高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法
【专利摘要】本发明提供了一种高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法，旨在提供一种操作简单，节约能耗的测定桔梗中桔梗皂苷的方法，其技术方案是：取桔梗粉碎，过筛，用石油醚将桔梗皂苷超声处理5min，离心取下层沉淀，干燥，得粗粉；在微波反应器中，向粗粉加入溴化1?十六烷基?3?甲基咪唑，沉淀质量2倍的丙醇，在65℃，处理12min得到提取液；将提取液浓缩后得到浓缩液，向浓缩液中加入大孔树脂混合并搅拌均匀，干燥后上AB?8树脂，水洗至无色，再以甲醇溶液淋洗，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩并干燥后即得产物；称取的干粉1g，加入体积比20：80的乙腈∶0.5％磷酸，摇匀，放置，经膜过滤，得试样溶液，注样入高效液相色谱仪，测定；属于化学提取技术领域。
【专利说明】
高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法
技术领域
[0001]本发明提供一种高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法;属于化学检测技术领域。
【背景技术】
[0002]桔梗，别名包袱花、铃铛花、僧帽花，是多年生草本植物，茎高20?120厘米，通常无毛，偶密被短毛，不分枝，极少上部分枝。叶全部轮生，部分轮生至全部互生，无柄或有极短的柄，叶片卵形，卵状椭圆形至披针形，叶子卵形或卵状披针形，花暗蓝色或暗紫白色，可作观赏花卉;其根可入药，有止咳祛痰、宣肺、排脓等作用，中医常用药。在中国东北地区常被腌制为咸菜，在朝鲜半岛被用来制作泡菜，当地民谣《桔梗谣》所描写的就是这种植物。
[0003]桔梗干燥根经清洗、干燥、粉碎、装罐、70%乙醇为溶剂，加热回流提取三次，每次2小时，合并三次提取液，回收乙醇至无醇后，浓缩蒸发水至浸膏，喷雾干燥得桔梗提取物粉末，提取得率一般为15%，经粉碎、过筛(100目)，混合，包装得成品。
【发明内容】
[0004]针对上述不足，本发明的目的是提供一种操作简单，节约能耗的离子液体提取桔梗中桔梗皂苷的方法。
[0005]为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下:
[0006]—种高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法，依次包括下述步骤；
[0007]I)取桔梗粉碎，过筛，按质量比1:10的比例用石油醚将桔梗皂苷超声处理5min，离心取下层沉淀，干燥，得粗粉；
[0008]2)在微波反应器中，取步骤I)得到的粗粉加入溴化1-十六烷基-3-甲基咪唑，沉淀质量2倍的丙醇，在65 °C，处理12min得到提取液；
[0009]3)将提取液浓缩后得到浓缩液，向浓缩液中加入大孔树脂混合并搅拌均匀，干燥后上AB-8树脂，水洗至无色，再以甲醇溶液淋洗，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩并干燥后即得产物；
[0010]4)称取步骤3)的干粉I g，加入体积比20: 80的乙腈:0.5 %磷酸，摇匀，放置，经
0.45um滤膜过滤，得试样溶液，注样入高效液相色谱仪，测定；
[0011 ] 所述的高效液相色谱法的参数如下:色谱柱:1nertsi 10DS-SP液相色谱柱，5μπι4.6X 250mm；柱温:30°C ;流速:lmL/min、流动相:乙腈-0.2%磷酸，检测波长:323nm。
[0012]进一步的，上述的一种离子液体提取桔梗皂苷中黄酮苷的方法，所述的溴化1-十六烷基-3-甲基咪唑和粗粉的质量比为1:99。
[00?3]上述的一种高效液相色谱法测定桔梗中桔梗阜苷的方法，所述的滤膜为0.45um滤膜过滤。
[0014]与现有技术相比，本发明提供的技术方案操作简单，提取快速，溶剂使用量少，节约能耗，可重复好的高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法。
【具体实施方式】
[0015]下面结合【具体实施方式】，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制，任何在本发明权利要求保护范围所做的有限次的修改，仍在本发明的权利要求保护范围之内。
[0016]本发明所涉及的到百分含量浓度，除特殊说明外，溶质为液体的均为体积浓度，溶质为固体的均为质量浓度。
[0017]实施例1
[0018]一种高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法，依次包括下述步骤；
[0019]I)取桔梗粉碎，过筛，按质量比1:10的比例用石油醚将桔梗皂苷超声处理5min，离心取下层沉淀，干燥，得粗粉；
[0020]2)在微波反应器中，取步骤I)得到的粗粉加入溴化1-十六烷基-3-甲基咪唑，沉淀质量2倍的丙醇，在65 °C，处理12min得到提取液；
[0021]3)将提取液浓缩后得到浓缩液，向浓缩液中加入大孔树脂混合并搅拌均匀，干燥后上AB-8树脂，水洗至无色，再以甲醇溶液淋洗，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩并干燥后即得广物；
[0022]4)称取步骤3)的干粉I g，加入体积比20: 80的乙腈:0.5 %磷酸，摇匀，放置，经
0.45um滤膜过滤，得试样溶液，注样入高效液相色谱仪，测定；
[0023]所述的高效液相色谱法的参数如下:色谱柱:Inertsi 10DS-SP液相色谱柱，5μπι4.6X 250mm；柱温:30°C ;流速:lmL/mi η、流动相:乙腈-0.2%磷酸，检测波长:323nm。
[0024]与标准谱图对比，发现与桔梗皂苷D标准色谱图一致，提取得率41.28%。
【主权项】
1.一种高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法，其特征在于，依次包括下述步骤； 1)取桔梗粉碎，过筛，按质量比1:10的比例用石油醚将桔梗皂苷超声处理5min，离心取下层沉淀，干燥，得粗粉； 2)在微波反应器中，取步骤I)得到的粗粉加入溴化1-十六烷基-3-甲基咪唑，沉淀质量2倍的丙醇，在65 °C，处理12min得到提取液； 3)将提取液浓缩后得到浓缩液，向浓缩液中加入大孔树脂混合并搅拌均匀，干燥后上AB-8树脂，水洗至无色，再以甲醇溶液淋洗，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩并干燥后即得产物； 4)称取步骤3)的干粉lg，加入体积比20:80的乙腈:0.5%磷酸，摇匀，放置，经膜过滤，得试样溶液，注样入高效液相色谱仪，测定； 所述的高效液相色谱法的参数如下:色谱柱:Inertsi 1DS-SP液相色谱柱，5μπι4.6 X250mm ；柱温:30°C ;流速:lmL/min、流动相:乙腈-0.2 %磷酸，检测波长:323nm。2.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法，其特征在于，所述的溴化1-十六烷基-3-甲基咪唑和粗粉的质量比为1:99。3.根据权利要求1所述的一种高效液相色谱法测定桔梗中桔梗皂苷的方法，其特征在于，所述的滤膜为0.45um滤膜过滤。
【文档编号】G01N30/02GK105974004SQ201610263370
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年4月26日
【发明人】陈学松, 陈江涛, 梁慧敏, 李亚, 李澄, 林冬
【申请人】广西壮族自治区梧州食品药品检验所