Ase-hplc测定桔梗中桔梗皂苷的方法
【专利摘要】本发明提供了一种ASE?HPLC测定桔梗中桔梗皂苷的方法，旨在提供一种操作简单易行，灵敏度高的ASE?HPLC测定桔梗中桔梗皂苷的方法，其技术方案是取桔梗，研细，取3g置于20mLASE350萃取池中，用乙酸乙酯对样品进行提取，所述的提取温度为65℃，静态提取时间为5min，提取次数为1次，冲洗体积80％；再以正丁醇为提取溶剂，提取温度为70℃，静态提取时间为3min，提取次数为2次；3)合并两次提取液，减压蒸干即得；4)称取步骤3)的干粉1g，加入体积比20：80的乙腈∶0.5％磷酸，摇匀，放置，经0.45um滤膜过滤，得试样溶液，注样入高效液相色谱仪，测定；属于化学提取技术领域。
【专利说明】
ASE-HPLC测定桔梗中桔梗皂苷的方法
技术领域
[0001]本发明提供一种ASE-HPLC测定桔梗中桔梗皂苷的方法;属于化学提取技术领域。
【背景技术】
[0002]桔梗，别名包袱花、铃铛花、僧帽花，是多年生草本植物，茎高20?120厘米，通常无毛，偶密被短毛，不分枝，极少上部分枝。叶全部轮生，部分轮生至全部互生，无柄或有极短的柄，叶片卵形，卵状椭圆形至披针形，叶子卵形或卵状披针形，花暗蓝色或暗紫白色，可作观赏花卉;其根可入药，有止咳祛痰、宣肺、排脓等作用，中医常用药。在中国东北地区常被腌制为咸菜，在朝鲜半岛被用来制作泡菜，当地民谣《桔梗谣》所描写的就是这种植物。
[0003]桔梗干燥根经清洗、干燥、粉碎、装罐、70%乙醇为溶剂，加热回流提取三次，每次2小时，合并三次提取液，回收乙醇至无醇后，浓缩蒸发水至浸膏，喷雾干燥得桔梗提取物粉末，提取得率一般为15%，经粉碎、过筛(100目)，混合，包装得成品。
【发明内容】
[0004]针对上述不足，本发明的目的是提供一种操作简单易行，灵敏度高的一种ASE-HPLC测定桔梗中桔梗皂苷的方法。
[0005]为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下:
[0006]—种ASE-HPLC测定桔梗中桔梗皂苷的方法，依次包括下述步骤:
[0007]I)取桔梗，研细，取3g置于20mLASE350萃取池中，用乙酸乙酯对样品进行提取，所述的提取温度为65°C，静态提取时间为5min，提取次数为I次，冲洗体积80% ;
[0008]2)再以正丁醇为提取溶剂，提取温度为70°C，静态提取时间为3min，提取次数为2次；
[0009]3)合并两次提取液，减压蒸干即得；
[0010]4)称取步骤3)的干粉I g，加入体积比20: 80的乙腈:0.5 %磷酸，摇匀，放置，经
0.45um滤膜过滤，得试样溶液，注样入高效液相色谱仪，测定；
[0011 ] 所述的高效液相色谱法的参数如下:色谱柱:1nertsi 10DS-SP液相色谱柱，5μπι4.6X 250mm、柱温:30°C、流速:lmL/min、流动相:乙腈-水，检测波长:315nm。
[0012]进一步的，上述的ASE-HPLC测定桔梗中桔梗皂苷的方法，所述的乙腈和水的体积比为20:80。
[0013]与现有技术相比，本发明提供的技术方案:操作简单易行，灵敏度高，为桔梗质量标准的研究提供了科学依据。
【具体实施方式】
[0014]下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围所做的有限次的修改，仍在本发明的权利要求保护范围之内。
[0015]本发明所涉及的到百分含量浓度，除特殊说明外，溶质为液体的均为体积浓度，溶质为固体的均为质量浓度。
[0016]实施例1
[0017]I)取桔梗，研细，取3g置于20mLASE350萃取池中，用乙酸乙酯对样品进行提取，所述的提取温度为65°C，静态提取时间为5min，提取次数为I次，冲洗体积80% ;
[0018]2)再以正丁醇为提取溶剂，提取温度为70°C，静态提取时间为3min，提取次数为2次；
[0019]3)合并两次提取液，减压蒸干即得；
[0020]4)称取步骤3)的干粉I g，加入体积比20: 80的乙腈:0.5 %磷酸，摇匀，放置，经
0.45um滤膜过滤，得试样溶液，取2μ1注样入高效液相色谱仪，测定；
[0021 ] 所述的高效液相色谱法的参数如下:色谱柱:Inertsi 10DS-SP液相色谱柱，5μπι4.6X 250mm、柱温:30 °C、流速:lmL/min、流动相:乙腈-水(20:80)，检测波长:315nm。
[0022]采用加样回收法，精密称取已知含量的样品6份，每份0.5g，精密添加桔梗皂苷D对照品3mg，同法制成样品溶液，取2μ1进样，测定桔梗皂苷D的含量，算平均回收率99.25%,RSD = 1.08%,结果表明，本方法回收率好。
【主权项】
1.一种ASE-HPLC测定桔梗中桔梗皂苷的方法，其特征在于，依次包括下述步骤: 1)取桔梗，研细，取3g置于20mLASE350萃取池中，用乙酸乙酯对样品进行提取，所述的提取温度为65°C，静态提取时间为5min，提取次数为I次，冲洗体积80% ; 2)再以正丁醇为提取溶剂，提取温度为70°C，静态提取时间为3min，提取次数为2次； 3)合并两次提取液，减压蒸干即得； 4)称取步骤3)的干粉Ig，加入体积比20:80的乙腈:0.5 %磷酸，摇勾，放置，经0.45um滤膜过滤，得试样溶液，注样入高效液相色谱仪，测定； 所述的高效液相色谱法的参数如下:色谱柱:Inertsi 1DS-SP液相色谱柱，5μπι4.6 X250mm、柱温:30°C、流速:lmL/min、流动相:乙腈-水，检测波长:315nm。2.根据权利要求1所述的ASE-HPLC测定桔梗中桔梗皂苷的方法，其特征在于，所述的乙腈和水的体积比为20:80。
【文档编号】G01N30/02GK105974006SQ201610263446
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年4月26日
【发明人】陈学松, 陈江涛, 梁慧敏, 李亚, 李澄, 林冬
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所