动浓缩仪(Caliper，USA);7890N气相色谱-5977C质 谱仪(Agilent，USA);增强型脂质去除产品（Enhanced Matrix Removal，EMR)购于美国安捷 伦科技有限公司。
[0023] 试剂 乙腈、丙酮、正己烧(HPLC级，Merke，Germany);无水硫酸镁、氯化钠为分析纯，均购自国 药集团化学试剂有限公司。
[0024] 标准物质:纯度98.0%，购自美国Sigma公司。
[0025]实施例1:猪肉中吡噻菌胺残留量的检测
[0026] (1)样品前处理
[0027] 提取 称取经充分混勾的5g猪肉样品于50mL离心管中，加入10mL水复苏30min后，准确加入 20mL乙腈溶液，振荡提取20min，超声提取5min，加入3g无水硫酸镁和2g氯化钠，祸旋lmin 后，7000r/min离心5min后，待净化。
[0028] 净化 加入4mL水于装有增强型脂质去除产品EMR的净化管中，涡旋使其充分活化，移取6mL样 品提取液于活化好的EMR净化管中，涡旋lmin后，7000r/min离心5min，转移全部上清液至装 有无水硫酸镁和氯化钠的离心管中进行盐析，涡旋离心后，移取lmL上清液，浓缩至干后，用 体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂溶解定容，过膜后，待气相色谱串联质谱(GC-MS/MS) 检测。
[0029] (2)标准工作溶液的配制 准确称取25 ± 0. lmg标准品于25mL容量瓶中，用乙腈溶解，定容得1000.0 yg/mL标准储 备液;移取l.OmL标准储备液置于100mL容量瓶中，用体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂 定容得到10.〇yg/mL标准中间液;将不含吡噻菌胺的猪肉空白样品按上述前处理步骤处理， 取8mL空白提取净化液，浓缩至干后，加入8mL体积比为1/1的丙酮/正己烷混合溶剂涡旋溶 解，用该溶液最终配制成1、2、5、10、20、50yg/L基质标准工作溶液。
[0030] (3)气相色谱串联质谱法(GC-MS/MS)测定 将不同浓度梯度的标准工作液分别注入GC-MS/MS，以外标法进行吡噻菌胺含量的定量 分析，即以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线;在相 同条件下将样品提取液注入GC-MS/MS进行测定，测得样品液中吡噻菌胺的色谱峰面积，代 入标准工作曲线，得到样品液中吡噻菌胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得 到样品中吡噻菌胺残留量。
[0031] 其中色谱条件为：
[0032] 色谱柱:HP-5MS毛细管色谱柱，柱长30m，内径0.25mm，膜厚0.25μπι。
[0033] 进样口温度:250.0°C，进样模式:不分流进样，进样量:lyL。
[0034] 载气:He，恒流模式，流速1.2mL/min。
[0035] 炉箱升温程序:初温60°C保持2min，以每分钟20°C的速度升至200°C，然后以每分 钟2°C的速度升至220°C，再以每分钟20°C的速度升至280°C，保持lOmin。
[0036] 传输线温度：290 °C。
[0037] 其中，质谱参数为：
[0038]电离模式：电子轰击电离，即EI模式，能量70eV。
[0039] 离子源温度:280 °C;碰撞气:氩气。
[0040]扫描方式:多反应监测(SRM)扫描模式;MRM检测参数见表1。 表1:实施例1的MRM检测参数
$为定量离子对。
[0041]定性鉴定:在相同的条件下，如果样液中农药色谱峰保留时间与标准溶液中相应 农药保留时间相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的离子均出现，而且离子 丰度比与标准溶液的离子丰度比相一致，则可判断样液中存在这种农药;若上述两个条件 不能同时满足，则判断不含该种农药。
[0042]线性关系： 以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线为Y = 16484Χ+6553，相关系数为0.9996。
[0043] 加标回收率和重复性： 在不含吡噻菌胺的猪肉中加入10、20和200yg/kg 3个浓度水平的吡噻菌胺标准溶液， 待农药添加30min后按上述处理步骤进行残留量测定，将测定浓度与农药理论添加浓度进 行比较，得到农药添加回收率，每个添加水平平行测定6次，得其相对标准偏差，测定结果见 表1。由表1可以看出，在3个加标水平上，吡噻菌胺的平均回收率为96.7%~100.7%，平均 相对标准偏差(RSD)为5.0 %~6.1 %，说明本发明方法的回收率高，重复性好。
[0044] 表1吡噻菌胺的回收率和重复性(n = 6)
[0045] 检出限： 将不同浓度的吡噻菌胺基质标准工作溶液注入GC-MS/MS，以最低浓度基质标准溶液色 谱峰的3倍信噪比和样品处理过程的浓缩倍数(猪肉的浓缩倍数为0.25倍)计算检出限，吡 噻菌胺的检出限为〇.〇85yg/kg。
[0046] 以上的实施例仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行 限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通工程技术对本发明的技术方案作出 的各种变型和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。
【主权项】
1. 一种化嚷菌胺残留量的GC-MS/MS快速测定方法，其特征在于，所述方法包括w下步 骤： (1) 提取 称取混匀样品于具塞离屯、管中，加适量水后，加入乙腊溶液均质提取后，加入氯化钢和 无水硫酸儀，剧烈满旋Imin后离屯、； (2) 净化 将增强型脂质去除产品EMR用水活化，移取样品提取液于活化好的EMR净化管中，满旋 Imin后，700化/min离屯、5min，转移全部上清液至装有无水硫酸儀和氯化钢的离屯、管中进行 盐析，满旋离屯、后，移取一定体积的上清液，浓缩至干后，用体积比为1/1的丙酬/正己烧混 合溶剂溶解定容，过膜后，待气相色谱串联质谱(GC-MS/MS)检测； (3) 标准工作溶液的配制 将不含化嚷菌胺的同种类基质空白样品按上述步骤（1)、（2)处理，得样品提取净化残 渣，加入适量溶剂和标准溶液，满旋混匀，配制成至少3个浓度的化嚷菌胺系列标准工作液； (4) 测定和结果计算 将步骤(3)中的各浓度梯度的标准工作液进行GC-MS/MS测定，W标准工作液的色谱峰 面积对其相应浓度进行回归分析，得到基质标准工作曲线;在相同条件下将步骤(2)中净化 后的样品液注入GC-MS/MS进行测定，测得样品液中化嚷菌胺的色谱峰面积，代入基质标准 工作曲线，得到样品液中化嚷菌胺含量，然后根据样品液所代表试样的质量计算得到样品 中化嚷菌胺残留量;若上机溶液中化嚷菌胺残留量超过线性范围上限，需用定容溶剂将上 机溶液浓度稀释至线性范围之内。2. 根据权利要求1所述的一种化嚷菌胺残留量的GC-MS/MS快速测定方法，其特征在于， 步骤(1)中样品若为含水量较少的样品，提取前须加适量水充分浸润。3. 根据权利要求1所述的一种化嚷菌胺残留量的GC-MS/MS快速测定方法，其特征在于， 步骤(4)中GC-MS/MS分析条件为:色谱柱:HP-5 MS毛细管色谱柱，柱长30m，内径0.25mm，膜 厚0.25μπι;进样口溫度250.0°C;载气：He,不分流模式进样，进样量：1化;恒流模式，流速 1.2mL/min;升溫程序:初溫60°C保持2min，W每分钟20°C的速度升至200°C，然后W每分钟2 °C的速度升至220°C，再W每分钟20°C的速度升至280°C，保持lOmin;传输线溫度:290°C ;电 离模式：电子轰击电离化I，70eV);离子源溫度280°C;碰撞气：氣气；多反应监测扫描方式 MRM，监测参数为：
【专利摘要】本发明公开了一种吡噻菌胺残留量的GC-MS/MS快速测定方法，该方法主要用于测定脂肪含量高的动物源性食品中残留的吡噻菌胺含量的方法。用乙腈均质提取样品中残留的吡噻菌胺，提取液经增强型脂质去除产品（Enhanced Matrix Removal，EMR）基质分散净化、反萃管萃取浓缩后，气相色谱串联质谱（GC-MS/MS）检测，采用不含待测农药的空白基质溶液建立校正的标准工作曲线，外标法定量。本方法平均回收率为96.7%～100.7%，平均相对标准偏差为5.0%～6.1%，检出限低于0.085 μg/kg，具有操作简便、快速、去杂效果好、灵敏度高、特征性强、重复性好、定性定量准确的优点。
【IPC分类】G01N30/02, G01N30/06, G01N30/88
【公开号】CN105699568
【申请号】CN201610070245
【发明人】郭庆龙
【申请人】郭庆龙
【公开日】2016年6月22日
【申请日】2016年1月30日