组合治疗的制作方法
【技术领域】
【背景技术】
[0001] 式⑴的化合物：
[0002]
[0003] 或其药学上可接受盐；其中
[0004]
123456789101112 A1和A4独立地是C或N; 2 各A2和A3是C，或当R6和R7成环时，A2和A3之一是N， 3 B和C独立地是任选取代的5-7元碳环、芳基、含有N、0或S的杂芳基或杂环； 4 Z1、Z2和Z3独立地是NRn,C= 0,CR-OR, (CR2)丨 2或=C-R12; 5 R1和R2独立地是卤素、OR12、NR(R12)、SR12,或任选取代的Q6烷基、C2 6烯基或C2 6 炔基；或R1和R2之一是H; 6 R3是（CR2)。2S02R12,（CR2)。2S02NRR12,（CR2)。2C0! 2R12,（CR2)。2C0NRR12或氰基； 7 R4、R6、R7和R10独立地是任选取代的ci6烷基、C2 6烯基或C2 6炔基；OR12、NR(R12)、 卤素、硝基、S02R12、（CR2)PR13或X;或R4、R7和R10独立地是H; 8 R、R5和R5'独立地是H或Q6烷基； 9 R8和R9独立地是q6烷基、C26烯基、C26炔基、卤素或X，或当R1和R2成环时，R8 和R9之一是H;且只要R8和R9之一是X; 10 或者，当R1和R2、或R6和R7、R7和R8、或R9和R1(]连接碳原子时，可以形成任选取代 的5-7元单环或稠合碳环、芳基、或包含N、0和/或S的杂芳基或杂环；或当连接N时，R7、 R8、R9和R10缺失； 11 R11 是H、q6烷基、C26烯基、（CRjpCOi2R、（CR2)p0R、（CR2)pR13、（CR2)pNRR12、（CR2) pC0NRR12或（CRjpSOi2R12; 12 R12和R13独立地是任选取代的3-7元饱和或部分不饱和碳环，或包含N、0和/或 S的5-7元杂环；芳基或杂芳基；或R1是H、C i 6烷基；
[0017] X是（CR2)qY、氰基、COi2R1、C0NR(R1)、C0NR(CR2)pNR(R1)、C0NR(CR2)p0R1、 CONR(CR2)PSR1、CONR(CR2)PS(0)丄 2R1或（CR2)丄6NR(CR2)P0R1;
[0018] Y是任选取代的3-12元碳环，5-12元芳基，或5-12元杂芳基或杂环，所述杂芳基 或杂环包含N、0和/或S且经所述杂芳基或杂环的碳原子连接A 2或A3或者两者，此时（CR 2) J中的q是0 ;和
[0019] n、p和q独立地是0-4;
[0020] 最初描述于 W0 2008/073687 A1。
[0021] 此外，热激蛋白90(Hsp90)被认为是抗癌革巴标。Hsp90是高丰度和必需蛋白，其担 当分子伴侣以确保客户蛋白的构象稳定性、形状和功能。Hsp90伴侣家族由4个成员组成： 位于胞液的Hsp90 a和Hsp90 0，内质网中的GRP94和线粒体中的TRAP1。Hsp90是构成约 1% -2%总蛋白的丰富细胞伴侣。
[0022] 在应激蛋白中，Hsp90是独特的，因为它对于大部分多肽的生物起源是不必要的。 Hsp90与称为"客户蛋白"的原癌蛋白形成复合物，所述蛋白是在生长控制、细胞生存和组织 发育中起关键作用的构象不稳定信号转导子。这种结合防止这些客户蛋白降解。Hsp90客 户蛋白的子集，如Raf、AKT、磷酸AKT、⑶K4和包括ErbB2在内的EGFR家族，是参与细胞生 长、分化和凋亡中起重要作用的致癌信号分子，细胞生长、分化和凋亡是癌细胞中所有重要 的过程。抑制Hsp90的内在ATP酶活性破坏Hsp90-客户蛋白相互作用，导致其经泛素蛋白 酶体通路降解。
[0023] Hsp90伴侣在其N末端结构域具有保守的ATP结合位点，属于小ATP酶亚家族，称 为DNA旋转酶、Hsp90、组氨酸激酶和MutL(GHKL)亚家族。Hsp90的陪伴（折叠）活性取决 于其ATP酶活性，所述活性就分离酶而言较弱。然而，在与称为共伴侣分子的蛋白相联后， 显示Hsp90的ATP酶活性得到提高。因此，Hsp90蛋白在体内充当大的机能蛋白复合物亚 基。Hsp90对真核细胞生存至关重要且在许多肿瘤中过表达。
[0024] 尽管就增殖性疾病患者而言有许多治疗选择，仍需要有效且安全的治疗剂并需要 其优先用于组合治疗。意外发现W02008/073687描述的式（I)化合物与Hsp90抑制剂联合 弓丨起强的抗增殖活性以及体内抗肿瘤反应。Hsp90抑制的额外益处可能由其对PI3K/Akt/ mTOR通路内其它信号组分（如对AKT和pAKT)的作用以及其对许多客户蛋白的广泛作用而 引起。
【发明内容】
[0025] 本发明涉及包括以下的药物组合：(a)式（I)的化合物，
[0026]
[0027] 或其药学上可接受盐；其中
[0028]
[0029] A1和A 4独立地是C或N ;
[0030] 各A2和A 3是C，或当R 6和R 7成环时，A 2和A 3之一是N，
[0031] B和C独立地是任选取代的5-7元碳环、芳基、含有N、0或S的杂芳基或杂环，；
[0032] Z1、Z2和 Z 3独立地是 NR n, C = 0, CR-OR, (CR2)丨 2或=C-R 12;
[0033] R1和R2独立地是卤素、OR 12、NR(R12)、SR12,或任选取代的Q 6烷基、C 2 6烯基或C 2 6 炔基；或R1和R2之一是H;
[0034] R3是（CR 2)。2S02R12,（CR2)。 2S02NRR12,（CR2)。fOi 2R12,（CR2)。2C0NRR12或氰基；
[0035] R4、R6、R7和R 10独立地是任选取代的C : 6烷基、C 2 6烯基或C 2 6炔基；OR 12、NR(R12)、 卤素、硝基、S02R12、（CR 2)PR13或X ;或R 4、R7和R 10独立地是H ;
[0036] R、R5和R5'独立地是H或Q 6烷基；
[0037] Rs和R9独立地是C : 6烷基、C 2 6烯基、C 2 6炔基、卤素或X，或当R 1和R2成环时，R8 和R9之一是H ;且只要R8和R9之一是X ;
[0038] 或者，当R1和R2、或R6和R 7、R7和R8、或R9和R 1(]连接碳原子时，能形成任选取代的 5-7元单环或稠合碳环、芳基、或包含N、0和/或S的杂芳基或杂环；或当连接N时，R 7、R8、 R9和R 10缺失；
[0039] R11 是 H、q 6烷基、C26烯基、（CRjpCOi 2R、（CR2)p0R、（CR2)pR13、（CR2)pNRR12、（CR2) pC0NRR12或（CRjpSOi 2R12;
[0040] R12和R 13独立地是任选取代的3-7元饱和或部分不饱和碳环，或包含N、0和/或 S的5-7元杂环；芳基或杂芳基；或R 12是H、C i 6烷基；
[0041] X 是（CR2)qY、氰基、2R12、C0NR(R 12)、C0NR(CR2)pNR(R12)、C0NR(CR2)p0R12、 C0NR (CR2) PSR12、C0NR (CR2) PS (0)丄 2R12或（CR 2)丄 6NR (CR2) P0R12;
[0042] Y是任选取代的3-12元碳环，5-12元芳基，或5-12元杂芳基或杂环，所述杂芳基 或杂环包含N、0和/或S且经所述杂芳基或杂环的碳原子连接A 2或A3或者两者，此时（CR 2) J中的q是0 ;和
[0043] (b)至少一种化合物，所述化合物靶向、减少或抑制Hsp90的内在ATP酶活性和/ 或经泛素蛋白酶体通路降解、靶向、减少或抑制Hsp90客户蛋白。这类化合物称为"热激蛋 白90抑制剂"或"Hsp90抑制剂"。适用于本发明的Hsp90抑制剂示例包括但不限于格尔 德霉素衍生物坦螺旋霉素（Tanespimycin) (17-烯丙基氨基-17-去甲氧格尔德霉素）（也 称为1(03-953和17-六六6);根赤壳菌素 ；6-氯-9-(4-甲氧基-3,5-二甲基吡啶-2-基甲 基）-9H-嘌呤-2-胺甲磺酸盐（也称为 CNF2024) ;IPI504 ;SNX5422 ;5-(2,4_ 二羟基-5-异 丙基-苯基）-4-(4_吗啉-4-基甲基-苯基）-异噁唑-3-羧酸乙基酰胺（AUY922);和 (R) -2-氨基-7- [4-氟-2- (6-甲氧基-吡啶-2-基）-苯基]-4-甲基-7, 8-二氢-6H-吡 啶并[4, 3-d]嘧啶-5-酮（HSP990)。
[0044] 在上式（1)中，R1可以是卤素或CI6烷基；R 2是H或順^或!?1和R2-起形成任选 取代的5-6元芳基、或包括1-3个氮原子的杂芳基或杂环。在其它示例中，式（1)的R 3可以 是 S02R12, S02NH2, S02NRR12, C02NH2, C0NRR12,叫 2R12或氰基；R12是 C i 6烷基、任选取代的 C3 7环 烷基、C3 7环烯基、吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、吗啉基或氮杂环丁烷基。在其它示例中，式（1) 的R5、R 5'、R7和R10独立地是H，且n是0。在其它示例中，式⑴的R6可以是卤素或0R 12， R12是C16烷基。
[0045] 在一个优选实施方式中，式（I)的化合物是
[0046] V
〇.
[0047] 本发明还涉及药物组合物，所述组合物包括式（I)化合物或其药学上可接受盐和 至少一种Hsp90抑制剂或其药学上可接受盐。在一个实施方式中，本发明的药物组合物用 于治疗增殖性疾病。
[0048] 本发明还涉及药物组合的应用，所述组合包括式（I)化合物或其药学上可接受盐 和至少一种Hsp90抑制剂或其药学上可接受盐，用于制备治疗增殖性疾病的药物。
[0049] 本发明还涉及在需要的对象中治疗增殖性疾病的方法，所述方法包括向所述对象 施用治疗有效量的式（I)化合物或其药学上可接受盐和至少一种Hsp90抑制剂或其药学上 可接受盐。根据本发明，式（I)化合物和Hsp90抑制剂可作为单一药物组合物施用、分开的 组合物施用或依序施用。
[0050] 本发明还涉及药盒，所述药盒包括如权利要求1所述的式（I)化合物或其药学上 可接受盐和至少一种Hsp90抑制剂或其药学上可接受盐。
[0051] 在本发明的一个实施方式中，所述式⑴化合物选自5-氯-N2_(2-异丙氧 基-5-甲基-4-(哌啶-4-基）苯基）-N4-[2-(丙烷-2-磺酰基）-苯基]-嘧啶-2, 4-二 胺（化合物A)，具有以下结构
[0052]
[0053] 或其药学上可接受盐。
[0054] 在本发明的一个实施方式中，所述Hsp90抑制剂是5- (2, 4-二羟基-5-异丙基-苯 基）-4- (4-吗啉-4-基甲基-苯基）-异噁唑-3-羧酸乙基酰胺（AUY922)。
[0055] 在本发明的一个实施方式中，所述式⑴的化合物是5-氯-N2_(2-异丙氧 基-5-甲基-4-(哌啶-4-基）苯基）-N4- [2-(丙烷-2-磺酰基）-苯基]-嘧啶-2, 4-二胺 (化合物A)且所述Hsp90抑制剂是5- (2, 4-二羟基-5-异丙基-苯基）-4- (4-吗啉-4-基 甲基-苯基）-异噁唑-3-羧酸乙基酰胺（AUY922)。
【附图说明】
[0056] 图1显示AUY922 50mg/kg、5-氯-N2- (2-异丙氧基-5-甲基-4-(哌啶-4-基）苯 基）-N4-[2-(丙烷-2-磺酰基）-苯基]-嘧啶-2, 4-二胺（化合物A) 10mg/kg、或AUY922 50mg/kg与化合物A 10mg/kg的组合在携带HLUX-1787肺原发性肿瘤异种移植物的小鼠中 的抗肿瘤活性，所述异种移植物具有EML4-ALK变体2易位（TRP-0318)。
[0057] 图 2显示 AUY92250mg/kg、化合物 A10mg/kg、或 AUY92250mg/kg与化合物 A l〇mg/kg的组合在携带HLUX-1787肺原发性肿瘤异种移植物的小鼠中的体重变化百分比， 所述异种移植物具有EML4-ALK变体2易位（TRP-0318)。
[0058] 对于图1和2的体内测