一种化妆品中多种紫外线吸收剂快速检测与确证技术的制作方法
【专利摘要】一种化妆品中多种紫外线吸收剂快速检测与确证技术，本发明公开了一种化妆品中17种紫外线吸收剂快速检测技术方法及其应用，所述的检测技术包括：样品经过提取后，采用高效液相色谱-质谱方法(HPLC-MS/MS)进行检测与确证。本发明提供的检测方法简单，稳定性好，灵敏度高，使用方便，能够实现快速检测化妆品中17种紫外线吸收剂。
【专利说明】
一种化妆品中多种紫外线吸收剂快速检测与确证技术
技术领域
[0001] 本发明属于分析和检测技术领域，涉及一种化妆品中多种防晒剂快速检测技术方 法及其应用，更具体的说是涉及一种化妆品中17种紫外线吸收剂快速检测技术方法及其 应用，包括采用四氢呋喃_甲醇-水体系，配置提取溶剂进行提取，采用高效液相色谱-质 谱方法（HPLC-MS/MS)进行检测与确证。本发明提供的检测方法简单，稳定性好，灵敏度高， 使用方便。
【背景技术】
[0002] 化学防晒剂局部用于皮肤，浓度较高可能引发接触致敏和光接触致敏等不良反 应。目前我国《化妆品卫生规范》（2007)等同采用了欧盟允许使用的防晒剂的品种及其限 量的相关规定。限用的防晒剂包括甲氧基肉桂酸乙基己酯、二苯-3、二苯酮_4和二苯酮-5 等26种化学防晒剂以及二氧化钛和氧化锌2种物理防晒剂。防晒化妆品中的防晒剂是作为 限用原料添加的，对防晒剂的含量检测是保证防晒化妆品的安全性的重要手段。《化妆品卫 生规范》（2007)给出化学防晒剂的检测方法，涉及了 15种化学防晒剂的定量检测，成为目 前防晒化妆品质量控制的重要技术手段。但是鉴于该方法存在的一些不足，影响了该方法 的适用性。同时，新型防晒剂的使用，也对防晒剂检测方法提出了新的要求。为此，通过优 化色谱条件，开发新的色谱分离方法，以避免使用四氢呋喃和高氯酸这样高腐蚀性的溶剂， 在普通液相色谱上实现多种限用防晒剂目标化合物的定量分析方法显得非常必要。
[0003] 化妆品卫生规范中规定的限用防晒剂的检测方法，采用一种液相条件分离了 15 种限用防晒剂。涉及防晒剂的种类与QB/T 2333-1997相比，虽然总数少了 4种，但是涉及 了 4种QB/T2333-1997未涉及的限用防晒剂。将等度洗脱改进为梯度洗脱，使得色谱的分 离度有了很大的改进，在方法提供的液相色谱条件下大多数的化合物可以获得基线分离， 有利于化合物的准确定量。但是仍然采用高含量的四氢呋喃为流动相，而且流动相中仍然 使用高氯酸作为酸性改性剂，是该方法的不足之处。而这些不足，也影响了方法的适用性。 开展多组分同时测定的定性定量检测方法研究十分必要。
【发明内容】
[0004] 本发明提供了一种化妆品中17种紫外线吸收剂快速检测技术方法及其应用，包 括采用四氢呋喃-甲醇-水体系，配置溶剂为提取溶剂，采用高效液相色谱-质谱方法 (HPLC-MS/MS)进行检测与确证。本发明提供的检测方法简单，稳定性好，灵敏度高，使用方 便。本技术对于17种紫外线吸收剂的检测具有较低的检出限和较宽的线性范围。
[0005] 本发明应用的仪器和设备：
[0006] (1)高效液相色谱-三重四级杆质谱联用仪配置ESI离子源。
[0007] (2)超声波清洗器
[0008] (3)蜗旋混合器。
[0009] (4)离心机。
[0010] (5)分析天平：感量分别为0? lmg和0? Olmg。
[0011] 本发明所述的试剂与溶液：除另有规定外，所用试剂至少为分析纯。
[0012] (1)甲醇：色谱纯。
[0013] (2)正己烷：色谱纯。
[0014] (3)无水硫酸钠：优级纯，于650°C灼烧4h，冷却后储于密闭干燥容器中备用。
[0015] (4)标准品：详细信息见表1。
[0016] 表1 17种紫外线吸收剂化合物信息
[0019] 本发明建立的17种紫外线吸收剂液相色谱串联质谱检测的主要质谱参数
[0020] 表2 16种紫外线吸收剂成分的主要参考质谱参数
[0023] 16种紫外线吸收剂在质谱仪器上的多反应监测（MRM)色谱图见图1(正离子模 式）、图2 (负尚子模式）。
[0024]
[0025] 图1标准物质总离子流质谱图（正模式）和提取离子质谱图
[0026] 对应峰号：1、对氨基苯甲酸（PABA) ;2、二苯酮；3、二苯酮-3(Bp3) ;4、p-甲氧基肉 桂酸异戊酯（IAMC) ;5、4_甲基苄亚基樟脑（4MBC) ;6、奥克利林（0C) ;7、二乙氨基羟苯甲酰 基苯甲酸己酯（DHHB) ;8、甲氧基肉桂酸乙基己酯（EHMC) ;9、PABA乙基己酯（0D-PABA) ;10、 丁基甲氧基二苯酰基甲烷（BMDBM) ;11、乙基己基三嗪酮（EHT) ;12、亚甲基双-苯并三唑基 四甲基丁基酚（MBBT) ;13、双-乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪（BEMT)胡莫柳酯（HMS);
[0027]
[0028] 图2标准物质总离子流质谱图（负模式）和提取离子质谱图
[0029] 对应峰号：1、苯基苯并咪唑磺酸（PBSA) ;2、二苯酮-4和二苯酮-5(Bp4/Bp5) ;3、 水杨酸乙基己酯（EHS) ;4、胡莫柳酯（HMS);
[0030] 本发明有如下的有益效果：本项研究建立了同时检测化妆品中多种17种紫外线 吸收剂的分析方法，保证了结果的重复性与稳定性，极大地提高了分析速度。
【附图说明】
[0031] 图1 16种紫外线吸收剂标准物质总离子流质谱图和提取离子质谱图（正离子模 式）
[0032] 对应峰号：1、对氨基苯甲酸（PABA) ;2、二苯酮；3、二苯酮-3(Bp3) ;4、p-甲氧基肉 桂酸异戊酯（IAMC) ;5、4_甲基苄亚基樟脑（4MBC) ;6、奥克利林（0C) ;7、二乙氨基羟苯甲酰 基苯甲酸己酯（DHHB) ;8、甲氧基肉桂酸乙基己酯（EHMC) ;9、PABA乙基己酯（0D-PABA) ;10、 丁基甲氧基二苯酰基甲烷（BMDBM) ;11、乙基己基三嗪酮（EHT) ;12、亚甲基双-苯并三唑基 四甲基丁基酚（MBBT) ;13、双-乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪（BEMT)胡莫柳酯（HMS);
[0033] 图2 16种紫外线吸收剂标准物质总离子流质谱图和提取离子质谱图（负离子模 式）
[0034] 对应峰号：1、苯基苯并咪唑磺酸（PBSA) ;2、二苯酮-4和二苯酮-5(Bp4/Bp5) ;3、 水杨酸乙基己酯（EHS) ;4、胡莫柳酯（HMS);
【具体实施方式】
[0035] 下面对本发明的实施例做详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行 实施给出了详细的实施方案和具体的操作过程。但本发明的保护范围不限于下述的具体实 施例。
[0036] 1分析步骤
[0037] 1. 1 提取
[0038] 称取约0. lg化妆品样品（精确至lmg)于15mL具塞刻度试管中，首先向试管中加 入6mL四氢咲喃（含0.1 %氨水），祸旋或超声使样品完全分散。若不能分散一般适当超声 可解决问题，对超声15min仍无法分散的样品（例如唇膏样品），需用60°C水浴，振荡加热 约1~2分钟即可溶解分散。继续向试管中加入甲醇/水（3 : 1)(含0.1%氨水）定容至 10mL，祸旋混合。于5000转/分离心5~lOmin，取清液，聚丙稀微孔滤膜过滤，待用。
[0039] 涉及对氨基苯甲酸、苯基苯并咪唑磺酸的检测，需取上述待用清液100 y L用甲醇 稀释至lmL，用聚丙烯微孔滤膜过滤后，方可上机测试。其他目标化合物的检测视情况可适 当稀释后上机测试，也可无需稀释，将上述待用清液直接上机测试。
[0040] 1. 2仪器参数与测定条件
[0041] 1.2.1液相色谱条件
[0042] 色谱柱：PFP(五氟苯基）色谱柱，4.6mmX150mm(I.D.)，3ym。
[0043] 流速：0? 5mL/min 进样量：2 y L。柱温：25°C。
[0044] 流动相：A水溶液（正模式含0? 1%甲酸，负模式含0.05%氨水），
[0045] B甲醇溶液（正模式含0? 1 %甲酸，负模式含0? 05%氨水）。
[0046] 梯度洗脱条件：
[0047] 表3梯度洗脱条件
[0049] 1. 2. 2质谱参考条件
[0050] 离子源；电喷雾电离源（ESI源）检测方式：多反应监测（MRM)。
[0051] 雾化气：氮气，35Psi。干燥气：氮气，流速10L/min，温度：350°C。
[0052] 碰撞气：氮气。毛细管电压：4000V。
[0053] 2校准曲线的制备
[0054] 分别准确移取各标准储备液200 y L于10mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配置 成200 y g/mL的混合标准溶液，取适量混合标准溶液，再用甲醇逐级稀释成100 y g/mL， 50 y g/mL，10 y g/mL，5 y g/mL，1 y g/mL的系列，构成6个浓度的混合标准系列，标准系列应 于使用前配制。二苯酮-9采用上述方法以水为溶剂进行系列浓度配制移取10 yL系列 标准溶液进行数据采集，以系列标准溶液质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，建立校准曲 线。
[0055] 3样品测定
[0056] 在设定色谱条件下，移取10 y L待测溶液进行高效液相色谱质谱分析。若待测溶 液中目标物的质量浓度超过校准曲线线性范围的上限，须对待测液进行适当稀释后重新测 定。
[0057] 4平行实验
[0058] 按以上步骤，完成两份样品的平行测定。在重复性条件下获得的两次独立测试结 果的绝对差值不大于这两次测定值的算术平均值的10%。
【主权项】
1. 一种化妆品中化学防晒剂快速检测技术方法及其应用，一种化妆品中17种紫外线 吸收剂快速检测技术方法及其应用，所述的检测技术包括：样品经过提取后，采用高效液相 色谱-质谱方法（HPLC-MS/MS)进行检测与确证。2. -种将权利要求1所述的应用于实际样品中所含17种紫外线吸收剂检测技术方法， 其特征在于，以电喷雾离子源（ESI源）为离子源，采用正负离子切换模式，采用多反应监测 (MRM)扫描方式对17种紫外线吸收剂进行检测。3. 根据权利要求2所述的实际样品中所含17种紫外线吸收剂检测技术方法，其特征在 于，可用于膏霜类、乳液类、水剂类、唇膏等蜡基类、指甲油类、粉类等化妆品中甲氧基肉桂 酸乙基己酯等17种紫外线吸收剂含量测定。
【文档编号】G01N30/88GK105891344SQ201410771067
【公开日】2016年8月24日
【申请日】2014年12月15日
【发明人】王传现, 宋青, 张缙, 赖国银, 任硕, 刘夏, 陈树兵, 倪昕路, 方晓明, 李晓虹, 何宇平
【申请人】上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫技术中心