专利名称：一种获得大白菜雄性不育系的方法
技术领域：
本发明涉及一种获得大白菜雄性不育系的方法。
背景技术：
植物在有性繁殖过程中不能产生正常的花药、花粉或雄配子的遗传现象称为雄
性不育(male sterility)。根据遗传特点，雄性不育可以分为两类即符合孟德尔遗 传规律，由核基因控制的细胞核雄性不育(nuclear male sterility, NMS或genie male sterility, GMS)和由细胞核、细胞质遗传因素共同控制的核质互作雄性不育，也称 细胞质雄性不育(cytoplasmic male sterility, CMS)。雄性不育既是作物杂种优势利 用、轮回选择和群体改良的工具，又是研究花粉发育、细胞质遗传和核质互作的重 要遗传材料。
目前，大白菜雄性不育源主要有细胞核雄性不育系和细胞质雄性不育系两种， 分别是张书芳等(1990)从"万泉青帮"大白菜品种采种田中发现的细胞核雄性不 育系，以及转育芸薹属其他作物细胞质雄性不育系获得的OguCMS、 Pol CMS和 CMS96三种细胞质雄性不育系。大白菜雄性不育系获得的主要途径有以下几种
1、 自然突变
原始的不育源多是从自然群体中发现的天然突变株，自然突变是不育源产生的 主要途径。1990年张书芳等从"万泉青帮"大白菜品种采种田中发现了不育株，该 不育株的不育类型为细胞核雄性不育。
2、 杂交及回交转育
属间或种间杂交是获得雄性不育系尤其是细胞质雄性不育系的有效途径。据 Kaul (1988)统计，己发现的雄性不育材料中，有10%左右的细胞核雄性不育材料 和70%左右的细胞质雄性不育材料来自于属间或种间杂交。
大白菜细胞质雄性不育系分别来源于萝卜OguCMS、甘蓝型油菜PolCMS和 新型甘蓝型油菜CMS96这三种不育源，经过原生质体融合、杂交和多代回交转育 等途径，获得了目前应用的三种大白菜细胞质雄性不育系。
发明内容
本发明的目的是提供一种获得大白菜雄性不育系的方法。本发明所提供的获得大白菜雄性不育系的方法包括以下步骤
1) 以芸薹属异源六倍体(AABBCC， n=27)秋引2005-12为母本，以含有A基 因组(AA， n=10)的春种大白菜金春为父本进行杂交，获得杂交一代；所述芸薹属 异源六倍体(AABBCC， n=27)秋引2005-12的保藏登记号为CGMCC 2553;
2) 以含有A基因组(AA， n=10)的中晚熟大白菜义和五号为母本，以上述步 骤l)获得的杂交一代为父本进行杂交，获得大白菜雄性不育系。
在上述方法的基础上，还可以以上述步骤2)获得的大白菜雄性不育系为母本， 以大白菜义和五号或北京新三号为父本进行杂交，获得转育的大白菜雄性不育系。
实验证明，2006-2007年，采用上述方法进行两次重复实验，结果每次都能获 得大白菜雄性不育系，在ll株大白菜中，有11株不育，不育株率为100%，不育 度为100%。
芸薹属异源六倍体(AABBCC， n=27)秋引2005-12已于2008年6月18日保藏 于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为北京 市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所)，保藏登记号为CGMCCW2553。芸 薹属异源六倍体(AABBCC， n=27)秋引2005-12具有如下稳定遗传的表型性状株 型高，心叶略带紫色，叶片绿色、有缺刻、附着蜡粉，茎部略有紫色、附着蜡粉， 腋芽并发性强，花瓣为黄色，花药和柱头正常，结实性好，种荚细长，种子较大、 呈黑褐色。
本发明的获得大白菜雄性不育系的方法具有如下优点简单、重复性好、获得 的不育系不育性稳定、不育彻底，而且转育容易，且与其他大白菜杂交性良好，可 以用于大白菜育种、不育机理等相关领域的研究。
图1为本发明具体的技术路线
图2为大白菜雄性不育系MS200712花的形态
图3为大白菜雄性不育系MS200712的花药和蜜腺
具体实施例方式
本发明的具体技术路线如图1所示。
实施例l、大白菜雄性不育系的获得
1、杂交一代F1 (AABBCC X AA)的获得
以芸薹属异源六倍体(AABBCC， n=27)秋引2005-12 CGMCC2553为母本，
4以含有A基因组(AA， n=10)的春种大白菜金春(购自辽宁东亚国际种苗有限公司) 为父本进行杂交，在上述母本-芸薹属异源六倍体(AABBCC， n=27)秋引2005-12 的盛花期，选取花蕾多、生长旺盛的主枝为杂交枝条，彻底摘除花序上每个花蕾中 的6个雄蕊，然后涂抹父本-春种大白菜金春的花粉到上述母本的柱头上；第二天 上午再重复授粉一次。在经过上述处理的母本上收获的种子即为杂交一代Fl (AABBCC X AA)。
2、大白菜雄性不育系MS200712的获得
以含有A基因组(AA， n=10)的中晚熟大白菜义和五号(购自青岛胶州市胶白 蔬菜育种中心)为母本，以步骤1获得的杂交一代F1 (AABBCC X AA)为父本进行 杂交，在上述母本-中晚熟大白菜义和五号的盛花期，选取花蕾多、生长旺盛的主 枝为杂交枝条，彻底摘除花序上每个花蕾中的6个雄蕊，然后涂抹上述步骤l获得 的杂交一代F1 (AABBCC X AA)的花粉到上述母本的柱头上；第二天上午再重复授 粉一次，在经过上述处理的母本上收获的种子即为大白菜雄性不育系MS200712。
大白菜雄性不育系MS200712花的形态如图2所示，其花药和蜜腺的形态如图3 所示。从图中可以看出，大白菜雄性不育系MS200712的花瓣为黄色，花药浅黄色， 花药退化、败育彻底，柱头正常，蜜腺发达。
2006-2007年，采用上述方法进行两次重复实验，结果每次都能获得大白菜雄 性不育系。重复实验1在5株大白菜中，有5株不育，不育株率为100%，不育度为 100%;重复实验2在6株大白菜中，有6株不育，不育株率为100%，不育度为100%。
实施例2、大白菜雄性不育系MS200712。8-柳和MS200712。8，的获得
以上述实施例1获得的大白菜雄性不育系MS200712为母本，分别以大白菜义 和五号或北京新三号(分别购自青岛胶州市胶白蔬菜育种中心和北京京研益农科技 发展中心)为父本进行杂交，在上述母本-大白菜雄性不育系MS200712的盛花期， 选取花蕾多、生长旺盛的主枝为杂交枝条，人工剥开花蕾露出柱头，然后分别涂抹 大白菜义和五号或北京新三号的花粉到上述母本的柱头上；第二天上午再重复授粉 一次，在经过上述处理的母本上收获的种子即为大白菜雄性不育系MS200712。謹。和 MS20071208—916。
采用上述方法进行两次重复实验，结果每次都能获得大白菜雄性不育系。重复 实验1在3株大白菜中，有3株不育，不育株率为100%，不育度为100%;重复 实验2在5株大白菜中，有5株不育，不育株率为100%，不育度为100%。
权利要求
1、一种获得大白菜雄性不育系的方法，包括以下步骤1)以芸薹属异源六倍体(AABBCC，n＝27)秋引2005-12为母本，以含有A基因组(AA，n＝10)的春种大白菜金春为父本进行杂交，获得杂交一代；所述芸薹属异源六倍体(AABBCC，n＝27)秋引2005-12的保藏登记号为CGMCC №2553；2)以含有A基因组(AA，n＝10)的中晚熟大白菜义和五号为母本，以上述步骤1)获得的杂交一代为父本进行杂交，获得大白菜雄性不育系。
2、 一种获得大白菜雄性不育系的方法，是以按照权利要求l所述的方法获得 的大白菜雄性不育系为母本，以中晚熟大白菜义和五号或北京新三号为父本进行杂 交，获得转育的大白菜雄性不育系。
3、 权利要求1或2所述的方法在大白菜育种中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种获得大白菜雄性不育系的方法。该方法包括以下步骤1)以芸薹属异源六倍体(AABBCC，n＝27)秋引2005-12为母本，以含有A基因组(AA，n＝10)的春种大白菜金春为父本进行杂交，获得杂交一代；所述芸薹属异源六倍体(AABBCC，n＝27)秋引2005-12的保藏登记号为CGMCC № 2553；2)以含有A基因组(AA，n＝10)的中晚熟大白菜义和五号为母本，以上述步骤1)获得的杂交一代为父本进行杂交，获得大白菜雄性不育系。实验证明，采用上述方法进行两次重复实验，结果每次都能获得大白菜雄性不育系，在11株大白菜中，有11株不育，不育株率为100％，不育度为100％。
文档编号A01H1/02GK101627723SQ20081011669
公开日2010年1月20日 申请日期2008年7月15日 优先权日2008年7月15日
发明者于拴仓, 余阳俊, 卢桂香, 张凤兰, 张德双, 徐家炳, 赵岫云 申请人:北京市农林科学院