯烷酮对照品适量，精密称定，加水溶解并稀释为25ug/ml的溶液，作为对 照溶液。取本品适量，精密称定，加水溶解并稀释为5mg/ml的溶液，作为供试品溶液。照高效 液相色谱法(通则0512)测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以水-乙腈-甲醇为流动 相(90:5:5)，检测波长为205nm。
[0030] 系统适用性试验:精密量取对照溶液25ul，注入液相色谱仪，六次峰面积的相对标 准偏差不得过2.0%。
[0031] 检测法:精密量取对照品溶液和供试品溶液各20ul，分别注入液相色谱仪，记录色 谱图，按外标法峰面积计算，不得过〇. 5%。
[0032]甲酸检测方法为：
[0033]取甲酸对照品适量，精密称定，加水溶解并稀释为25ug/ml的溶液作为对照溶液； 称取本品〇 . 50g，精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶 液。照高效液相色谱法(通则0512)测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸氢二钾 溶液(0.01m〇l/L)-乙腈(95:5.用磷酸调节pH值至3.0)为流动相，检测波长为210nm。精密量 取对照品溶液和供试品溶液各20ul，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积 计算，不得过0.5%。
[0034] -、根据美国药典对2-吡咯烷酮和甲酸检测方法，进行如下专属性和耐用性试验。
[0035] 1、专属性
[0036]精密量取25 · 76ug/ml的2-吡咯烷酮对照液、27 · 34ug/ml的甲酸对照液、25 · 76ug/ ml 2-吡咯烷酮供和27.34ug/ml甲酸的混合供试品溶液20ul在甲酸的液相条件下进样，保 留时间、峰面积、分离度、理论塔板数、拖尾因子分析结果见表1。
[0037]表1对照品及供试品色谱峰分析
[0038]
[0039]结果表明2-吡咯烷酮能够在甲酸的液相条件下出峰，并且与甲酸的分离度R>1.5。 故此方法专属性好。
[0040] 2、线性和范围
[0041 ]精密量取2.576、6.44、12.88、25.76、64.4、128.8、193.2、257.6ug/ml系列浓度的 2_吡咯烷酮溶液20ul，在甲酸的液相条件下分别进样，记录色谱图；以浓度和峰面积进行线 性回归，峰面积结果见表2。
[0042]表2峰面积「00431
[0044]以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标进行线性回归，回归方程为:y=18.91x+32.562 (R2=0.99956;纵坐标y为峰面积，横