血府逐瘀制剂挥发性成分的检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于柱色谱法领域，具体是一种血府逐瘀制剂挥发性成分的检测方法。
【背景技术】
[0002] 血府逐瘀方源自清代医家王清任的《医林改错》，是活血化瘀方中的经典名方，具 有活血祛瘀，行气止痛的功效。该方由柴胡、当归、地黄、赤芍、红花、炒桃仁、麸炒枳壳、甘 草、川芎、牛膝及桔梗十一味中药组成，主治气滞血瘀所致的胸痹、头痛日久、痛如针刺而有 定处、内热烦闷、心悸失眠、急躁易怒等。以血府逐瘀方为基础，采用现代制药工艺研究开发 了血府逐瘀胶囊、片剂等。血府逐瘀方中多味药材含有挥发性成分，如柴胡、当归、赤芍及川 芎等，但《中华人民共和国药典》2010版及相关研究中均未对挥发性成分进行检测分析。
【发明内容】
[0003] 本发明就是为了填补现有技术中检测血府逐瘀样品中挥发性物质的方法领域的 空白，所提出的一种血府逐瘀制剂挥发性成分的检测方法。
[0004] 本发明是按照以下技术方案实现的。
[0005] -种血府逐瘀制剂挥发性成分的检测方法，其特征在于：包括以下步骤： ① 供试品的制备：取血府逐瘀样品粉末l_3g，精密称定，置于顶空进样瓶中，备用； ② 采用顶空-气相色谱-质谱联用仪检测样品中的挥发性成分：分析条件如下： 顶空条件：顶空平衡时间：10-30min ;进样针温度60-90°C ;顶空震荡室加热温度： 60-95 0C ； 色谱条件：456GC气相色谱仪；30m X 0. 25mm X 0. 25 μπι色谱柱VF-5ms ;升温程序： 初始温度40°C，保持3min，以10°C /min升至280 °C，保持8min ;接口温度：280°C ;载气： He;流速：lmL/min;分流比：10 : 1;进样量：lmL;溶剂延迟：1.5min; 质谱条件：SCION TQ质谱仪；电离方式：EI ;能量：-70eV ;离子源温度：230°C ;四级杆 温度：220°C ;电子倍增器电压：14000V;全扫描模式，质量扫描范围：43-500amu，并获得原 始质谱数据； ③ 数据分析：根据步骤②获得的原始质谱数据，通过检索得到血府逐瘀样品中的挥发 性成分并计算各成分的相对百分含量。
[0006] 本发明获得了如下的有益效果：本发明填补现有技术中检测血府逐瘀样品中挥发 性物质的方法领域的空白。这样设计的本发明利用气相色谱-质谱联用仪的强大分离能力 和结构鉴定能力对血府逐瘀制剂中的挥发性成分进行分离和半定量分析，该方法具有样品 的分析时间短，分离效果好的优势，更好地控制了药品的质量，保证了临床用药的安全性和 有效性，具有广泛的应用前景。
【附图说明】
[0007] 图1是本发明血府逐瘀胶囊样品的总离子流图； 图2是本发明血府逐瘀片剂样品的总离子流图。
【具体实施方式】
[0008] 下面结合附图和【具体实施方式】对本发明做进一步的说明。
[0009] 实施例1 :血府逐瘀胶囊挥发性成分的分析 一、供试品制备 血府逐瘀胶囊(天津宏仁堂药业有限公司，12粒X 2板/盒，0.4 g/粒，生产批号： E03066)，除去胶囊壳，取样品粉末3g，精密称定，置于顶空进样瓶中，备用。
[0010] 二、顶空-气相色谱-质谱联用仪的分析 顶空条件：顶空平衡时间：30min ;进样针温度90°C ;顶空震荡室加热温度：95°C。
[0011] 色谱条件：456GC气相色谱仪(美国布鲁克公司），色谱柱VF-5ms (30m X 0· 25mm X 0. 25 μπι，美国安捷伦公司）；程序升温：初始温度40°C，保持3min，以10°C /min升温速 率升至280°C，保持8 min ;接口温度：280°C;载气：He (纯度>99. 999%);流速：lmL/min ;分 流比：10 : 1;进样量：lmL;溶剂延迟：1.5min。
[0012] 质谱条件：SCION TQ质谱仪(美国布鲁克公司），电离方式：EI ;能量：-70eV ;离子 源温度：230°C ;四级杆温度：220°C ;电子倍增器电压：14000V ;全扫描模式，质量扫描范围： 43-500amu〇
[0013] 三、数据处理及分析 采用顶空-气相色谱-质谱联用仪获得血府逐瘀胶囊挥发性成分的总离子流图（图1)， 并进一步采用NIST-?ο标准质谱库检索其挥发性成分，统计R、M匹配度均大于700的挥发 性成分，结果见表1。
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[0014] 本发明采用顶空-气相色谱-质谱联用技术（HS/GC-MS)对血府逐瘀胶囊中的挥 发性成分分析，共鉴定了 21个挥发性成分。
[0015] 从表1看出，血府逐瘀胶囊中挥发性成分主要是以乙酸（15. 03%)、苯甲醛 (13. 63%)、藁本内酯（12. 52%)、2_ 甲基丁醛（11. 10%)为主。
[0016] 实施例2 :血府逐瘀片中挥发性成分的分析 一、供试品的制备 血府逐瘀片（陕西海天制药有限公司，4X12片/板/盒，0.42g/片，生产批号： 140903)，取血府逐瘀片，粉碎，取样品粉末3g，精密称定，置于顶空进样瓶中，备用。标号： SXHT0
[0017] 血府逐瘀片(重庆希尔安药业有限公司，3X 12片/板/盒，0. 45g/片，生产批号： 150103)，取血府逐瘀片，粉碎，取样品粉末3g，精密称定，置于顶空进样瓶中，备用。标号： CQXEA0
[0018] 二、顶空-气相色谱-质谱联用仪的分析 顶空条件：顶空平衡时间：30min ;进样针温度：90°C ;顶空震荡室加热温度：95°C。
[0019] 色谱条件：456GC气相色谱仪(美国布鲁克公司）；色谱柱VF-5ms (30mX0. 25mmX0. 25μπι，美国安捷伦公司）;程序升温：色谱柱初始温度40°C，保持3min，以 10°C /min升温速率升至280°C，保持8min ;接口温度：280°C ;载气：He (纯度>99. 999%); 流速：lmL/min ;分流比：10:1 ;进样量：lmL ;溶剂延迟：1. 5min。
[0020] 质谱条件：SCION TQ质谱仪(美国布鲁克公司）；电离方式：EI ;能量：-70eV ;离子 源温度：230°C ;四级杆温度：220°C ;电子倍增器电压：14000V ;全扫描模式，质量扫描范围： 43-500amu〇
[0021] 三、数据处理及分析 采用顶空-气相色谱-质谱联用仪获得血府逐瘀片中挥发性成分的总离子流图（图2)， 并进一步采用NIST-10标准质谱库检索其挥发性成分，统计R、M匹配度均大于700的挥发 性成分，结果见表2。 CN 105181840 A 说明书 4/4 页
[0022] 本发明采用顶空-气相色谱-质谱联用技术（HS/GC-MS)分析血府逐瘀片中挥发 性成分，血府逐瘀片（SXHT)中共鉴定22个挥发性成分，血府逐瘀片（CQXEA)中共鉴定16个 挥发性成分。
[0023] 从表2看出，血府逐瘀片（SXHT)中的挥发性成分以巴豆醇（17. 23%)、3_甲基丁醛 (16. 11%)、三乙酸甘油酯（11. 47%)及2-甲基丁醛（10. 48%)为主；血府逐瘀片（CQXEA)中 挥发性成分以柠檬烯（28. 64%)、3_甲基丁醛（19. 67%)、藁本内酯（12. 71%)及2-甲基丁醛 (12. 28%)为主。
【主权项】
1. 一种血府逐瘀制剂挥发性成分的检测方法，其特征在于：包括以下步骤： ① 供试品的制备：取血府逐瘀样品粉末l_3g，精密称定，置于顶空进样瓶中，备用； ② 采用顶空-气相色谱-质谱联用仪检测样品中的挥发性成分：分析条件如下： 顶空条件：顶空平衡时间：10-30min;进样针温度60-90°C;顶空震荡室加热温度： 60-950C； 色谱条件：456GC气相色谱仪；30mX0. 25mmX0. 25ym色谱柱VF-5ms;升温程序： 初始温度40°C，保持3min，以10°C/min升至280°C，保持8min;接口温度：280°C;载气： He;流速：lmL/min;分流比：10 : 1;进样量：lmL;溶剂延迟：1.5min; 质谱条件：SCIONTQ质谱仪；电离方式：EI;能量：-70eV;离子源温度：230°C;四级杆 温度：220°C;电子倍增器电压：14000V;全扫描模式，质量扫描范围：43-500amu，并获得原 始质谱数据； ③ 数据分析：根据步骤②获得的原始质谱数据，通过检索得到血府逐瘀样品中的挥发 性成分并计算各成分的相对百分含量。2. 根据权利要求1所述的一种血府逐瘀制剂挥发性成分的检测方法，其特征在于：所 述血府逐瘀样品粉末为血府逐瘀胶囊内容的样品粉末或血府逐瘀片粉碎后的样品粉末。3. 根据权利要求1所述的一种血府逐瘀制剂挥发性成分的检测方法，其特征在于：步 骤②所获得的原始质谱数据采用NIST-10标准质谱库检索挥发性成分，并采用面积归一化 法对其中各成分的相对百分含量进行计算。
【专利摘要】本发明公开了一种血府逐瘀制剂挥发性成分的检测方法，属于柱色谱法领域。本发明采用顶空-气相色谱-质谱联用仪分析了血府逐瘀胶囊、血府逐瘀片中的挥发性成分。具体步骤如下①供试品的制备；②血府逐瘀制剂挥发性成分分析条件的优化及样品检测；③数据分析，采用NIST-10标准质谱库检索得到血府逐瘀胶囊、片剂中的挥发性成分并计算各成分的相对百分含量。本发明填补现有技术中检测血府逐瘀样品中挥发性物质方法领域的空白，方法简单、灵敏、快速，为血府逐瘀制剂挥发性成分的研究提供了基础，具有广泛的应用价值。
【IPC分类】G01N30/02
【公开号】CN105181840
【申请号】CN201510561786
【发明人】朱晓晶, 王跃飞, 杨欣莹, 于卉娟, 江振作, 杨帆
【申请人】天津宏仁堂药业有限公司
【公开日】2015年12月23日
【申请日】2015年9月7日