(-)-e-10-oh-nt组合物及其合成与使用的方法

专利名称：：(-)-e-10-oh-nt组合物及其合成与使用的方法(-)-E-10-0H-NT组合物及其合成与使用的方法1.相关申请的交叉引用本申请依据35U.S.C.§1.119(e)要求2007年4月30日提交的临时申请第60/915，103号、2008年2月11日提交的临时申请第61/027，814号禾口2008年2月12日提交的临时申请第61/028，122号的优先权，这些临时申请的公开内容以其整体在此通过引用并入。2.关于联邦政府资助的研究的声明无3.合作研究协议的当事人无4.对序列表、表格或计算机程序的引用无5.背景包括阿米替林(AT)和去甲替林(NT)的三环抗抑郁药已显示抑制包括去甲肾上腺素和5-羟色胺的一元胺的再摄取，并且已广泛用于处方适应症(on-label)和非处方适应症(off-label)，以治疗至少部分地由调节异常的去甲肾上腺素和5-羟色胺的摄取或再摄取介导的许多不同的病症和疾病，其包括但不限于，心境障碍如抑郁、焦虑障碍如强迫症(OCD)、进食障碍如神经性厌食和神经性贪食、冲动控制障碍如拔毛狂、睡眠障碍如与阿片样物质脱瘾相关的失眠、人格障碍如注意缺陷多动障碍(ADHD)以及躯体形式障碍如某些类型的疼痛。AT和NT还用作多种类型的急性疼痛和慢性疼痛的一线治疗，所述疼痛是起源于伤害性的(例如躯体的或内脏的)或非伤害性的(例如神经性的或交感神经的)，包括非伤害性的神经性疼痛如糖尿病神经病变和疱疹后神经痛(PHN)、以及包括炎性疼痛和间质性膀胱炎的伤害性疼痛。然而，AT和NT的使用已受其不利的副作用所限制，所述不利的副作用包括但不限于，抗毒蕈碱作用如口干、便秘、恶心和尿潴留；头痛、出汗增加、耳鸣、不快味觉、心脏毒性作用如直立性低血压、心律不齐和心动过速；镇静和体重增加。由于NT和AT与细胞色素P450药物代谢酶共有的副作用和/或相互作用，NT和AT还被禁忌与多种间介(mediation)一起使用。必然地，鉴定能够治疗至少部分地由调节异常的去甲肾上腺素和5-羟色胺的摄取或再摄取介导的病症和疾病的其他化合物以及在AT和三环抗抑郁药的药理学中已涉及但显示出降低的和/或较少的副作用并且可与被禁忌与AT和NT—起使用的药物一起施用的其他靶将是有益的和所期望的。6.概述当体内施用于包括人类的哺乳动物时，阿米替林("AT")和去甲替林("NT")共有许多共同的代谢产物，主要的一种是[(5-[3-甲基氨基_亚丙基]-10，11-二氢-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-醇]("10-OH-NT")。取决于关于双键的构型，该10-OH-NT代谢产物具有两个几何异构体(Z-10-0H-NT和E-10-0H-NT)。由于在10位的碳的手性，这些异构5体的每一个包括两个对映体，(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT以及(+)-Z-IO-OH-NT和(-)-Z-10-0H-NT。某些研究提示，当口服施用于人类时，主要的IO-OH-NT代谢产物的外消旋物(士)-E-10-0H-NT可能可用于治疗抑郁和焦虑(Nordin等人，1987a)。然而，除了所提及的声明E-10-0H-NT的(+)和(-)对映体以相似的功效抑制去甲肾上腺素摄取的未发表的研究(Nordin&Bertilsson，1995)，在文献中未报导该外消旋物的具体的药理学性质和生化性质以及分离的(+)和(_)对映体。由申请人发现的并在此提供的有说服力的证据(在后面的部分中更具体地讨论)说明E-10-0H-NT的(-)对映体具有符合治疗有效性的重要的药理学性质和生化性质。例如，如同AT和NT，(-)-E-10-0H-NT结合去甲肾上腺素("NE")和5-羟色胺("5HT")一元胺运载体(monoaminetransporter)并且抑制NE和5HT的摄取，已知与AT和NT的抗抑郁性质及其他治疗性质相关的生物活性。显著地，如在重组体运载体结合试验中所测量的，(_)-E-10-0H-NT对NE运载体的亲和力与AT的亲和力大致相等并且在NT的亲和力的约IO倍以内。对于抑制NE摄取，观察到如在基于细胞的功能分析(cell-basedfunctionalassay)中所测量的类似结果。此外，如同NT，(-)-E-IO-OH-NT对NE运载体和5HT运载体显示出选择性。本发明人已发现，(-)-E-lO-OH-NT与AT和NT不共有与在使用过程中的不利副作用相关的某些药理学性质和生化性质。例如，虽然AT和NT都有效对抗&组胺能受体OViistaminergicrec印tor)，在短期使用和长期使用AT和NT均观察到的显著的体重增加(Altamura等人，1989;Wirshing等人，1999;Richelson，2001;Khawam等人，2006)和不期望的镇静作用(Bryson&Wilde，1996)中起作用的性质，但(_)-E-IO-OH-NT以小得多的程度对抗该&组胺能受体。实际上，(_)-E-10-0H-NT相对于AT和NT的优良非镇静作用在通常用于评价药物的镇静性质的大鼠旋转棒试验(ratrotarodassay)中确认。因此，与AT和NT相比，(-)-E-10-0H-NT应当是较低镇静的并且具有较少的不良食欲作用。在该试验中，在施用AT(30mg/kg，腹膜内)和NT(30mg/kg，腹膜内)以后30分钟时分别观察到旋转棒性能(rotarodperformance)51±20%和60±40%的峰值缺乏(peakdeficit)。完全相反地，在以30mg/kg腹膜内的剂量接受(-)-E-10-0H-NT的大鼠中未观察到性能的显著减损°(-)-E-10-0H-NT的这些和其他新发现的有益性质(以下进一步讨论)提供了在对于三环抗抑郁药的领域中是史无前例的治疗益处。因为(-)-E-10-0H-NT与AT和NT共有治疗相关的药理学性质和生化性质，其可以基本上对映体纯的形式或对映体纯的形式用于治疗通常用AT和NT治疗的许多适应症，所述适应症包括但不限于本文进一步提及的多种疾病和病症。然而，因为(-)-E-lO-OH-NT不具有已知作为不利副作用的原因的某些药理学性质和生化性质，所以可给予患者较低发生率的不期望的副作用的治疗。作为具体的、非限制性的实例，因为(_)-E-10-0H-NT相对于AT和NT是显著较低效的^组胺能受体拮抗剂，所以用该药剂可获得治疗益处，而没有AT和/或NT治疗所经历的显著体重增加和镇静的不期望的副作用。如同(-)-E-10-0H-NT，外消旋的(士)-E-10-0H-NT及其(+)对映体在体外试验中还具有重要的且近似对等的生化活性。例如，(士)-E-10-0H-NT、(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT每个均对去甲肾上腺素运载体还有5-羟色胺运载体表现出大致相等的亲和力(见实施例14)。在功能试验中，E-10-0H-NT的(+)对映体和(_)对映体对去甲肾上腺素摄取表现出大致对等的选择性抑制，并且在体外功能试验中与AT大致对等(见实施例5)。但体内动物研究指出，在神经性疼痛的啮齿动物模型(L5脊神经结扎的大鼠模型；见实施例15)中，(-)-E-10-0HNT对映体比外消旋的(士)-E-10-0H-NT和(+)-E-10-0H-NT在治疗上更有效，并且在痛觉过敏(FCA诱导的炎性疼痛；见实施例5和实施例17-20)和抑郁(强迫游泳试验；见实施例21)的啮齿动物模型中还比(+)-E-10-0H-NT更有效。已知(±)-E-IO-OH-NT、(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-OH-NT的大致对等的生化活性，这些体内结果是非常令人惊讶的。预期外消旋的(士)-E-10-0H-NT、(+)-E-10晉NT和(-)-E-10-OH-NT在疼痛和抑郁的体内啮齿动物模型中将显示大致对等的功效。但是，仅(_)对映体被证明是有效的。本公开部分地基于对于(-)-E-10-OH-NT所发现的令人惊讶的功效。因此，在一方面中，本公开提供了包括E-10-0H-NT和可选择的一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂的组合物。E-10-0H-NT在组合物中以富含(-)对映体的非外消旋的混合物存在。在某些实施方案中，构成组合物的E-10-0H-NT是基本上对映体纯的(-)-E-10-0H-NT。在某些实施方案中，构成组合物的E-10-0H-NT是对映体纯的(-)-E-IO-OH-NT。E-10-0H-NT可以游离碱的形式或以盐的形式存在于组合物中。在某些实施方案中，E-10-0H-NT以药学上可接受的酸加成盐的形式存在。E-10-0H-NT(包括盐的形式)还可以例如与在制备或纯化期间使用的溶剂和/或水一起的溶剂合物和/或水合物的形式存在于组合物中。E-10-0H-NT组合物可在体外或体内使用，如以下将更具体地描述的。当在体内使用时，所述组合物可被配制用于经基本上任何施用途径或模式施用至兽医情形中的动物或者施用至人类，所述施用途径或模式包括但不限于口服施用、局部施用、经眼施用、含服、全身施用、经鼻施用、注射施用、经皮施用、直肠施用、阴道施用、吸入施用或吹入施用。如上所述，(-)-E-10-0H-NT与AT和NT共有与这些药物的治疗功效相关的重要的生物学性质。它还在疾病的动物模型中显示出功效。基于这些类似的性质，预期本文所述的组合物在治疗对用AT和NT治疗响应的多种疾病和适应症中将是同等地有效的。因此，在另一方面中，本公开提供了治疗对AT或NT治疗响应的疾病或适应症的方法。该方法通常包括向患有对用AT或NT治疗响应的疾病或适应症的、包括人类的哺乳动物施用有效治疗所述疾病或适应症的量的本文所述的组合物。在某些实施方案中，E-10-0H-NT组合物包括富含(_)对映体的E-10-0H-NT。在某些实施方案中，E-10-0H-NT组合物包括基本上对映体纯的(-)-E-10-0H-NT。在某些实施方案中，E-10-0H-NT组合物包括对映体纯的(-)-E-IO-OH-NT。已知对用AT和/或NT治疗响应的一种重要类型的疾病或适应症是精神疾病。这样的精神疾病或适应症的特定实例包括但不限于在DiagnosticandStatisticManualofMentalDisordersIV(精神障碍的诊断与统计手册IV)(文本修订2000;下文中被称为"DSM-IV")中被归类为以下的多种精神疾病和适应症心境障碍(例如，抑郁)、焦虑障碍(例如，0CD)、进食障碍(例如，神经性厌食和神经性贪食)、冲动性障碍(例如，拔毛狂)、睡眠障碍(例如，与阿片样物质脱瘾相关的失眠)、人格障碍(例如，ADHD)以及躯体形式障碍(例如，某些类型的疼痛)。已知对用AT和/或NT治疗响应的另一种重要类型的疾病或适应症是疼痛，疼痛包括急性疼痛和慢性疼痛，无论起源于伤害性的(例如躯体的或内脏的)或非伤害性的(例如神经性的或交感神经的)(以下进一步讨论)。预期所有这些疾病或适应症均对用本文所述的E-10-0H-NT组合物的多种实施方案治疗响应。并且，如上所述，由于(-)-E-10-0H-NT对&组胺能受体的想不到的低的对抗性质(antagonisticproperty)和以下进一步讨论的其他想不到的与未被认识到的性质，所以期望可获得具有比用AT和/或NT治疗较低的不利副作用的治疗。当用于治疗这些多种疾病或适应症时，E-IO-OH-NT组合物可作为单一疗法而单独使用，或可选择地，它们可联合或伴随其他治疗而使用。例如，当用于治疗特定的精神疾病或适应症时，E-IO-OH-NT组合物可联合或伴随可用于治疗相同的精神疾病或适应症的另一治疗剂而施用。当用于治疗特定类型的疼痛时，E-IO-OH-NT组合物可联合或伴随可用于治疗相同类型的疼痛的另一治疗剂而施用。然而，这样的联合治疗或伴随治疗不限于可用于治疗相同适应症的化合物的组合。在某些实施方案中，联合或伴随治疗剂而施用E-IO-OH-NT组合物可以是有用的或期望的，所述治疗剂不能治疗正在用E-IO-OH-NT组合物治疗的疾病或病症。在某些实施方案中，联合或伴随其他治疗而施用的E-IO-OH-NT组合物包括富含(_)对映体的E-10-0H-NT。在某些实施方案中，E-IO-OH-NT组合物包括基本上对映体纯的(-)-E-10-0H-NT。在某些实施方案中，E-IO-OH-NT组合物包括对映体纯的(-)-E-10-0H-NT。合适的组合的代表性的非限制性的实例在后面的部分中更详细地讨论。尽管不期望受任何工作原理所束缚，但认为AT和NT抑制诸如NE和/或5HT运载体的一元胺运载体的能力部分地是其许多治疗性质的原因。在本领域中有足够的先例可循，至少以下疾病或适应症响应于用NE和/或5HT运载体的抑制剂治疗泌尿病症如尿失禁；心境障碍如抑郁和季节性情感障碍(SAD);认知障碍如痴呆；精神障碍如精神分裂症和躁狂症；焦虑障碍；人格障碍如ADHD;进食障碍如神经性厌食和神经性贪食；由滥用药物或物质而成瘾造成的化学品依赖性，如对尼古丁、酒精、可卡因、海洛因、苯巴比妥和苯并二氮革类的成瘾；停药综合征；内分泌絮乱如高泌乳素血症；冲动性障碍如拔毛狂和偷窃狂；抽动障碍如图雷特综合征；胃肠道病症如肠易激综合征(IBS);肠梗阻、胃轻瘫、消化性溃疡、胃食管反流疾病(GORD，或其同义词GERD)、肠胃气胀和其他功能性肠障碍如消化不良(例如，非溃疡性消化不良(NUD))和非心源性胸痛(NCCP);血管病症，包括诸如在大脑脉管系统中的血管痉挛；和混杂的其他病症，包括帕金森病、休克和高血压、性功能障碍、经前期综合征和纤维肌痛综合征。如上所述，(-)-E-10-0H-NT还抑制NE运载体和5HT运载体以及NE和/或5HT的摄取。因此，在又一方面中，本公开提供了抑制NE和/或5HT的摄取的方法。所述方法通常包括使NE运载体和/或5HT运载体与有效抑制NE和/或5HT的摄取的量的(_)-E-IO-OH-NT相接触。在某些实施方案中，所述方法在不存在AT和NT下实施。在某些实施方案中，使NE运载体和/或5HT运载体与如本文所述的E-10-0H-NT组合物相接触。在某些实施方案中，所述E-10-0H-NT组合物包括富含(-)对映体的E-10-0H-NT。在某些实施方案中，所述E-10-0H-NT组合物包括基本上对映体纯的(-)-E-10-0H-NT。在某些实施方案中，所述E-10-0H-NT组合物包括对映体纯的(-)-E-10-0H-NT。所述方法可采用分离的运载体或表达一种或两种运载体的细胞在体外实施，或者作为针对治疗至少部分地由调节异常的NE和/或5HT的摄取或再摄取介导的疾病或病症的治疗方法而在体内实施。至少部分地由调节异常的NE和/或5HT的摄取或再摄取介导的疾病或病症的特定实例包括但不限于以上列出的那些疾病或病症。历史上，包括抑制NE(NRI)和/或5HT(SRI)的再摄取的那些抗抑郁药的抗抑郁药已被用作用于治疗急性疼痛和慢性疼痛的一线治疗，所述疼痛是起源于伤害性的或非伤害性的，例如，神经病、疱疹后神经痛(PHN)、与纤维肌痛相关的疼痛、与肠易激综合征相关的疼痛和间质性膀胱炎(Sindrup&Jensen,1999;Collins等人，2000;Crowell等人，2004)。近期的研究系统评价了对于在疼痛的啮齿动物模型中的最大功效所需的NE运载体和/或5HT运载体的相对活性(Leventhal等人，2007)。观察到的作用重现了对于治疗神经性疼痛病状临床观察到的那些作用。换句话说，对NE运载体具有较大亲和力的化合物在治疗疼痛中更有效，而对5HT运载体具有更大亲和力的化合物具有有限的功效(见，例如Max等人，1992;Collins等人，2000)。实际上，在比较四环NRI马普替林与SRI帕罗西汀的双盲、安慰剂对照的头接头研究中，对于被随机化为马普替林(45%)的研究完成者，相比于帕罗西汀(26%)或安慰剂(27%)，疼痛强度的降低显著较大(Atkinson等人，1999)。近来，度洛西汀，即在5HT运载体和NE运载体中均具有功效的双SRI和NRI，是被证明用于治疗糖尿病神经病变的第一个再摄取抑制剂(Bymaster等人，2005;Goldstein等人，2005)。本文说明的(_)-E-10-0H-NT的NRI活性使该化合物理想地适于治疗许多不同类型的疼痛综合征。实际上，在由申请人实施的并且在本文报导的试验中，(-)-E-10-0H-NT在伤害性炎性疼痛(见实施例6、15和16)和非伤害性神经性疼痛(见实施例5和17-20)的疼痛的啮齿动物模型中表现出强大的治疗功效。在两种模型中，对于(-)-E-10-0H-NT观察到的功效与AT的功效相当。因此，在又一方面中，本公开提供了治疗包括人类的哺乳动物中疼痛的方法。所述方法通常包括对患有疼痛的、包括人类的哺乳动物施用有效治疗该疼痛的量的本文所述的E-10-0H-NT组合物。在某些实施方案中，所述E-10-0H-NT组合物包括在对映体上富含(-)对映体的E-10-0H-NT。在某些实施方案中，所述E-10-0H-NT组合物包括基本上对映体纯的(-)-E-10-0H-NT。在某些实施方案中，所述组合物包括对映体纯的(-)-E-10-0H-NT。所述方法可用于治疗多种不同类型的疼痛综合征，疼痛综合征包括起源于伤害性的(例如躯体的或内脏的)或起源于非伤害性的(例如神经性的或交感神经的)急性疼痛或慢性疼痛。在某些实施方案中，所述疼痛是伤害性疼痛，其包括但不限于，炎性疼痛如与IBS或类风湿性关节炎相关的炎性疼痛、与癌症相关的疼痛和与骨关节炎相关的疼痛。在某些实施方案中，所述疼痛是非伤害性疼痛，其包括但不限于，神经性疼痛如疱疹后神经痛(PHN)、三叉神经痛、病灶周围神经损伤(focalperipheralnerveinjury)、痛性感觉缺失、中枢疼痛(例如，中风后疼痛、由于脊髓损伤的疼痛或与多发性硬化相关的疼痛)和周围神经病(例如，糖尿病神经病变、遗传的神经病或其他获得性神经病)。E-10-0H-NT组合物可单独施用，或者它可以联合或伴随可用于治疗疼痛或其他适应症的一种或多种其他药物而施用。在后面的部分中提供可以在疼痛治疗方案或管理方案中联合或伴随E-10-0H-NT组合物使用的药物的特定非限制性的实例。期望本文所述的E-10-0H-NT组合物提供超过目前用于治疗和/或管理疼痛且特9别是神经性疼痛综合征的药物的显著优势。用于治疗疼痛的最常见的三环抗抑郁药对抗^组胺能受体，并因此与显著的体重增加和镇静作用相关。如上所述，(_)-E-10-0H-NT显著较小程度地对抗该受体，并已证明在镇静的啮齿动物模型中、以在体内有效治疗伤害性炎性疼痛和非伤害性神经性疼痛的本文所说明的(_)-E-10-0H-NT的剂量不会诱导镇静。因此，本文所述的E-10-0H-NT组合物提供了一种治疗或管理疼痛同时使体重增加和镇静最小化的方法。当用于治疗疼痛或本文所述的其他多种疾病和适应症中的任一种时，期望本文所述的E-10-0H-NT组合物提供另外的显著优势。例如，AT和NT是已知的细胞色素P45。同工酶CYP2D6和CYP2C19的抑制剂，并因此被禁忌与由这些酶代谢的若干重要的药物一起使用。已知至少部分地由CYP2D6代谢的并因此可能被禁忌与AT和NT—起使用的示例性的药物包括s-美托洛尔、普罗帕酮、噻吗洛尔、氯米帕明、地昔帕明、丙咪嗪、帕罗西汀、氟哌啶醇、利培酮、硫利达嗪、阿立哌唑、可待因、右美沙芬、度洛西汀、氟卡尼、美西律、昂丹司琼、他莫昔芬、曲马朵和文拉法辛。已知至少部分地由CYP2C19代谢的并因此可能被禁忌与AT和NT一起使用的示例性的药物包括奥美拉唑、兰索拉唑、泮托拉唑、雷贝拉唑、地西泮、苯妥英、苯巴比妥、氯米帕明、环磷酰胺和黄体酮。由本申请人获得的并且在本文报导的数据(在实施例部分中更详细地讨论)说明了(_)-E-10-0H-NT是比AT和NT低效的CYP2C19和CYP2D6的抑制剂。部分地基于该令人惊讶的发现，认为本文所述的E-10-0H-NT组合物将比AT和/或NT治疗产生更少不期望的临床结果，特别是当联合或伴随至少部分地由这些细胞色素P^同工酶代谢的药物使用时。本申请人还令人惊奇地发现，(_)-E-IO-OH-NT具有比AT和NT对蕈毒碱性受体显著较低的亲和力、显示出比AT和NT对人类Ether-a-Go-go相关基因(hERG)钾通道较低的抑制，并且是比AT和NT对包括a工肾上腺素能受体和a2肾上腺素能受体的肾上腺素能受体较少对抗的。期望所有这些性质相比于AT和NT治疗产生改善的临床益处。例如，蕈毒碱性受体的抑制已经与口干、便秘和视力模糊相关联。已报导02肾上腺素能受体的激动剂产生痛觉缺失(Ongioco等人，2000;Asano等人，2000;Hall等人，2001)，而拮抗剂抑制这些镇痛作用(Kalso等人，1991;Millan&Colpaert1991;Petrovaara等人，1990)。尽管不期望受任何工作原理所束缚，但期望用本文所述的E-10-0H-NT组合物治疗的患者将显示出比用AT和/或NT治疗的患者更少的不期望的副作用。特别地，期望用本文所述的E-10-0H-NT组合物治疗的患者比用AT和NT治疗的患者将经历除了以上讨论的降低的药物-药物相互作用和镇静与食欲影响以外，较低水平的心脏毒性和便秘。实际上，以相等的口服剂量，(_)-E-10-0H-NT在胃肠运动的啮齿动物模型中比AT和NT产生少得多的便秘。不同于AT和NT，(-)-E-IO-OH-NT不会对抗a2肾上腺素能受体。因此，理论上，还预期本文所述的E-IO-OH-NT组合物在治疗疼痛方面优于AT和NT。实际上，如图3和图4所说明，(-)-E-10-0H-NT在伤害性疼痛和非伤害性疼痛的啮齿动物模型中被证明优于AT。虽然在文献中已报导了(士)-E-10-0H-NT的合成(Remy等人，1973)，但迄今为止，单独的(+)对映体和(_)对映体的手性合成从未被报导。因此，仍在另一方面中，本公开提供了合成E-10-0H-NT的(+)对映体和(-)对映体的手性特异性方法、可用于所述方法的中间体和合成所述中间体的手性特异性方法。在某些实施方案中，可用于(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT的手性特异性合成的中间体分别为E-5-(Y-溴亚丙基)-10，ll-二氢-10-羟基-5H-二苯并[a，d]-环庚烯的(+)对映体和(_)对映体，在图1A中分别表示为化合物(+)-7和(-)-7。还未直接确定化合物7的(+)对映体和(-)对映体的手性10-碳的绝对构型。因此，连接羟基与该手性碳原子(用星号表示手性)的键用未指定的立体化学说明。然而，化合物7的手性可由(-)-E-10-0HNT的绝对立体化学(在图6中描述)来推断，(-)-E-10-0HNT的绝对立体化学已通过(-)-E-10-0H-NT的苹果酸盐的X射线结晶学分析而确定。合成手性中间体(+)-7和(-)-7的方法通常包括在手性特异性噁唑硼烷(oxazaborolidine)催化剂存在下还原E_5_(Y_溴亚丙基)-10，11_二氢-10-氧代-5H-二苯并[a，d]-环庚烯(在图1A中表示为化合物6)。合适的手性特异性噁唑硼烷催化剂的非限制性的示例性实施方案在图1B中说明。在某些实施方案中，该手性特异性噁唑硼烷催化剂是(7aS)_3-甲基-1，1-二苯基全氢化-3-硼-2-氧杂吡咯并吡咯烷((7aS)_3_methyl_l，l_diphenylperhydro_3_bora_2_oxapyrrolizine)("7aS_CBS，，；在图1A中的化合物S-10)，得到(-)-7。在某些实施方案中，该手性特异性噁唑硼烷催化剂是(7aR)-3-甲基-1，1-二苯基全氢化-3-硼-2-氧杂吡咯并吡咯烷("7aR-CBS";在图IB中的化合物R-10)，得到(+)-7。(+)-E-10-0H-NT禾P(-)-E-10-0H-NT可分别由中间体(+)_7禾P(-)-7、通过使该中间体与甲胺反应而合成。利用CBS作为手性特异性催化剂的合成的特定实施方案在图1A中说明。在实施例部分提供的反应条件下利用该方案可以容易地、高收率地合成(+)-E-10-0H-NT禾P(-)-E-IO-OH-NT，且对映体纯度大于99%。7.附图简述图1A提供了可用于合成对映体纯的(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT的示例性方案；图1B提供了可用于图1A中说明的合成方案的手性特异性噁唑硼烷催化剂的示例性实施方案；图2提供了说明(-)-E-10-0H-NT在镇静的大鼠旋转棒模型中相对于AT和NT的非镇静作用的图；图3提供了说明(_)-E-10-0H-NT在伤害性炎性疼痛的啮齿动物模型中相对于AT的优越的抗痛觉过敏功效的图；图4提供了说明(-)-E-10-0H-NT在非伤害性神经性疼痛的啮齿动物模型中相对于AT的优越的抗异常性疼痛功效(antiallodynicefficacy)的图；图5提供了说明(_)-E-10-0H-NT在GIT的啮齿动物模型中相对于AT和NT在胃肠道移动性(gastrointestinaltractmobility)的优越性质的图；图6描述了通过X射线结晶学分析确定的(_)-E-10-0H-NT的绝对构型；图7提供了说明(-)-E-10-0H-NT在非伤害性神经性疼痛的啮齿动物模型中相对于(+)-E-10-0H-NT、外消旋的(士)-E-10-0H-NT和AT的优越的抗异常性疼痛功效的图；图8提供了说明口服施用的(-)-E-10-0H-NT在非伤害性神经性疼痛的啮齿动物模型中相对于阿米替林的抗异常性疼痛功效的图；图9提供了描述在伤害性炎性疼痛的啮齿动物模型中对于阿米替林的FCA和旋转棒剂量响应关系的曲线；图10提供了描述在伤害性炎性疼痛的啮齿动物模型中对于(-)-E-10-0H-NT的FCA和旋转棒剂量响应关系的曲线；图11提供了说明(-)-E-10-0H-NT在伤害性炎性疼痛的啮齿动物模型中的剂量相关的抗痛觉过敏活性的图；图12提供了说明由(+)-E-10-0H-NT在伤害性炎性疼痛的啮齿动物模型中表现出的基本上的抗痛觉过敏活性的缺乏的图；图13提供了说明E-10-0H-NT的对映体在伤害性炎性疼痛的啮齿动物模型中的有差异的抗痛觉过敏活性的图；图14提供了在伤害性炎性疼痛的啮齿动物模型中比较E-10-0H-NT的对映体的抗痛觉过敏活性的图；图15A提供了说明阿米替林(AT)在抑郁的大鼠强迫游泳试验模型中的活性的图；图15B提供了说明(-)-E-10-0H-NT在抑郁的大鼠强迫游泳试验模型中的活性的图；以及图15C提供了说明(+)-E-10-0H-NT在抑郁的大鼠强迫游泳试验模型中在所测试的剂量下不显示统计学上显著的活性的图。8.详细描述8.1E-10-0H-NT化合物和组合物本公开涉及包括如下所示的、众所周知的三环抗抑郁药阿米替林(AT)和去甲替林(NT)的常见的主要代谢产物的E-几何异构体((S/R)-5-[3-甲基氨基-丙-(E)-亚基]-10，11-二氢-5H-二苯并[a，d]环庚烯-10-醇)(本文中称为"E-10-0H-NT")的组合物由于在10-位的碳(用星号表示)的手性，该E-几何异构体包括两种对映体(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT。由x射线结晶学分析确定的(-)异构体的手性10-碳的绝对构型在图6中描述。因此(_)异构体和(+)异构体的手性如下描述<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>(-)-E-10-0H-NT<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>(+)-E-IO-OH-NT。在本文所述的多种组合物中，E-10-0H-NT化合物可以富含(_)对映体的非外消旋混合物存在、以基本上对映体纯的(_)对映体存在或以对映体纯的(_)对映体存在。在一个特定的实施方案中，本文所述的E-10-0H-NT组合物包括为基本上对映体纯的(-)-E-10-0H-NT的E-10-0H-NT。在另一特定的实施方案中，本文所述的E-IO-OH-NT组合物包括为对映体纯的(-)-E-10-0H-NT的E-IO-OH-NT。如本文所使用的，当特定对映体超过另一对映体过量存在时，即，当该对映体构成组合物中的总E-IO-OH-NT的多于50%时，该组合物是"富含"特定对映体的。富含特定对映体的组合物将通常包括至少约60%、70%、80%、90%或更多的特定对映体。特定对映体的富含量可使用由本领域技术人员常规使用的常规分析方法来确定，常规分析方法包括在手性位移试剂存在下的NMR光谱法、使用手性柱的色谱分析和使用手性柱的高压液相色谱分析。在某些实施方案中，单一对映体基本上不含相应的对映体。"基本上不含"是指组合物包括少于约10%特定的、不期望的对映体，如使用本领域技术人员常规使用的常规分析方法所确定，例如以上提及的方法。在某些实施方案中，不期望的对映体的量可少于10%，例如少于9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%或更少。包含至少约95%特定对映体的富含对映体的组合物在本文中被称为"基本上对映体纯的"。包含至少约99%特定对映体的组合物在本文中被称为"对映体纯的"。在某些实施方案中，本文所述的富含对映体的E-10-0H-NT组合物包含(-)-E-10-0H-NT的纯度为约60X、70X、80X或90X的E-10-0H-NT。换句话说，(-)对映体以约60%ee、70%ee、80%ee或90%ee范围内的对映体过量存在。在某些特定实施方案中，本文所述的基本上对映体纯的E-10-0H-NT组合物包含(-)-对映体的纯度为约95%-98%的￡-10-011-肌；换句话说，(-)-E-10-0H-NT以约95%ee-98%ee范围内的对映体过量存在。在某些特定实施方案中，本文所述的对映体纯的E-10-0H-NT组合物包含(-)对映体的纯度为约99.0%至100%的E-10-0H-NT，换句话说，(-)-E-10-OH-NT以约99.0%ee至100%ee范围内的对映体过量存在。特定的、非限制性的示例性实施方案包括这样的E-10-0H-NT组合物，其中对于所述E-10-0H-NT，(-)对映体的纯度为约99.0%、99.1%、99.2%、99.3%、99.4%、99.5%、99.6%、99.7%、99.8%、99.9%或100%。在体内，三环抗抑郁药的羟基代谢产物是由多晶型的细胞色素P45。酶CYP2D6形成的。NT被认为是通过所述酶以高度立体特异的方式被羟基化为E-10-0H-NT的(-)对映体(见，例如，Nordin&Bertilsson，1995)因此，理论上，(-)-E-10-OH-NT可以100%的对映体纯度从生物来源中分离出来。相反，技术人员将理解，通过合成方法产生的(-)-E-10-0H-NT的组合物通常不会获得100%的对映体纯度。例如，在实施例部分中描述的合成方法中，通常获得约90%ee至99.5%ee范围内的对映体纯度的(_)对映体。除非另外特别说明，本文所述的对映体纯的E-10-0H-NT组合物意图包括生物源和合成源的对映体纯的(_)-E-IO-OH-NT。因此，本文所述的对映体纯的E-10-0H-NT组合物可包含从约99%至高达100%的对映体纯的(+)-E-10-0H-NT。具有生物源(即，从生物来源分离的)的并因此可包含100%(-)-E-10-0H-NT的对映体纯的E-10-0H-NT组合物的实施方案在本文中被称为"生物衍生的对映体纯的(-)-E-10-0H-NT组合物"。类似地，这样的E-10-0H-NT在本文中被称为"生物衍生的对映体纯的(-)-E-10-0H-NT"。具有合成源的对映体纯的E-10-0H-NT组合物的实施方案，包括借助于诸如CYP2D6的手性特异性生物催化剂而来自体内制备的、并因此包含至少约99%但通常小于100%(-)-E-10-0H-NT的组合物，它们在本文中被称为"合成衍生的对映体纯的(_)-E-10-0H-NT组合物"。类似的，这样的E-10-0H-NT在本文中被称为"合成衍生的对映体纯的(-)-E-10-OH-NT"。合成衍生的对映体纯的(-)-E-lO-OH-NT通常包含约99%ee至99.9%ee范围内的对映体过量的(_)对映体。取决于期望的用途，E-IO-OH-NT可以游离碱存在于组合物中，或以诸如酸加成盐的盐的形式存在于组合物中。在某些实施方案中，E-10-0H-NT以药学上可接受的盐的形式存在于组合物中。通常，药学上可接受的盐是这样的盐基本上保持母体化合物的期望的药理学活性中的一种或多种并且适于施用于人类。药学上可接受的盐包括与无机酸或有机酸形成的酸加成盐。适于形成药学上可接受的酸加成盐的无机酸包括，作为实例且不是限制，氢卤酸(例如，盐酸、氢溴酸、氢碘酸，等)、硫酸、硝酸、磷酸及类似的酸。适于形成药学上可接受的酸加成盐的有机酸包括，作为实例且不是限制，乙酸、三氟乙酸、丙酸、己酸、环戊烷丙酸、乙醇酸、草酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、拧檬酸、棕榈酸、苯甲酸、3-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、烷基磺酸(例如，甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙烷-二磺酸、2-羟基乙磺酸等)、芳基磺酸(例如，苯磺酸、4-氯苯磺酸、2_萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟脑磺酸等)、4-甲基双环[2，2，2]-辛-2-烯-1-羧酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、十二烷基硫酸、葡糖酸、谷氨酸、羟基萘甲酸、水杨酸、硬脂酸、粘康酸及类似的酸。在某些实施方案中，E-10-0H-NT以有机酸加成盐存在于组合物中，例如，与选自D-苹果酸、L-苹果酸和琥珀酸的有机酸形成的酸加成盐。化合物的不同的盐形式可表现出不同的性质，例如不同的毒性、溶解性、稳定性、吸湿性等，这是本领域众所周知的。已发现与琥珀酸形成的(-)-E-10-0H-NT酸加成盐(琥珀酸盐)在盐水中的溶解度(18mg/ml)高于与马来酸形成的(-)-E-10-0H-NT盐在盐水中的溶解度(4.4mg/ml)，并且在性质上是晶体的和不吸湿性的。因此，虽然外消旋的(士)-E-10-0H-NT的马来酸盐形式的用途先前已被用于对健康志愿者给药(Bertilsson等人，1986)，但预期(-)-E-10-0H-NT的琥珀酸盐可具有优越的性能。例如，马来酸先前已与急性肾小管坏死毒性相关(Everett等人，1993)。期望琥珀酸盐将比马来酸盐将具有优越的ADME和毒理学安全性的性质。因此，在某些实施方案中，构成组合物的(-)-E-10-0H-NT是琥珀酸盐。无论是游离碱的形式或是盐的形式，E-10-0H-NT可以无水形式存在于组合物中，或者它可以是溶剂合物和/或水合物的形式。使成溶剂合物的溶剂(solvatingsolvent)的强度和特性将部分地取决于用于合成并储存E-10-0H-NT化合物的条件。除非另外特别说明，本文使用的表达"E-10-0H-NT"、(士)-E-10-0H-NT、(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT意图包括该化合物的所有的盐和/或溶剂合物和/或水合物的形式。8.2合成方法(-)-E-10-0H-NT化合物可使用文献中描述的方法来合成或制备，例如，外消旋的(士)-E-10-0H-NT可按照Bertrand等人，1994和Lassen等人，1983中所描述的来合成，上述文献的公开内容在此通过引用并入。富含对映体的(-)-E-10-0H-NT的组合物可从这样的外消旋的混合物、通过使用手性分离的标准方法分离所需的对映体而制备(见，例如，ChiralS印arationTechniques:APracticalApproach(手性分离技术一禾中实用的方法)2001)。本公开的另一方面提供了使用手性特异性的合成方法来合成对映体纯的E-10-0H-NT的异构体的方法。可用于合成对映体纯的(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT的方法的示例性实施方案在图1A中说明。根据图lA，5-(Y-溴亚丙基)-10，ll-二氢-10-氧代-5H-二苯并[a，b]-环庚烯的E-异构体(化合物6)在手性特异性的噁唑硼烷催化剂(以化合物S-10和R-10表示)存在下被还原。如所说明的，催化剂的S-异构体(S-10)得到5-(Y-溴亚丙基)-10，ll-二氢-10-氧代-5H-二苯并[a，b]-环庚烯的(-)对映体(化合物(-)-7)，并且R-异构体(R-10)得到(+)-异构体，(+)-7。然后，这些中间体可通过与甲胺反应而被转化为其相应的(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT产物。化合物6起始物料可使用文献(见，例如，Bertrand等人，1994;Lassen等人，1983，其公开内容通过引用并入)中描述的方法来合成。可选择地，它们可如图1A中所说明的来合成。每个说明的步骤的特定条件在实施例部分中提供。在图1A中说明了特定手性特异性的噁唑硼烷催化剂。还可使用其他手性特异性的噁唑硼烷催化剂。特异性的代表实例在图1B中说明(在图1B中，R是氢或甲基)并且在以下文献中描述:Itsuno等人，1983(催化剂10a)，Corey等人，1987(催化剂10b)，Hong等人，1994(催化剂10c)，Quallich等人，1993(催化剂10d)和Berenguer等人，1994(催化剂10e)。通过CBS还原系统获得的不对称诱导高度受到连接至硼原子的不同基团的影响。虽然最常用的是B-氢或B-甲基，但该基团可以被调节以适应特定的基质。连接至硼原子的基团将酮导引以便以这样的方式结合在B-R基团与该酮的小的取代基之间存在最小的相互作用(关于机械研究的细节，见Kim等人，2006)。可在其下进行还原的一般条件在上述参考文献中描述并且还在以下文献中描述Corey等人，1991;Corey等人，1992;Corey等人，1998;Paterson等人，2005;Zartman等人，2005;Tagat等人，2004;Duquette等人，2003;Yanagi等人，2003;和Coe等人，2003，其公开内容在此通过引用并入。当在-20。C下，在THF中，在硼烷-二甲基硫醚络合物存在下进行时，反应可使用图1A中说明的特定催化剂以高收率以及超过99%的对映体纯度而实施，如实施例部分所描述的。8.3化合物与组合物的活性与用途如在实施例4和实施例14中更详细地描述的，与AT和NT类似，(-)-E-IO-OH-NT对去甲肾上腺素("NE")运载体具有强的亲和力，并且是NE摄取的有效抑制剂。(-)-E-10-0H-NT还结合5-羟色胺运载体并且抑制5HT的摄取，虽然具有比对于NE所观察到的功效小的功效。文献充分记载了抑制NE和/或5HT的再摄取以治疗多种疾病和病症的化合物的用途。例如，AT、NT、地昔帕明、度洛西汀、文拉法辛、西酞普兰和simbalta被证实用于治疗抑郁并且具有另外的非处方适应症用途；并且帕罗西汀和舍曲林被证实用于治疗重度抑郁症、OCD、惊恐性障碍、创伤后应激障碍、经前焦虑性障碍和社交焦虑障碍，并且还具有另外的非处方适应症用途。在文献中(见，例如，Nordin等人，1987b)已确定了外消旋的E-IO-OH-NT穿过血脑屏障的能力。因此，期望本文所述的E-10-0H-NT组合物可用于治疗至少部分地由调节异常的NE再摄取介导的任何疾病和/或适应症。在某些特定的实施方案中，期望本文所述的E-10-0H-NT组合物可用于治疗响应于用其他NRI和SNRI剂治疗的许多不同的疾病，所述其他NRI和SNRI剂包括，作为实例且不是限制，AT、NT、阿托西汀、瑞波西汀和马普替林。已知至少部分地由调节异常的NE再摄取介导的疾病和病症以及已知响应于用NRI和SNRI化合物治疗的疾病和病症包括但不限于，泌尿病症，包括尿失禁；心境障碍如抑郁和季节性情感障碍(SAD);认知障碍如痴呆；精神障碍如精神分裂症和躁狂症；焦虑障碍；人格障碍如ADHD;进食障碍如神经性厌食和神经性贪食；由滥用药物或物质而成瘾造成的化学品依赖性，如对尼古丁、酒精、可卡因、海洛因、苯巴比妥和苯并二氮萆类的成瘾；停药综合征；内分泌絮乱如高泌乳素血症；冲动性障碍如拔毛狂和偷窃狂；抽动障碍如图雷特综合征；胃肠道病症如肠易激综合征(IBS);肠梗阻、胃轻瘫、消化性溃疡、胃食管反流疾病(GORD，或其同义词GERD)、肠胃气胀和其他功能性肠障碍如消化不良(例如，非溃疡性消化不良(NUD))和非心源性胸痛(NCCP);血管病症，包括诸如在大脑脉管系统中的血管痉挛；和混杂的其他病症，包括帕金森病、休克和高血压、性功能障碍、经前期综合征和纤维肌痛综合征。实际上，如实施例21中所说明的，(-)-E-10-0H-NT在抑郁的啮齿动物模型中显示出功效。疼痛也被认为是至少部分地由调节异常的NE和/或5-HT再摄取介导的。实际上，许多NRI和/或SRI化合物也用于非处方适应症以治疗疼痛。疼痛通常被理解为指不愉快的感官经历或情绪经历的感知或状况，可以与或可以不与对组织的实际损伤相关。疼痛通常被理解为包括两种宽泛的种类起源于伤害性的(例如躯体的或内脏的)或非伤害性的(例如神经性的或交感神经的)急性疼痛和慢性疼痛(见，例如，Buschmann等人，2002;Jain，2000)。急性疼痛通常包括由以下引起的伤害性疼痛拉伤/扭伤、烧伤、心肌梗死、急性胰腺炎、外科手术、创伤和癌症。慢性疼痛通常包括伤害性疼痛和非伤害性疼痛，所述伤害性疼痛包括但不限于，炎性疼痛如与IBS或类风湿性关节炎相关的炎性疼痛、与癌症相关的疼痛和与骨关节炎相关的疼痛；所述非伤害性疼痛，包括但不限于，神经性疼痛如疱疹后神经痛(PHN)、三叉神经痛、病灶周围神经损伤、痛性感觉缺失、中枢疼痛(例如，中风后疼痛、由于脊髓损伤的疼痛或与多发性硬化相关的疼痛)和周围神经病(例如，糖尿病神经病变、遗传的神经病或其他获得性神经病)。在实施例部分提供的动物数据证实(-)-E-10-0H-NT在治疗伤害性炎性疼痛和非伤害性神经性疼痛中均有效。因此，在某些实施方案中，本文所述的E-10-0H-NT组合物用于治疗疼痛，所述疼痛包括以上讨论的多种类型的疼痛。如上所述，在某些实施方案中，这样的组合物包括基本上对映体纯的(-)-E-10-0H-NT。在某些实施方案中，这样的组合物包括对映体纯的(-)-E-10-0H-NT。如本文所说明的，外消旋的(士)-E-10-0H-NT、(+)-E-IO-OH-NT和(-)-E-10-0H-NT显示出对去甲肾上腺素和5-羟色胺运载体相近的亲和力(实施例14)，并且E-10-0H-NT的(-)异构体和(+)异构体对6种不同类型的受体和运载体显示出相近的体外活性，并且还对细胞色素P45。功能(实施例10)和hERG离子通道(实施例11)显示出相近的体外活性，所述受体和运载体即去甲肾上腺素运载体(实施例4和实施例14)、5-羟色胺运载体(实施例4和实施例14)、多巴胺运载体(实施例4)、组胺能受体(实施例7)、a肾上腺素能受体(实施例9)和蕈毒碱性受体(实施例12)。鉴于这些数据，特别是当共同考虑时，预期外消旋物与(+)对映体和(_)对映体将具有相近的体内功效。虽然有这一期望，但本文提供的数据出人意料地说明了，E-10-0H-NT的(-)对映体在疼痛的啮齿动物模16型中比外消旋物和(+)对映体两者在治疗上更有效，并且在抑郁的啮齿动物模型中比(+)对映体更有效。更特别地，在所测试的剂量中(l)(-)-E-10-0H-NT在非伤害性神经性疼痛的啮齿动物L-5单神经结扎模型中比外消旋的(士)-E-10-0H-NT和(+)-E-10-0H-NT两者都更有效(实施例15);(2)(-)-E-10-0H-NT在FCA诱导的伤害性疼痛的痛觉过敏测定中比(+)-E-10-0H-NT更有效(实施例19和实施例20);并且(3)(_)-E-10-OH-NT在抑郁的大鼠强迫游泳试验模型中比(+)-E-10-0H-NT更有效(实施例21)。这些发现不能基于由外消旋的E-10-OH-NT及其(+)对映体和(-)对映体产生的体外数据而预测。实际上，基于在疼痛的大鼠L5SNL模型中采用(士)-E-10-OH-NT观察到的功效的缺乏，没有理由在该疾病的体内动物模型中或任何其他的体内动物模型中测试单独的对映体。当用于治疗多种疾病或适应症时，E-10-0H-NT组合物通常将以有效治疗该特定疾病或适应症的量而施用。如技术人员将认识到的，被理解为"治疗有效的"和提供治疗益处的经常取决于特定的疾病或适应症。技术人员基于对特定适应症的长期确立的标准将能够确定治疗有效量。通常，组合物的"治疗有效的"量是这样的量根除或改善正在治疗的潜在的(underlying)疾病或适应症的量和/或根除或改善与潜在的病症相关的症状中的一种或多种以便患者报告感觉或状况上的改善的量，尽管患者仍可能遭受潜在的疾病或适应症。治疗益处还包括中断或减缓疾病或适应症的进展，不管是否实现了改善。在抑郁的情形中，治疗有效量是根除或改善抑郁或其症状的组合物的量，所述症状包括但不限于，改变心境、强烈的悲伤感、绝望、精神迟缓(mentalslowing)、注意力降低、悲观的烦恼、激动、自我贬低、失眠、食欲缺乏、重量减轻、精力和性欲降低以及激素昼夜节律(hormonalcircadianrhythm)。在焦虑障碍的情形中，治疗有效量是根除或改善焦虑障碍或其症状之一的组合物的量，所述症状包括但不限于，害怕对自己的行为失控、起因于无明显原因的恐惧感、担心大灾难、不安、神经质、对未来事件的恼人的不确定性、头痛、疲劳和亚急性的自发症状。在疼痛的情形中，治疗有效量是根除或改善疼痛或其症状的组合物的量，所述症状包括但不限于，剌痛感、烧灼感、触电感、痛(aching)、不适、酸痛、紧縮感(tightness)、僵硬、失眠、麻木和虚弱。8.4联合治疗AT和NT已与其他药剂联合用于治疗多种疾病和病症。例如，AT已与利眠宁联合用于治疗焦虑障碍和重度抑郁症，并且已与奋乃静联合用于治疗焦虑障碍、精神分裂症和重度抑郁症。此外，NT已与布替耐德(budenoside)联合用于治疗哮喘。已知AT、NT和本文所述的E-10-0H-NT组合物抑制NE和5HT的摄取，预期本文所述的E-10-0H-NT组合物也可用于联合治疗。当用于联合治疗时，本文所述的E-10-0H-NT组合物可联合其他药剂或作为其他药剂的佐剂而使用。当本文所述的E-10-0H-NT组合物与其他药剂联合使用时，这两种药剂可以单一药物组合物而施用，或者它们可以单独的药物组合物而施用。可通过相同的施用途径或通过不同的施用途径施用该两种组分。该两种组分还可互相同时地或按顺序地施用。因此，联合治疗的每种组分可以单独地施用但与其他组分的施用时间足够近以便提供所期望的效果。17虽然包括本文所述的E-10-0H-NT组合物的联合治疗可用于许多情形中，但与本文所述的E-IO-OH-NT组合物一起使用的其他药剂将取决于正在治疗的特定疾病或适应症。技术人员基于对特定适应症的长期确立的标准将能够确定什么其他药剂与本文所述的E-IO-OH-NT组合物联合使用。尽管不期望受到任何工作原理所束缚，但联合治疗可包括施用本文所述的E-IO-OH-NT组合物与已知抑制NE和5HT的再摄取的其他药剂。可选择地，联合治疗可包括施用本文所述的E-IO-OH-NT组合物与不会抑制NE和5HT的再摄取的药剂。因此，本文所述的E-10-0H-NT组合物可联合抑制NE和/或5HT的再摄取的其他药剂以及双重一元胺(dualmonoamine)和三重一元胺(triplemonoamine)摄取抑制剂以治疗抑郁。本文所述的E-10-0H-NT组合物还可联合选择性的5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI)以治疗抑郁，所述抑制剂例如但不限于，氟西汀、帕罗西汀、氟伏沙明、cit即rolam和舍曲林。用于治疗抑郁的联合治疗还可包括一元胺氧化酶抑制剂(MAOI)，例如但不限于，反苯环丙胺、苯乙肼和异卡波肼。可选择地，所述联合治疗可包括诸如但不限于，阿莫沙平、马普替林和曲唑酮的杂环抗抑郁药或诸如但不限于文拉法辛、奈法唑酮和米氮平的其他抗抑郁药。此外，用于治疗抑郁的联合治疗可包括本文所述的E-10-0H-NT组合物和诸如但不限于利眠宁的抗焦虑药、或诸如但不限于奋乃静的抗精神病药。期望本文所述的E-10-0H-NT组合物如同AT和NT—样可用于治疗焦虑障碍、精神分裂症和哮喘的联合治疗。在焦虑障碍的情形中，本文所述的E-10-0H-NT组合物可与诸如但不限于利眠宁的抗焦虑药联合。在精神分裂症的情形中，本文所述的E-10-0H-NT组合物可与已知治疗精神分裂症的诸如但不限于奋乃静的药剂联合。在哮喘的情形中，本文所述的E-10-0H-NT组合物可与已知治疗哮喘的诸如皮质激素类的药剂联合皮质激素类包括但不限于布替耐德。还期望本文所述的E-10-0H-NT组合物可用于治疗疼痛的联合治疗。因此，本文所述的E-IO-OH-NT组合物可与其他镇痛药联合，所述镇痛药包括但不限于，大麻素(ca皿abinoid)和阿片样物质。可适用于联合治疗的许多大麻素是可得到的。因此，联合治疗可包括选自A9-四氢大麻酚和大麻二酚及其混合物的大麻素。可选择地，本文所述的E-IO-OH-NT组合物可与至少一种阿片样物质联合使用。可适用于联合治疗以治疗疼痛的多种阿片样物质药是可得到的。同样地，联合治疗可包括选自但不限于以下的阿片样物质阿芬太尼、烯丙罗定、阿法罗定、阿尼利定、苄基-吗啡、贝齐米特、丁丙诺啡、布托啡诺、氯尼他秦、可待因、环佐辛、地素吗啡、右吗拉胺、地佐辛、地恩丙胺、二乙酰吗啡、双氢可待因、双氢吗啡、地美沙朵、地美庚醇、二甲噻丁、dio即hetylbutyrate、地匹哌酮、依他佐辛、依索庚嗪、乙甲噻丁、乙基吗啡、依托尼秦、芬太尼、海洛因、氢可酮、氢吗啡酮、羟哌替啶、异美沙酮、凯托米酮、左洛啡烷、左啡诺、左芬啡烷、洛芬太尼、洛哌丁胺、度冷丁(哌替啶)、美普他酚、美他佐辛、美沙酮、美托酮、吗啡、麦罗啡、纳布啡、那碎因、尼可吗啡、去甲左啡诺、去甲美沙酮、烯丙吗啡、去甲吗啡、norpinanone、鸦片、羟考酮、羟吗啡酮、阿片全碱、喷他佐辛、苯吗庚酮、非诺啡烷、非那佐辛、苯哌利定、匹米诺定、哌腈米特、proph印tazine、二甲哌替啶、丙派利定、丙吡胺、右丙氧芬、舒芬太尼、替利定、曲马朵、其非对映体、其药学上可接受的盐、其络合物；及其混合物。在某些实施方案中，所述阿片样物质选自吗啡、可待因、羟考酮、氢可酮、双氢可待因、右丙氧芬、芬太尼、曲马朵及其混合物。联合治疗的阿片样物质组分还可包括常规上可用于镇痛药和/或咳嗽_风寒-镇咳药(cough-cold-antitussive)组合产品的一种或多种其他活性成分。这样的常规成分包括例如，阿司匹林、扑热息痛、右美沙芬、苯丙醇胺、去氧肾上腺素、氯苯那敏、咖啡因和/或愈创甘油醚。可包括在阿片样物质组分中的典型的或常规的成分在例如Physicians'DeskReference(医师案头参考)，1999中描述，其公开内容以其整体据此通过引用并入本文。阿片样物质组分还可包括可被设计为增强该阿片样物质的镇痛功效和/或降低镇痛耐受发展(analgesictolerancedevelopment)的一种或多种化合物。这样的化合物包括例如，右美沙芬或其他NMDA拮抗剂(Mao等人，1996)、L_364，718和其他CCK拮抗剂(Dourish等人，1988)、N0S抑制剂(Bhargava等人，1996)、PKC抑制剂(Bilsky等人，1996)和强啡肽拮抗剂或抗血清(Nichols等人，1997)。前述文献中的每一个的公开内容均以其整体据此通过引用并入本文。可选择地，本文所述的化合物可与诸如以下的至少一种非阿片样物质镇痛药一起使用双氯芬酸、C0X2抑制剂、阿司匹林、扑热息痛、布洛芬、萘普生和类似物及其混合物。此外，在治疗疼痛的情形中，联合治疗可包括消炎药，其包括但不限于皮质激素类、氨基芳基羧酸衍生物，例如但不限于依托芬那酯、甲氯芬那酸、甲芬那酸、尼氟酸；芳基乙酸衍生物，例如但不限于阿西美辛、氨基苯酰基苯乙酸、桂美辛、氯吡酸、双氯芬酸、芬氯酸、苯克洛酸、芬克洛酸、芬替酸、葡美辛、伊索克酸、氯那唑酸、甲嗪酸、奥沙美辛、丙谷美辛、舒林酸、噻拉米特和托美丁；芳基丁酸衍生物，例如但不限于布替布芬和芬布芬；芳基羧酸，例如但不限于克力丹酸、酮咯酸和替诺立定；芳基丙酸衍生物，例如但不限于布氯酸、卡洛芬、非诺洛芬、氟诺洛芬、布洛芬、异丁普生、奥沙普秦、吡酮洛芬、吡洛芬、普拉洛芬、丙替嗪酸和噻洛芬酸；吡唑类，例如但不限于美比利唑；吡唑啉酮类，例如但不限于氯非宗、非普拉宗、莫非布宗、羟布宗、保泰松、苯基吡唑啉二酮(phenylpyrazolidininone)、琥布宗和噻唑丁炎酮；水杨酸衍生物，例如但不限于溴水杨醇、芬度柳、乙二醇单水杨酸酯、美沙拉秦、水杨酸l-萘酯、奥沙拉秦和柳氮磺吡啶；噻嗪甲酰胺类，例如但不限于屈噁昔康、伊索昔康和吡罗昔康；以及其他消炎药，例如但不限于e-乙酰氨基己酸、s-腺苷蛋氨酸、3-氨基-4-羟基丁酸、阿米西群、节达酸、布可隆、卡巴腙、联苯吡胺、地他唑、愈创蓝油烃、麦考酚酸的杂环氨基烷基酯及衍生物、萘丁美酮、尼美舒利、奥古蛋白、奥沙西罗、噁唑衍生物、瑞尼托林、哌福肟、2-取代的-4，6-二-叔丁基-s-羟基-l，3-嘧啶、普罗喹宗和替尼达普。8.5制剂和施用本文所述的(-)-E-10-0H-NT化合物或其药学上的盐可与基于所选的施用途径和按照例如Remington'sPharmaceuticalSciences(雷明顿的药物科学)，2005中描述的标准药学实践而选择的药物载体组合，该文献的公开内容以其整体据此通过引用并入本文。活性成分与载体的相对比例可以例如，通过化合物的溶解性和化学性质、所选的施用途径和标准药学实践而确定。本文公开的(_)-E-10-0H-NT化合物和/或组合物可通过使得活性剂与患者体内所期望的一个或多个作用部位接触的任何方式而施用。化合物可通过可用于与医药品组合使用的任何常规方式、作为单独的治疗剂或与治疗剂联合而施用。例如，它们可作为药物组合物中的单一活性剂而施用，或者它们可与其他治疗性活性成分联合使用。本文所述的(-)-E-10-0H-NT化合物和/或组合物可以适合于所选的诸如口服或胃肠外的施用途径的多种形式而施用于哺乳动物宿主。在这方面的胃肠外施用包括通过以下途径的施用静脉内施用、肌肉内施用、皮下施用、眼内施用、滑膜内施用、跨上皮施用，其包括经皮、眼的(ophthalmic)、舌下和口腔的施用；经吹入法、气溶胶和直肠系统的局部施用，其包括眼的、真皮的、眼睛的(ocular)、直肠的和鼻吸入的施用。(-)-E-10-0H-NT化合物和/或组合物可以例如与惰性稀释剂或与可吸收的可食用的载体一起被配制用于口服施用，或者它可被封装在硬壳或软壳的明胶胶囊中，或者它可以被压成片剂，或者它可以直接与饮食中的食物合并。对于口服治疗性的施用，活性化合物可与赋形剂合并，并且以下面的形式使用可吸收的片剂、口腔片剂、锭剂、胶囊、酏剂、悬浮液、糖浆剂、干胶片及类似形式。在这样的治疗上有用的组合物中的活性化合物的量优选为使得将会获得合适的剂量。可制备优选的根据本发明的组合物或制剂，以便口服剂量单位形式包含从约0.lmg至约1000mg的每种活性化合物(及其中的范围和特定浓度的所有组合与亚组合(subcombination))。片剂、锭剂、丸剂、胶囊及类似物还可包含以下物质中的一种或多种诸如黄蓍胶、阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶的粘合剂；诸如磷酸二钙的赋形剂；诸如玉米淀粉、马铃薯淀粉、海藻酸及类似物的崩解剂；诸如硬脂酸镁的润滑剂；诸如蔗糖、乳糖或糖精的增甜剂；或诸如薄荷、冬青油或樱桃调味品的调味剂。当剂量单位形式是胶囊时，除了以上类型的物质之外，还可包含液体载体。多种其他的物质可作为包衣存在，例如，片剂、丸剂或胶囊可用紫胶、糖或两者包覆。糖浆剂或酏剂可包含活性化合物、作为增甜剂的蔗糖、作为防腐剂的尼泊金甲酯和尼泊金丙酯、染料和诸如樱桃或橙子香料的调味品。当然，用于制备任何剂量单位形式的任何物质优选是药学上纯的并且在所使用的量中基本上无毒性的。(-)-E-10-0H-NT化合物和/或组合物还可以被配制用于胃肠外施用或腹膜内施用。作为游离碱或药理学上可接受的盐的活性化合物的溶液可在适当地与诸如羟丙基纤维素的表面活性剂混合的水中制备。还可在甘油、液体聚乙二醇及其混合物中以及在油中制备分散体。在通常的储存和使用条件下，这些制剂可包含防腐剂以防止微生物的生长。适于通过注射施用的组合物通常包括例如，用于即时制备无菌可注射溶液或分散体的无菌水溶液或分散体以及无菌粉末。在所有情况下，优选无菌的形式并且是流体的形式以提供容易的可注射性(syringability)。所述组合物优选在制造和储存条件下是稳定的，并且优选在防止诸如细菌和真菌的微生物的污染作用下保存。载体可以是包含例如以下物质的溶剂或分散体介质水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇、液体聚乙二醇及类似物)、其合适的混合物以及植物油。例如通过使用诸如卵磷脂的包衣、通过在分散体的情况下维持所需的粒径和通过使用表面活性剂而维持适当的流动性。通过诸如对羟基苯甲酸酯类、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞及类似物的多种抗菌剂和抗真菌剂可获得对微生物作用的预防。在许多情况下，优选包括等渗剂，例如糖或氯化钠。通过使用延迟吸收的药剂可获得可注射组合物的延长的吸收，所述药剂例如单硬脂酸铝和明胶。无菌可注射溶液可通过如下制备将所需的量的活性化合物与以上列举的多种其他成分并入合适的溶剂中，如果需要，随后是过滤灭菌。通常，分散体可通过将灭菌的活性成分并入无菌媒介物中而制备，所述无菌媒介物包含碱性的分散体介质和所需的来自以上列举的那些其他成分。在用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末的情况下，优选的制备方法可包括真空干燥和冻干技术，所述技术得到活性成分的粉末，加上来自其先前的无菌过滤的溶液的另外的所需要的成分。8.6有效剂量(-)-E-10-0H-NT化合物和/或组合物通常以如本文所述的治疗有效量施用。施用的化合物或组合物的量取决于多种因素，包括例如在治疗的特定征候、施用模式、所期望的益处是预防性的还是治疗性的、正在治疗的征候的严重性和患者的年龄与体重、特定活性化合物的生物利用度等。确定有效剂量完全在本领域技术人员的能力范围内。剂量通常在从约0.000lmg/kg/天或0.00lmg/kg/天或0.0lmg/kg/天至约0.lmg/kg/天或1.0mg/kg/天或2.Omg/kg/天或2.5mg/kg/天或5.Omg/kg/天或10.Omg/kg/天或20.Omg/kg/天或25.Omg/kg/天或50.Omg/kg/天或75.Omg/kg/天或100mg/kg/天的范围内，期望的剂量为约5mg/天至约500mg/天，但可以更高或更低，取决于(除了其他因素以外)在治疗的特定疾病或征候、化合物和/或组合物的活性、其生物利用度、施用模式和多种以上讨论的因素。可单独调节剂量和时间间隔以提供足以维持治疗效果或预防效果的所述化合物和/或组合物的血浆水平。作为非限制性的实例，所述化合物和/或组合物可每天一次或每天多次地施用，取决于(除了其他)施用模式、在治疗的特定征候和开处方的医师的判断。在诸如本地局部施用(localtopicaladministration)的本地施用或选择性摄取的情况下，活性化合物和/或组合物的有效本地浓度可能不与血浆浓度相关。技术人员将能够优化本地剂量而无需不合理的试验。可用于治疗疼痛的(-)-E-10-0H-NT化合物和/或组合物的初始剂量可由诸如实施例部分描述的动物模型的体内数据中估计。此外，初始剂量可由本领域中可得的关于用于治疗多种病症的AT和NT的有效剂量的数据来估计。见，例如，Bryson&Wilde，1996(报导用于治疗慢性疼痛的AT的起始剂量为10mg/天至25mg/天，以10mg/周至25mg/周增加至最大建议剂量75mg/天，或耐受剂量)和本领域中可得的关于在施用外消旋的(±)-E-10-OH-NT、AT和/或NT之后外消旋的(±)-E-IO-OH-NT及其单独的对映体的药代动力学性质或药效学性质的数据(Dahl-P皿stinen等人，1989(报导在施用单一的75mg口服剂量的外消旋的(士)-E-10-0H-NT之后对于单独的对映体的平均AUC);Bertilsson等人，1986(报导在施用从10mg至100mg范围的剂量之后E-10-0H-NT的药代动力学性质)；delbroek等人，1986(报导在施用75mgAT之后E-10-0H-NT的稳态浓度))。基于实施例5、实施例6和实施例15-实施例21中描述的动物模型，相信用于治疗人类中的疼痛的(-)-E-10-0H-NT的有效剂量可通过施用足以获得类似于在对大鼠腹膜内施用30mg/kg之后所获得的血浆浓度的(-)-E-10-0H-NT的剂量而获得。同样地，在某些实施方案中，用于治疗疼痛的(-)-E-10-0H-NT的有效剂量是获得当(-)-E-10-0H-NT(30mg/kg，腹膜内)施用于大鼠时获得的血浆浓度所需的剂量。用于治疗疼痛的(-)-E-10-0H-NT的剂量通常在从约O.0001mg/kg/天或0.001mg/kg/天或O.0lmg/kg/天至约O.lmg/kg/天或1.Omg/kg/天或2.Omg/kg/天或2.5mg/kg/天或5.Omg/kg/天或10.Omg/kg/天或20.Omg/kg/天或25.Omg/kg/天或50.Omg/kg/天或75.Omg/kg/天或100mg/kg/天的范围内，期望的剂量为约5mg/天至约500mg/天，但可以更高或更低。相信lOmg/天至约20mg/天或25mg/天或30mg/天或35mg/天或40mg/天或45mg/天或50mg/天或60mg/天或70mg/天或80mg/天或90mg/天或95mg/天或lOOmg/21天或150mg/天或200mg/天或250mg/天或300mg/天之间的(-)-E-IO-OH-NT的口服剂量将可有效治疗疼痛。因此，某些实施方案包括施用在约10mg/天至约100mg/天之间的(-)-E-10-0H-NT的口服剂量。基于在实施例21中描述的强迫游泳动物模型试验，相信用于治疗人类中的抑郁的(-)-E-10-0H-NT的有效剂量可通过施用足以获得类似于在对大鼠腹膜内施用30mg/kg之后所获得的血浆浓度的(-)-E-10-0H-NT的剂量而获得。同样地，在某些实施方案中，用于治疗抑郁的(-)-E-10-0H-NT的有效剂量是获得当(-)-E-10-0H-NT(30mg/kg，腹膜内)施用于大鼠时获得的血浆浓度所需的剂量。用于治疗抑郁的(-)-E-10-0H-NT的剂量通常在从约O.0001mg/kg/天或0.OOlmg/kg/天或O.Olmg/kg/天至约O.lmg/kg/天或1.Omg/kg/天或2.Omg/kg/天或2.5mg/kg/天或5.Omg/kg/天或10.Omg/kg/天或20.Omg/kg/天或25.Omg/kg/天或50.Omg/kg/天或75.Omg/kg/天或100mg/kg/天的范围内，期望的剂量为约5mg/天至约500mg/天，但可以更高或更低。相信10mg/天至约20mg/天或25mg/天或30mg/天或35mg/天或40mg/天或45mg/天或50mg/天或60mg/天或70mg/天或80mg/天或90mg/天或95mg/天或lOOmg/天或150mg/天或200mg/天或250mg/天或300mg/天之间的(-)-E-IO-OH-NT的口服剂量将可有效治疗抑郁。因此，某些实施方案包括施用在约10mg/天至约100mg/天之间的(-)-E-10-0H-NT的口服剂量。此外，基于对E-10-0H-NT及其对映体的药代动力学性质的先前的报导，相信用在约140nM与约220nM之间的血桨水平的E-10-0H-NT的对映体可治疗抑郁。基于报导的(-)-E-10-0H-NT的药代动力学性质，相信用在约140nM与220nM之间的血浆水平的(-)-E-IO-OH-NT可治疗抑郁，并且通过施用约30mg/天至约35mg/天或40mg/天或45mg/天或50mg/天或55mg/天或60mg/天或65mg/天或70mg/天或75mg/天或80mg/天或85mg/天或90mg/天或95mg/天或lOOmg/天或150mg/天或200mg/天或250mg/天或300mg/天可获得这些血桨水平。因此，某些实施方案包括以获得在约140nM与220nM之间的血桨水平所需的日剂量施用(-)-E-10-0H-NT。在其他实施方案中，(-)-E-lO-OH-NT的剂量为在约30mg/天与约lOOmg/天之间。在联合治疗的情形中，基于以上公开的(-)-E-10-0H-NT的剂量和对特定适应症长期确立的标准，组合的药剂的合适的剂量将是技术人员容易确定的。作为一般原则，当大麻素、阿片样物质和/或其他药剂与本文所述的E-IO-OH-NT组合物联合使用时，通常剂量可在从约0.01至约100mg/kg/天的大麻素、阿片样物质和/或其他活性化合物和约0.001至约100mg/kg/天的本文所述的E-10-0H-NT组合物的范围内。在某些实施方案中，剂量可以是约0.1至约10mg/kg/天的大麻素、阿片样物质和/或其他活性化合物和约0.01至约10mg/kg/天的本文所述的E-10-0H-NT组合物，并且在其他实施方案中，日剂量可以是约1.Omg的大麻素、阿片样物质和/或其他活性化合物和约0.lmg的本文所述的E-10-0H-NT组合物。可选择地，当本文所述的E-10-0H-NT组合物与大麻素化合物(例如，八9-四氢大麻酚或大麻二酚)、阿片样物质化合物(例如，吗啡)和/或其他药剂组合时并且该组合物是口服施用时，通常剂量可以在约15至约200mg的大麻素、阿片样物质和/或其他药剂和约0.1至约4mg的本文所述的E-10-0H-NT组合物的范围内。8.7(_)-E-IO-OH-NT的有利性质由于本文讨论的不利副作用，AT和NT不再用作用于抑郁或疼痛的一线治疗。令人惊奇地，本文所述的E-10-0H-NT组合物已明显降低了不利副作用。例如，几十年来已知(1)对^组胺能受体具有高亲和力的中央活性药物(centrallyactivedrug)能够减少体重增加，(2)某些抗精神病药是有效的&组胺能受体拮抗剂，并且(3)抗精神病药能够诱导体重增加。有趣地，具有高^组胺能受体亲和力的其他精神活性的化合物，例如AT(Altamura等人，1989)，已经与显著的体重增加相关。已说明了是有效的&组胺能拮抗剂的、诸如奥氮平和氯氮平的非典型抗精神病药以及诸如AT和米氮平的三环和四环抗抑郁药分别具有诱导体重增加的高倾向性(Wirshing，1999)。此外，由&组胺能拮抗介导的体重增加被列出为用三环抗抑郁药的短期和长期治疗的常见的和众所周知的副作用，主要是作为食欲过盛的结果(Richelson,2001;Khawam等人，2006;Deshmukh等人，2003)。虽然先前的研究已充分说明&组胺能受体拮抗增加啮齿动物的进食而H2组胺能拮抗不增加(Sakata等人，1988;Fukagawa等人，1989)，但&组胺能拮抗可诱导体重增加的机理目前是未知的。此外，神经元组胺的耗尽增加进食(Menon等人，1971;Sakai等人，1995)。最后，&敲除小鼠(knockoutmice)对瘦蛋白的食欲抑制作用是相对有抗性的，并且当置于高脂肪饮食中时易于肥胖(Masaki等人，2001a，Masaki等人，2001b)。合起来考虑，这些结果暗示&组胺能受体通过瘦蛋白依赖的机理调节进食行为。由Kroeze和合作者的研究(Kroeze等人，2003)说明，当研究大量典型的和非典型的抗精神病药时&组胺能受体亲和力与短期体重增加显著相关。这些结果意味着具有相对高的&组胺能受体亲和力的抗精神病药可能诱导短期体重增加。如实施例7中详细说明的，非常出乎意料地，当与AT和NT的&组胺能亲和力相比较时，(-)-E-10-0H-NT对&组胺能受体的亲和力分别降低220倍和40倍。基于这些体外结果，预期(_)-E-OH-NT比AT和NT产生较少的体重增加。基于(-)-E-10-OH-NT对&组胺受体的亲和力，还预期用本文所述的E-10-OH-NT组合物的治疗比AT和NT产生较少的镇静。实际上，如在实施例8中更详细地讨论，使用通常用于评价药物的镇静作用的大鼠旋转棒试验，AT(30mg/kg，腹膜内)和NT(30mg/kg，腹膜内)对旋转棒性能的作用的大小是相近的，在30分钟时的峰值缺乏分别为51±20%和60±14%。然而，对于(-)-E-10-OH-NT(30mg/kg，腹膜内)未观察到旋转棒性能的减损。这些数据说明(-)-E-10-0H-NT比AT和NT是显著较少镇静的。(-)-E-10-0H-NT的另外的有利性质是其对关键药酶减少的抑制。药物的代谢转化通常是酶促的。虽然所研究的每个组织都具有一些代谢活性，但在药物的生物转化中涉及的酶系统主要位于肝中。在药物的非胃肠外施用之后，剂量的显著部分可能在其到达体循环之前在肝或肠中被代谢失活。该首过代谢显著限制了高度代谢的药物的口服生物利用度(Benet等人，1995)。细胞色素P450酶家族是药物生物转化反应的主要催化剂。该酶的超家族催化多种氧化反应和还原反应并且对化学上不同组的底物具有活性。关键的细胞色素P450酶包括CYP2D6和CYP2C19。由于多晶现象或通过抑制作用，这些酶的活性的改变导致不期望的临床后果(见Ingelman-Sundberg等人，1999)。如实施例10中具体讨论的，AT和NT抑制CYP2D6和CYP2C19，并且实际上，这些药剂禁忌与被这些酶代谢的药剂使用。然而令人惊奇地，CYP2D6和CYP2C19均不被(-)-E-10-0H-NT所抑制(见实施例10)。因此，预期在与AT和NT比较时(-)-E-IO—OH—NT将产生较少的不期望的临床后果，并且可有效地与被这些细胞色素P450同工酶所代谢并禁忌与AT或NT治疗一起使用的药物联合使用。使用(-)-E-10-0H-NT的另一优势是由于其对蕈毒碱性受体减少的亲和力。虽然本领域中已报导了外消旋的(士)-E-10-0H-NT的降低的蕈毒碱亲和力，但没有(_)对映体对通常的蕈毒碱性受体或对特定蕈毒碱性受体亚型的亲和力的报导。E-10-0H-NT对蕈毒碱性受体在体外的亲和力仅为NT对这些受体的亲和力的十八分之一(Nilvebrant等人.1991;Waegner等人，1984)。在健康个体中，NT将唾液流减少至比E-IO-OH-NT或安慰剂显著更大的程度(Nordin等人，1987a)。此外，在用很高剂量的NT处理的NT的超高速羟基化剂(hydroxylator)中，非轭合的10_0H_NT的血浆浓度很高而没有任何抗胆碱能副作用的迹象。这些结果说明IO-OH-NT代谢产物比AT和NT具有小得多的抗胆碱能作用。与这些结果一致，实施例12中详细说明的数据确定了(-)-E-10-0H-NT比AT或NT对四种蕈毒碱性受体M2、M3、M4，具有较低的亲和力。(-)-E-10-0H-NT相对于AT和NT的另外的优势是其对GI通行(GItransit)的减少的影响(见实施例13)。已知由在肠神经系统中的多种神经递质介导的许多信号机制在肠胃功能的生理学控制中起主要作用。小鼠的肠胃通行(GIT)试验被用作对所选化合物的潜在GI易感性的潜伏期标记物(preclinicalmarker)。如在实施例13中详细说明的，(-)-E-10-0H-NT显示出比AT和NT对GIT显著较低的抑制。AT和NT的使用与包括心律不齐的心脏中毒相关。心脏K+通道(Ikr)的阻断已与药物诱导的长QT综合征(LQT)相关联，所述药物诱导的长QT综合征可导致尖端扭转型室性心动过速，其为心律不齐和随后的心室纤颤的危及生命的形式(见Pearlstein等人，2003)。由三环抗抑郁药(TCA)引起的QT延长和相关的心律不齐的风险与先天性心脏延迟整流钾(K+)通道和由调节快速延迟整流电流-hERG的克隆的a亚单元所携带的电流的药理学抑制作用在细胞水平上相对应。如实施例11中详细说明，诸如丙咪嗪和AT的TCA以临床相关的浓度抑制hERG通道(Witchel等人，2002)。(-)-E-IO-OH-NT另外的优势在于它在hERG通道中比AT和NT具有显著较低的活性。基于该结果，相对于AT和NT，预期利用(-)-E-10-0H-NT的治疗将得到减少的QT延长、尖端扭转型室性心动过速和其他心律不齐相关的副作用的风险。三环抗抑郁药由于其与a肾上腺素能受体的相互作用还产生血压作用。与多虑平、奈法唑酮、AT和氯米帕明一起显著发生的a工肾上腺素能受体的阻断是直立性低血压、头晕和反射性心动过速的原因(Hamon&Bourgoin，2006)。如实施例9中详细描述，(-)-E-10-0H-NT的优势是其在a^和ala肾上腺素能受体处相对于AT和NT的较弱的亲和力。基于这些体外数据，预期(-)-E-10-0H-NT将较少可能产生直立性低血压、头晕和反射性心动过速。(-)-E-10-0H-NT的另外的有利性质起因于其对a2肾上腺素能受体较低的亲和力(见实施例9)。已充分确定a2肾上腺素能受体激动剂产生痛觉缺失(Ongioco等人，2000;Asano等人，2000;Hall等人，2001)。a2肾上腺素能受体拮抗剂逆转a2肾上腺素受体介导的抗伤害感受的能力也是众所周知的(Kalso等人，1991;Millan和Colpaert，1991;Pertovaara等人，1990)。当由其自身皮下施用时，高达3mg/kg剂量的a2肾上腺素受体拮抗剂RX821002([2-(2-甲氧基_1，4_苯并二噁烷_2_基)_2_咪唑啉)不对乙酸诱导的腹縊产生显著的抑制作用(疼痛试验)。另一方面，在相同的试验条件下，《2肾上腺素受体激动剂可乐定在0.Olmg/kg高达1.Omg/kg的剂量范围对腹縊产生剂量依赖的抑制作用，并且在最高剂量水平，其完全消除了腹縊响应，因此提供了100%的保护防止产生疼痛的剌激。此外，由0.3mg/kg和1.Omg/kg的可乐定诱导的抗疼痛作用通过同时皮下施用RX821002(lmg/kg)而显著削弱，强调了在该试验中的可乐定响应涉及a2肾上腺素受体(Gray等人，1999)。然而，c^肾上腺素能受体拮抗剂在疼痛响应中的效应的结果是非常易变的。对于在多种疼痛试验中的a2肾上腺素受体拮抗剂诱导的作用中的易变性的一种解释是这样的事实这些药物可通过其他受体类型介导它们的某些行为影响(Dermis等人，1980;Virtanen等人，1989)。例如，Kauppila和合作者的结果(Kau卯ila等人，1998)说明，取决于若干试验参数，阿替美唑(a2肾上腺素受体拮抗剂)对疼痛反应行为(nocifensivebehavior)的作用从促进变化至抑制。从这些报导中，在a2肾上腺素能受体上的拮抗作用对于镇痛活性看起来不是必需的。如实施例9中更详细地说明，(-)-E-10-0H-NT显示出比AT和NT对肾上腺素能受体a2a、0213和ci2。显著较低的亲和力。基于该数据，预期(-)-E-10-0H-NT在关于潜在的副作用方面将优于AT和/或NT:(-)-E-10-0H-NT的镇痛作用可能不被与a2肾上腺素能受体的相互作用所抵消，而AT和NT的镇痛作用可能被与a2肾上腺素能受体的相互作用所降低。8.8试剂盒本文所述的(-)-E-10-0H-NT化合物和/或其药学上的盐可装配为试剂盒的形式。在某些实施方案中，所述试剂盒提供所述化合物和试剂以制备用于施用的组合物。所述组合物可以是干燥形式或冻干形式，或者在溶液中，特别是在无菌溶液中。当所述组合物是干燥形式时，试剂可包括用于制备液体制剂的药学上可接受的稀释剂。所述试剂盒可包括用于施用或用于分配所述组合物的装置，包括但不限于，注射器、移液管、经皮贴片(transdermalpatch)或吸入器。所述试剂盒可包括与本文所述的化合物联合使用的其他治疗剂。在某些实施方案中，所述治疗剂可以单独的形式提供或与本文所述的化合物混合而提供。试剂盒将包括关于组合物的制备与施用、组合物的副作用和任何其他相关信息的适当的说明书。该说明书可以任何合适的形式；包括但不限于，印刷品、录像带、计算机可读磁盘或光盘。9.实施例意图为示例性的和非限制性的以下执行的实施例强调了本文所述的多种E-10-0H-NT组合物和方法的多种特征和优势。实施例1:(+)-E-10-0H-NT的手性特异性合成参考图1A，如下合成对映体纯的(+)-E-10-0H-NT。化合物2的合成。在室温下，将溴(35.0mL，679mmo1，1.40当量)的四氯化碳(200mL)溶液逐滴加入5-氧代-10，11-二氢-二苯并[a，b]环庚烷(化合物1;100.0g，485mmol，1.00当量)与四氯化碳(400mL)的搅拌的混合物中。加入另外的200mL四氯化碳25以促进搅拌，且该混合物在室温下搅拌90min。将该混合物过滤、用四氯化碳(200mL)漂洗并干燥得到170g棕褐色固体(90%收率)。将该固体(170g，464mmo1，1.00当量)与氢氧化钠(55.7g，1.39mol，3.00当量)合并并将该混合物在甲醇(2L)中回流2小时。将热溶液过滤然后将固体溶解于二氯甲烷(400mL)中并用水(300mL)和盐水(200mL)洗涤。将有机物浓縮并干燥得到96.24g浅橙色的固体。将滤液静置过夜以冷至室温，且更多的产物沉淀出来。将固体过滤得到22.2g淡橙色的晶体。合并的收率88%。NMR(400MHz，CDCl3)S8.16(d，1H)，7.93(m，2H)，7.79(s，1H)，7.68-7.51(m，4H)，7.44(d，1H)。化合物3的合成。将叔丁醇钾(62.7g，559mmo1，1.40当量)加入化合物2(114g，400,1，1.00当量)和哌啶(79.lmL，800mmo1，2.00当量)在叔丁醇(900mL)中的混合物。将该混合物回流60分钟、冷至室温并真空浓縮至近干。将粗产物溶解于乙酸乙酯(400mL)中并且所得有机混合物用水(300mL)和盐水(200mL)洗涤。将有机物浓縮并将所得粗的油在甲醇(500mL)中搅拌而沉淀出黄色固体，过滤并干燥该黄色固体以得到63.6g所期望的产物(55%收率)。NMR(400MHz，CDC13)S8.08(dd，1H)，7.87(dd，1H)，7.82(dd，1H)，7.58(dt，1H)，7.52-7.45(m，2H)，7.41(m，1H)，7.33(dt，1H)，6.38(s，1H)，2.89(brs，4H)，1.74(m，4H)，1.61(brm，2H);质谱分析m/z=290.1(M+H)+。化合物4的合成。在氮气下，将环丙基溴化镁在四氢呋喃中的溶液(0.50M于THF中，531mL，266mmo1，1.21当量)逐滴加入溶解于四氢呋喃(100mL)中的化合物3(63.6g，220mmol，1.00当量)的冷的(冰/水浴)溶液中。反应混合物在室温下搅拌1小时。加入环丙基溴化镁的另外的部分(0.50M于THF中，100mL，50mmo1，0.23当量)并且将反应搅拌另外的1小时。将反应混合物浓縮至近干、用二氯甲烷(600mL)稀释并用水(800mL)和盐水(300mL)洗涤。将有机物浓縮并干燥得到70.lg橙黄色粘稠的油(96%收率)。粗产物用于下一步而不需进一步纯化。质谱分析m/z=332.2(M+H)+。化合物5和化合物6的混合物的合成。分别为5-[3-溴-亚丙基]-5，11-二氢-二苯并[a，d]环庚-10-酮的Z-几何异构体和E-几何异构体的化合物5和化合物6通过将化合物4(70.0g，211mmo1，1.00当量)在48%含水氧溴酸(250mL)和乙酸(250mL)中回流16小时而制备。将反应混合物冷至室温、用水(200mL)稀释并用二乙醚萃取3次(总计500mL)。将有机物合并并在大烧杯中搅拌，小心加入饱和碳酸氢钠(300mL)直至停止冒泡。将层分离并将有机物用饱和碳酸氢钠(200mL)和盐水(150mL)洗涤并浓縮得到粗的半固体。在粗产物经过硅石之前，将llg不溶的棕褐色固体过滤得到几何E-异构体(化合物6)和几何Z-异构体(化合物5)的混合物(通过^NMR，化合物6/化合物5的比例=87/13)。通过使用5%_10%的乙酸乙酯/己烷梯度的硅胶塞纯化滤液并将纯化的产物在10%乙酸乙酯/己烷中磨碎，得到19g对应于几何异构体5和几何异构体6的混合物(通过^NMR，6/5=55/45)的棕褐色固体。该异构体混合物用l:l苯己烷重结晶得到8.6g76%纯化合物6。然后该物质与先前分离的几何异构体5和几何异构体6(通过^NMR，6/5=87/13)混合物(llg)合并然后在1:1苯己烷中结晶得到12.7g对应于几何异构体5和几何异构体6(通过111NMR，6/5=91/9)的淡橙色固体。^NMR(400MHz，CDC13)S8.ll(dd，1H)，7.50(m，2H)，7.36(m，2H)，7.24(m，3H)，6.17(m，1H)，4.48(d，1H)，3.78(d，1H)，3.47(m，2H)，2.86-2.66(m，2H)。(+)-E-5-(Y_浪亚丙某)-10,11-二氡-10-羟某-5H-二苯并「a,cH_环庚烯，化合物(+)-7的合成。在-2(TC下(干冰/乙腈浴)，将化合物6(2.00g，6.llmmol，1.00当量)在四氢呋喃(25mL)中的溶液逐滴加入硼烷-二甲硫络合物(0.326mL，3.67mmo1，0.60当量)和(7aR)-3-甲基-l，l-二苯基全氢化-3-硼-2-氧杂吡咯并吡咯烷(1.02g，3.67mmol，0.60当量)在四氢呋喃(75mL)的溶液中。将该反应在_20°0下搅拌90分钟，然后在室温下搅拌45分钟。加入硼烷-二甲硫络合物(0.326mL，3.67mmol，0.60当量)和(7aR)-3-甲基-l，l-二苯基全氢化-3-硼-2-氧杂吡咯并吡咯烷(1.02g，3.67mmo1，0.60当量)的另外的部分然后该反应在室温下搅拌另外的30分钟。将反应混合物在冰/水浴中冷至0°C并逐滴加入甲醇(15ml)。该混合物在室温下搅拌30分钟、再次冷至0t:并加入饱和碳酸氢钠(20mL)。将该混合物在室温下搅拌30分钟、浓縮并在二氯甲烷(75mL)和水(50mL)之间分离。浓縮有机物并通过使用10%_30%乙酸乙酯/己烷梯度的快速硅胶柱色谱纯化粗产物，以47%收率得到950mg近白色半固体。力NMR(400MHz，CDC13)S7.50-7.10(m，8H)，6.00-5.84(m，1H)，5.09(brm，2/3H)，4.85(brm，1/3H)，3.65-3.43(m，3H)，3.05(m，1H)，2.78-2.62(m，2H)，1.64(d，1H)。(+)-E-10-0H-NT,化合物(+)_8的合成。通过在压力容器中、60°C下将(+)-7(0.95g，2.6,1，1.00当量)与甲胺(在水中按重量计40%，7.OOmL，81mmol，31当量)在乙腈(lOmL)中的溶液加热16小时而合成(+)-E-10-OH-NT。将该反应浓縮至近干并通过使用5%-9%甲醇/氯仿梯度(加1%氢氧化铵)的快速硅胶柱色谱而纯化，以90X收率得到650mg淡橙色泡沫。因为有某些Z-异构体存在，S卩(+)-Z-IO-OH-NT，将不纯的游离碱(650mg，2.33mmo1，1.00当量)溶解于乙腈中并过滤以除去任何不溶性颗粒。将滤液浓縮、溶解于乙腈(15mL)并加入马来酸(324mg，2.79mmo1，1.20当量)。将该混合物搅拌30分钟然后固体沉淀出来。将该混合物浓縮、干燥并从异丙醇(lOOmL)中重结晶，得到535mg白色晶状固体，即，作为马来酸盐的(+)-E-10-OH-NT。力NMR(400MHz，DMS0_d6)S8.29(brs，2H)，7.50-7.12(m，8H)，6.02(s，2H)，5.90(brm，1/3H)，5.71(brm，2/3H)，5.31(brs，1/3H)，5.08(brs，1/3H)，4.60(brs，1/3H)，3.36(m，1H)，3.06—2.86(brm，3H)，2.52(d，3H)，2.36(brm，2H)。质谱分析m/z=280.1(M+H)+。手性LC分析99.4%手性纯度。柱ChromtechCHIRAL-AGP150X4.Omm，5ii。流速1.OmL/min。流动相80%20mM磷酸钠pH6.0，20%。IPA检测器UV于240nm。峰保留时间峰1[(+)-E-10-OH-NT]=5.4min。峰2[(-)-E-10-OH-NT]=7.3min。元素分析:C19H21NOC4H404。理论%C69.86;%H6.37;%N3.54。实测％C69.91;%H6.43;%N3.61。[a]D23.3=+27.79(c.10.lmg/mL，MeOH)。m.p.=180.5°C—182.0°C。实施例2:(_)-E-10-0H-NT的手性特异性合成参考图1A，如下合成对映体纯的(-)-E-10-OH-NT。(-)-E-5-(Y-溴亚丙基)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并「a，cH_环庚烯，化合物(-)-7的合成。在-2(TC下(干冰/乙腈浴)，将化合物6(2.50g，7.64mmol，1.00当量)在四氢呋喃(25mL)中的溶液逐滴加入硼烷-二甲硫络合物(0.455mL，5.12,1,0.67当量)和(7aS)-3-甲基-l，l-二苯基全氢化-3-硼-2-氧杂吡咯并吡咯烷(1.42g，5.12mmol，0.67当量)在四氢呋喃(75mL)中的溶液。反应在_20°〇下搅拌60分钟，然后在室温下搅拌2小时。加入硼烷-二甲硫络合物(0.455mL，5.12mmol，0.67当量)和(7aS)-3-甲基-1，27l-二苯基全氢化-3-硼-2-氧杂吡咯并吡咯烷(1.42g，5.12mmol，0.67当量)的另外的部分，然后反应在室温下搅拌另外的30分钟。反应混合物在冰/水浴中冷至ot:并逐滴加入甲醇(15ml)。该混合物在室温下搅拌30分钟、再次冷至0t:并加入饱和碳酸氢钠(20mL)。将该混合物在室温下搅拌30分钟、浓縮并在二氯甲烷(75mL)和水(50mL)之间分离。浓縮有机物并通过使用10%-30%乙酸乙酯/己烷梯度的快速硅胶柱色谱纯化粗产物，以97%收率得到2.45g近白色粘性泡沫？HNMR(400MHz，CDCl3)S7.50-7.10(m，8H)，6.00-5.84(m，1H)，5.09(brm，2/3H)，4.85(him,1/3H)，3.65—3.43(m，3H)，3.05(m，1H)，2.78—2.62(m，2H)，1.64(d，1H)。(-)-E-10-0H-NT,化合物(_)_8的合成。通过在压力容器中、60°C下将(-)-7(2.45g，6.7mmo1，1.00当量)与甲胺(在水中按重量计40%，25.OmL，290mmol，43当量)在乙腈(35mL)中的溶液加热5小时而合成(-)-E-10-0H-NT。将该反应浓縮并通过使用5%-9%甲醇/氯仿梯度(加1%氢氧化铵)的硅胶塞而纯化。因为有某些Z-异构体存在，即(-)-Z-10-0H-NT，将不纯的游离碱溶解于二氯甲烷中、过滤以除去任何不溶性颗粒、浓縮并干燥，以定量收率(quantitativeyield)得到1.9g淡黄色泡沫。将游离碱(1.37g，4.9mmo1，1.00当量)溶解于乙腈(40mL)中并加入马来酸(0.654g，5.64mmol，1.15当量)。将该混合物搅拌60分钟然后固体沉淀出来。将该混合物浓縮、干燥并从异丙醇(70mL)中重结晶，得到820mg浅橙色针状、作为马来酸盐的(-)-E-10-0H-NT。^NMR(400MHz，DMS0-d6)S8.29(brs，2H)，7.50-7.12(m，8H)，6.02(s，2H)，5.90(brm，1/3H)，5.71(brs，2/3H)，5.31(brs，1/3H)，5.08(brs，1/3H)，4.60(brs，1/3H)，3.36(m，1H)，3.06—2.86(brm，3H)，2.52(d，3H)，2.36(brm，2H)。质谱分析m/z=280.1(M+H)+。手性LC分析98.6%手性纯度。柱:ChromtechCHIRAL-AGP150X4.Omm，5ii。流速1.OmL/min.流动相:80%20mM磷酸钠pH6.0，20%IPA。检测器UV于240nm.峰保留时间:峰1[(+)-E-10-OH-NT]=6.lmin。峰2[(_)-E-10-0H-NT]=8.6min。元素分析C19H21NO-C4H404。理论％C69.86;%H6.37;%N3.54。实测%C69.53;%H6.44;%N3.57。[a]D23.4=-24.12(c.10.7mg/mL，MeOH)。m.p.=177.5—179.0°C。实施例3:(-)-E-10-0H-NT琥珀酸盐相对于(-)-E-IO-OH-NT马来酸盐已改善了性台匕g匕(-)-E-10-0H-NT琥珀酸盐的制备。通过将9.15g(-)_8(游离碱，88.6%E异构体，11.4%Z异构体)溶解于异丙醇(40mL)并加入琥珀酸(4.25g，110当量)在异丙醇(90mL)中的溶液而制备(-)-E-10-0H-NT的琥珀酸盐。2天后少量产物从溶液中结晶出来，因此将该混合物浓縮至20mL混合物并将所得固体过滤，得到llg94%E异构体和6%Z异构体的(-)-E-10-0H-NT的琥珀酸盐。将固体从乙腈中重结晶两次(400mL和300mL)，得到6.78g淡橙色晶体(99.2XE异构体，0.8XZ异构体)。所得琥珀酸盐实际上是晶体的和非吸湿性的，并且在盐水中比马来酸盐(4.4mg/ml)具有更高的溶解度(18mg/ml)。实施例4:(+)-E-10-0H-NT和(_)-E-IO-OH-NT是去甲肾上腺素再摄取的有效选择性抑制剂皿。在采用放射性标记的配体的竞争性结合试验中测定AT、NT、(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT对去甲肾上腺素(NE)运载体、5-羟色胺(5HT)运载体和多巴胺(DA)运载体的结合亲和力。对于NE运载体结合试验，将[3H]尼索西汀(l.OnM)与多种浓度的测试化合物在4t:下孵育2小时，膜是由异源表达的克隆的人类NE运载体(hNET)的中国仓鼠卵巢细胞(CH0)细胞制备的。通过闪烁能谱测定结合放射性(boundradioactivity)。非特异性结合界定为在l.OiiM地昔帕明存在下出现的结合的量。使用标准方法测定各种测试化合物的Ki值。对于5HT运载体结合试验，将[3H]丙咪嗪(2.0nM)与多种浓度的测试化合物在22t:下孵育l小时，膜是由异源表达人类5-羟色胺运载体(hSERT)的CHO细胞制备的。通过闪烁能谱测定结合放射性。非特异性结合界定为在1.0M丙咪嗪存在下出现的结合的量。使用标准方法测定各种测试化合物的Ki值。对于DA运载体结合试验，将[3H]N-[l-(2-苯并[b]苯硫基)环己基]-哌啶([3H]BTCP)(4.OnM)与多种浓度的测试化合物在fC下孵育2小时，膜是由异源表达的克隆的人类多巴胺运载体(hDAT)的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞制备的。加入多种浓度的测试化合物并通过闪烁能谱测定结合放射性。非特异性结合界定为在1.0i!MBTCP存在下出现的结合。使用标准方法测定各种测试化合物的&值。还评估了AT、NT(+)-E-10-0H-NT禾P(-)-E-IO-OH-NT抑制NE、5HT和DA的摄取的能力。通过测量对在37°C下孵育20分钟时[3H]-去甲肾上腺素并入大鼠丘脑下部突触体的抑制而测定NE摄取中的IC5。值。通过测量对在37t:下孵育15分钟时[3H]-5HT并入大鼠脑突触体的抑制而测定5HT摄取中的IC5。值。通过测量对在37t:下孵育15分钟时[3H]-DA并入大鼠纹状体突触体的抑制而测定DA摄取中的IC5。值。MS。在下表1中提供了各个运载体的结合亲和力。在表1中，&值是以纳摩尔(nanomolar)计。百分比是对于10yM测试化合物观察到的结合的百分抑制。在下表2中报导了摄取抑制数据。在表2中，ICs。值是以纳摩尔计。百分比是对于10M测试化合物观察到的结合的百分抑制。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT对NE运载体的亲和力与AT对NE运载体的亲和力大致相等并且在NT的约10倍以内。对于对NE摄取的抑制的IC5。值观察到类似的结果。对NE摄取的抑制的IC5。值低于先前报导的对于外消旋的E-10-0H-NT对NE摄取的抑制的IC5。值(见Hyttel，1980，对于在小鼠心房中的NE摄取试验其报导了130nM的1C5。)。虽然(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT对NE运载体的亲和力与AT对NE运载体的亲和力相当，但如同NT的亲和力，(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT对5HT运载体的亲和力显著大于AT的亲和力。对于对5HT摄取的抑制的ICs。值观察到类似的结果。基于这些结果，如同NT，(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT对NE运载体与5HT运载体显示出选择性。如将在实施例14中所说明的，外消旋的(士)-E-10-0H-NT还对NE和5HT运载体显示出选择性的亲和力，该亲和力与(+)和(_)对映体对NE和5HT运载体的亲和力大致对等。实施例5:(_)-E-IO-OH-NT是有效的抗痛觉过敏剂皿。(-)-E-10-0H-NT的抗痛觉过敏活作用在弗氏完全佐剂诱导的伤害性炎性疼痛的啮齿动物模型中说明。作为比较，AT作为正对照进行测试。以30mg/kg、腹膜内施用药物。无菌水媒介物作为负对照进行测试。(-)-E-10-0H-NT以马来酸盐或琥珀酸盐施用。AT以盐酸盐施用。剂量是基于游离碱的量。对于该试验，使用DeHaven-Hudkins等人，1999的方法测定在足底施用(intr即lantaradministration)150iiL弗氏完全佐剂(FCA)之后24小时时的大鼠中的机械性痛觉过敏。为了测定脚爪压力阈值，大鼠被稍微限制在医用纱布中并且使用压力痛觉缺失仪器(pressureanalgesiaapparatus)(StoeltingInstruments,WoodDale,IL)、用圆锥活塞(conicalpiston)对发炎的和非发炎的脚爪的背侧面施加压力。脚爪压力阈值界定为使用250克的截断值引起逃避反应所需的力的量(以克计)。在药物治疗前和药物治疗后的特定时间测定脚爪压力阈值。结果。结果在图3中说明。(-)-E-10-0H-NT(30mg/kg，腹膜内)相对于AT(30mg/kg，腹膜内)显示出加强的抗痛觉过敏活性。实施例6:(_)-E-IO-OH-NT在治疗非伤害性神经性疼痛中是有效的皿。相对于阿米替林抗异常性疼痛活性，还使用非伤害性神经性疼痛的L5-单神经结扎模型在体内测试了(-)-E-10-0H-NT的抗异常性疼痛活性，如LaBuda和Little,2005中所述。将测试动物置于树脂玻璃室(plexiglaschamber)(lOcmX20cmX25cm)中并使其适应15分钟。将该室置于网筛的顶上以便vonFrey单丝可呈现在两个后爪的跖面上。使用升/降法(Dixon，1980)、用7个Frey单丝(0.4克、1克、2克、4克、6克、8克和15克)获得对每个后爪的触觉灵敏度的测定。采用递送至右后爪约l-2秒钟然后递送至左后爪的2克vonFrey力开始每次试验。如果没有收回反应，则递送下一较高的力。如果有反应，则递送下一较低的力。将该过程进行至以最高的力(15克)而没做出反应或者进行至在最初的反应之后施加4次剌激。每个测试组包括8个动物。进行手术但不经过神经结扎的假手术对照组包括4个动物。所有动物在测试化合物施用后60分钟和240分钟进行测试。使用下式计算每个脚爪的50%脚爪收回阈值[Xth]log=[vFr]log+ky，其中是上一次使用的vonFrey力，k=0.2249，是vonFrey单丝之间的平均间隔(以log为单位)，并且y是取决于收回反应的模式的值(Dixon，1980)。如果动物未对最高vonFrey单丝(15克)反应，则脚爪被指定18.23克的值。对触觉灵敏度的试验进行两次并且平均50%收回值被指定为对于每个动物的右脚爪和左脚爪的触觉灵敏度。MS。结果在图4中说明。(-)-E-10-0H-NT以马来酸盐或琥珀酸盐施用。AT以盐酸盐施用。剂量是基于游离碱的量。(-)-E-10-0H-NT的抗异常性疼痛活性(30mg/kg，腹膜内)相对于媒介物治疗的对照组(媒介物治疗的，L5SNL大鼠)观察到的抗异常性疼痛活性具有统计学显著性并且与AT(30mg/kg，腹膜内)的抗异常性疼痛活性相当。实施例7:(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-OH-NT以弱亲和力结合至&组胺能受体^^在竞争性结合试验中评价AT、NT、(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-OH-NT对&组胺能受体的亲和力。对于该试验，将[3H]吡拉明(3nM)与多种浓度的测试化合物在22t:下孵育1小时，膜是由异源表达的克隆的人类^组胺能受体的人类胚肾(HEK-293)细胞制备的。通过闪烁能谱测定结合放射性。非特异性结合界定为在1.0iiM未标记的吡拉明存在下出现的结合的量。MS。结合研究表明，(+)-E-10-0H-NT和(+)-E-IO-OH-NT的&组胺能受体亲和力相对于AT和NT的&组胺能受体亲和力出乎意料地分别降低220倍和40倍。基于这些结果，预期(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT将比AT和NT是较少产生镇静的并将产生较少的体重增加。实施例8:(_)-E-10-0H-NT比AT和NT在体内显著较少产生镇静皿。大鼠旋转棒试验通常用于评价与化学药物相关的镇静。用AT(30mg/kg，腹膜内)、NT(30mg/kg，腹膜内)和(-)-E-10-0H-NT(30mg/kg，腹膜内)进行时程试验。旋转棒被设置为恒速运动并且大鼠被放置在该设备的单独的转鼓上。一旦大鼠在应有的位置上，将计时器调到零并将旋转棒切换到加速模式。旋转棒经5分钟的时间间隔从4rpm加速至40rpm。当大鼠从转鼓上跌落时，计时器自动停止，以秒记录跌落的潜伏期。在药物施用前，大鼠具有由至少15分钟分开的3次训练时段。对每个间隔以秒记录性能分数。基线旋转棒性能分数是在第三次训练时段跌落旋转棒的潜伏期。对于将要被包括在试验中的大鼠，基线必须已经大于或等于60秒的时间。在施用测试化合物之后的30分钟、60分钟和120分钟测试动物。MS。结果在图2中说明。(-)-E-10-0H-NT以马来酸盐或琥珀酸盐施用。AT和NT以盐酸盐施用。剂量是基于游离碱的量。在用AT或NT治疗的大鼠中，在30分钟时观察到旋转棒性能的峰值缺乏。AT和NT对旋转棒性能的影响的量级是相近的，峰值缺乏分别为51±20%和60±14%。作为明显的对照，在用(-)-E-10-0H-NT(30mg/kg，腹膜内)治疗的大鼠中未观察到性能的减损。实施例9:(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT对a肾上腺素能受体具有低亲和力测试了AT、NT、(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT对ala、alb、a2a、a2b禾口a2c肾上腺素能受体的亲和力。使用由大鼠唾液腺制备的膜测试对a^肾上腺素能受体的亲和力。将[3H]哌唑嗪(0.06nM)在多种浓度的测试化合物存在下与该膜在22t:下孵育1小时。在10i!M酚妥拉明存在下测定非特异性结合。通过闪烁能谱测定结合放射性。使用由异源表达的克隆的人类受体的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞制备的膜测试对alb肾上腺素能受体的亲和力，所述CHO细胞在多种浓度的测试化合物存在下与[3H]哌唑嗪(0.15nM)在22t:下孵育1小时。在10yM酚妥拉明存在下测试非特异性结合。通过闪烁能谱测定结合放射性。使用异源表达的克隆的人类受体的CHO细胞测试对a2a肾上腺素能受体的亲和力，所述CHO细胞在多种浓度的测试化合物存在下与[3H]RX821002(1.OnM)在22"C下孵育131小时。在100i!M(-)-肾上腺素存在下测试非特异性结合。通过闪烁能谱测定结合放射性。使用异源表达的克隆的人类受体的CH0细胞测试对a2b肾上腺素能受体的亲和力，所述CHO细胞在多种浓度的测试化合物存在下与[3H]RX821002(2.5nM)在22。C下孵育1小时。在100i!M(-)-肾上腺素存在下测试非特异性结合。通过闪烁能谱测定结合放射性。使用异源表达的克隆的人类受体的CHO细胞测试对a2。肾上腺素能受体的亲和力，所述CHO细胞在多种浓度的测试化合物存在下与[3H]RX821002(2.OnM)在22。C下孵育1小时。在100i!M(-)-肾上腺素存在下测试非特异性结合。通过闪烁能谱测定结合放射性。皿。结果制成下表3。表3中，Ki值以纳摩尔计报导。百分比是对于10iiM测试化合物观察到的结合的抑制的百分比。表3对肾上腺素能受体的亲和力(以nM计的Ki;在10^M下的y。抑制)<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT显示出比AT和NT对所有列出的肾上腺素能受体显著较低的亲和力，特别是对02受体。因此，预期(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT的镇痛作用可能不被它们与a2肾上腺素能受体的相互作用所抵消，而AT和NT的镇痛反应可能被它们与02肾上腺素能受体的相互作用所抵消。此外，(-)-E-10-0H-NT和(+)-E-10-0H-NT之间对a13受体和a1)3受体的亲和力的不同表明(-)-E-IO-OH-NT优于(+)对映体。实施例10:(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT不抑制细胞色素P450功能皿。使用Chauret等人，2001的方法，用7_甲氧基_4_(氨基甲基)-香豆素(MAMC)(Venhorst等人，2000)作为基质测试AT和NT、(+)-E-10-OH-NT禾P(-)-E-10-OH-NT对细胞色素P450功能的抑制活性。酶的来源是包含由BDBioscience获得的人类重组体CYP2D6的微粒体。使用带有390nm激发滤波片和460nm发射滤波片的PerkinElmerFusion测定MAMC至7-羟基-4-(氨基甲基)香豆素的转化率。使用二节基荧光素(dibezylflourescein)(DBF)作为基质测定CYP2C19活性。酶的来源是包含由BDBioscience(SanJose，CA)获得的人类重组体CYP2C19的微粒体。使用带有485nm激发滤波片和535nm发射滤波片的PerkinElmerFusion测定DBF向荧光素的转化率。皿。结果制成下表4。在表4中，1(:5。值是以纳摩尔计并且在括号中显示95%置信区间。百分比反映对于10i!M测试化合物观察到的百分抑制。报导的值是6次重复试验的平均值。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>相比于AT和NT，(+)-E-10-0H-NT禾P(-)-E-10-OH-NT令人惊奇地表现出对多晶型的细胞色素P450同工酶CYP2D6和CYP2C19的抑制活性的显著且意料不到的降低。当与AT和NT比较时，预期对于E-10-0H-NT的(+)和(-)对映体的抑制活性的这种减少导致不利临床结果的减少，并且允许在服用禁忌与AT和NT—起使用的药剂的患者中使用(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT。实施例11:(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT比AT和NT较低程度地抑制hERG通道^^。用显示快速延迟整流电流(hERG)的闭合的a亚单元测试AT、NT、(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT阻断心脏延迟整流钾通道的能力。MS。以下显示用10iiM测试化合物获得的hERG通道的百分比抑制。AT:68.6%NT:55.1%(+)-E-10-0H-NT:8.8%(-)-E-10-0H-NT:6.0%对于(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT观察到比AT和NT显著较低的活性。基于这些结果，预期利用(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT的治疗相对于用AT和NT的治疗能够得到QT延长和其他心律不齐相关的副作用的减少的风险。实施例12:(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT比AT和NT具有对蕈毒碱性受体的较低的亲和力皿。用由异源表达的克隆的人类蕈毒碱性受体MpM2、M3、M4和M5的CH0细胞制备的膜测定AT、NT(+)-E-10-0H-NT禾P(-)-E-10-0H-NT对蕈毒碱性受体M!、M2、M3、M4和M5的亲和力。对于该试验，膜和放射性标记的配体与多种浓度的测试化合物在22t:下孵育1小时。通过闪烁能谱测定结合放射性。非特异性结合界定为在l.OiiM阿托品存在下的结合的放射性配体的量。对于M工受体的放射线配体是[3H]哌仑西平(2nM)。对于M2受体的放射线配体是[3H]AF-DX384(2nM)。对于M3、M4和M5受体的放射线配体是[3H]4_DAMP。M^。多种不同测试化合物对不同受体的亲和力常数(以纳摩尔计)制成下表5:表5<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>在所有情况下，(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-IO-OH-NT显示出大致相等的亲和力，并显示出比AT和NT显著较低的亲和力。实施例13:(_)-E-IO-OH-NT比AT和NT显示出对肠胃通行较少的抑制皿。在肠胃通行的啮齿动物模型中评价AT、NT和(-)-E-10-0H-NT的抑制作用。对于该试验，将雄性Swiss-Webster小鼠(20g_25g)过夜禁食并在每次口服施用由炭面粉水(1:2:8，w:w:w)组成的炭餐(charcoalmeal)之前的1小时、2小时或4小时用测试化合物或无菌水媒介物对照来治疗。在所述炭餐后25分钟测试肠胃通行。(-)-E-10-0H-NT以马来酸盐或琥珀酸盐施用；AT和NT以盐酸盐施用；剂量是基于游离碱的量。通过除去整个长度的小肠并测量炭餐的前缘在小肠中行进多远来测定肠胃通行(GIT)。通过下式确定百分比GIT(XGIT):%GIT=[炭前缘的距离(cm)/小肠的长度(cm)X100]MS。对于测试化合物(相对于无菌水媒介物)观察到的％GIT在图5中说明。相对于AT和NT，(-)-E-IO-OH-NT显示出对通行显著较低的抑制作用。实施例14:外消旋的(±)-E-IO-OH-NT、(+)-E-IO-OH-NT和(-)-E-IO-OH-NT对一元胺运载体的体外结合亲和力是互相接近的方案。在采用放射性标记的配体的竞争性结合试验中测定外消旋的E-IO-OH-NT("(±)-E-IO-OH-NT")、(+)-E-IO-OH-NT禾P(-)-E-IO-OH-NT对去甲肾上腺素(NE)运载体和5-羟色胺(SERT)运载体的结合亲和力。对于NE运载体结合试验，将[3H]尼索西汀(l.OnM)与多种浓度的测试化合物在4t:下孵育2小时，膜是由异源表达的克隆的人类NE运载体(hNET)的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞制备的。通过闪烁能谱测定结合放射性。非特异性结合界定为在1.0i!M地昔帕明存在下出现的结合的量。使用标准方法测定各种测试化合物的Ki值。对于5HT运载体(SERT)结合试验，将[3H]丙咪嗪(2.OnM)与多种浓度的测试化合物在22t:下孵育1小时，膜是由异源表达人类5-羟色胺运载体(hSERT)的CHO细胞制备的。通过闪烁能谱测定结合放射性。非特异性结合界定为在10i!M丙咪嗪存在下出现的结合的量。使用标准方法测定各种测试化合物的&值。M^。在下表6中提供对多种运载体的结合亲和力。<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>外消旋的(士)-E-10-0H-NT对去甲肾上腺素运载体的结合亲和力与对于纯化的对映体(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT所观察到的结合亲和力相当，纯化的对映体之间的结合亲和力大致相等。类似地，外消旋的(士)-E-10-0H-NT对5-羟色胺运载体的结合亲和力也与对于纯化的(+)-E-10-0H-NT和(-)-E-10-0H-NT观察到的结合亲和力相当。实施例15:(-)-E-10-0H-NT在治疗非伤害性神经性疼痛中比(±)-E-10-0H-NT和(+)-E-10-0H-NT更有效皿相对于阿米替林的抗异常性疼痛活性，使用非伤害性神经性疼痛的L5-单神经结扎模型在体内测试了(士)-E-10-0H-NT和(+)-E-10-0H-NT的(-)-E-IO-OH-NT的抗异常性疼痛活性，如LaBuda&Little，2005中所述。E-IO-OH-NT化合物以马来酸盐或琥珀酸盐施用。AT以盐酸盐施用。剂量是基于游离碱的量。将测试动物置于树脂玻璃室(10cmX20cmX25cm)中并使其适应15分钟。将该室置于网筛的顶上以便vonFrey单丝可呈现在两个后爪的跖面上。使用升/降法(Dixon，1980)、用7个Frey单丝(0.4克、1克、2克、4克、6克、8克和15克)获得对每个后爪的触觉灵敏度的测定。采用递送至右后爪约1-2秒钟然后递送至左后爪的2克vonFrey力开始每次试验。如果没有收回反应，则递送下一较高的力。如果有反应，则递送下一较低的力。将该过程进行至以最高的力(15克)而没做出反应或者进行至在最初的反应之后施加4次剌激。每个测试组包括8个动物。进行手术但不经过神经结扎的假手术对照组包括4个动物。所有动物在测试化合物施用后60分钟进行测试。使用下式计算每个脚爪的50%脚爪收回阈值[Xth]log=[vFr]log+ky，其中[vFr]是上一次使用的vonFrey力，k=0.2249，是vonFrey单丝之间的平均间隔(以log为单位)，并且y是取决于收回反应的模式的值(Dixon，1980)。如果动物未对最高vonFrey单丝(15克)反应，则脚爪被指定18.23克的值。对触觉灵敏度的试验进行两次并且平均50%收回值被指定为对于每个动物的右脚爪和左脚爪的触觉灵敏度。M^。结果在图7中说明。(-)-E-10-0H-NT的抗异常性疼痛活性(30mg/kg，腹膜内)大于对于媒介物治疗的对照组(媒介物治疗的，L5SNL大鼠)("VEH")所观察到的抗异常性疼痛活性并且与AT的抗异常性疼痛活性相当(30mg/kg，腹膜内)。(-)-E-10-0H-NT的抗异常性疼痛活性(30mg/kg，腹膜内)还大于对于(士)-E-10-0H-NT(30mg/kg，腹膜内)和(-)-E-10-0H-NT(30mg/kg，腹膜内)所观察到的抗异常性疼痛活性。外消旋的混合物和(+)对映体的活性与仅有媒介物的对照("VEH")的活性相当。实施例16:，在L5SNL大鼠模型中(-)-E-10-0H-NT与阿米替林在治疗非伤害性神经性疼痛中一样有效皿使用非伤害性神经性疼痛的L5-单神经结扎模型，根据以上实施例15中描述的方法，体内比较口服施用的(-)-E-10-0H-NT(马来酸盐或琥珀酸盐)的抗异常性疼痛活性与阿米替林(盐酸盐)的抗异常性疼痛活性。MS。结果在图8中说明。(-)-F-10-0H-NT的抗异常性疼痛活性(30mg/kg，口服和60mg/kg，口服)大于对于媒介物治疗的对照所观察到的抗异常性疼痛活性并且与AT的抗异常性疼痛活性相当(30mg/kg，腹膜内)。剂量是基于施用的游离碱的量。实施例17:对于(_)-E-10-0H-NT和AT的FCA诱导的痛觉过敏和旋转棒剂量响应曲线在大鼠FCA诱导的痛觉过敏(RandallSelitto)试验和在大鼠旋转棒试验中用阿米替林(盐酸盐)和(-)-E-10-0H-NT(马来酸盐或琥珀酸盐)进行剂量响应试验以测定IP施用后在抗痛觉过敏功效和镇静之间的治疗比。用无菌水媒介物、AT或(-)-E-10-0H-NT以高达60mg/kgIP的剂量(剂量是基于施用的游离碱的量)治疗大鼠。治疗后lh测量脚爪压力阈值。对于在24hFCA治疗的大鼠中的机械性痛觉过敏的逆转，AT和(-)-E-10-0H-NT显示出相近的效能和功效。对于以60mg/kgIP的AT和(-)-E-IO-OH-NT，观察到了高水平的抗痛觉过敏活性(％AH)，用AT和(-)-E-10-0H-NT治疗的大鼠中的％AH值分别为259±39和270±53(图9、图10)。为了估计AT和(_)-E-IO-OH-NT的机械性痛觉过敏的逆转的ED50值，在用60mg/kgIP治疗的大鼠中获得的响应被用作最大响应(100X)并且在较低剂量下的响应以最大作用的百分比来计算。AT和(-)-E-10-0H-NT的ED50值分别为38mg/kgIP和36mg/kgIP(图9、图10)。大鼠中旋转棒性能的减损用于评价由(-)-E-10-0H-NT和AT产生的镇静的程度。AT剂量依赖性降低了旋转棒性能，EDs。值为27mg/kgIP并且在100mg/kgIP的剂量下观察到96%的最大减损(图9)。作为比较，30mg/kgIP(-)-E-IO-OH-NT仅产生5%的旋转棒性能减损。对于旋转棒性能的(-)-E-10-0H-NT减损的估计的EDs。值是120mg/kgIP(图10)。这些数据在共同考虑时说明(_)-E-10-0H-NT比AT具有显示较少脱靶的药理学副作用的潜力。实施例18:在大鼠FCA诱导的痛觉过敏试验中(_)-E-10-0H-NT的抗痛觉过敏活性皿。在伤害性炎性疼痛的弗氏完全佐剂诱导的啮齿动物模型中说明了口服施用(-)-E-10-0H-NT(马来酸盐或琥珀酸盐)的抗痛觉过敏效力(剂量是基于施用的游离碱的量)。为了比较，无菌水媒介物作为负对照进行测试。使用DeHaven-Hudkins等人，1999的方法测定在足底施用150iiL弗氏完全佐剂(FCA)之后24小时时的大鼠中的机械性痛觉过敏。为了测定脚爪压力阈值，大鼠被稍微限制在医用纱布中并且使用压力痛觉缺失仪器(StoeltingInstruments,WoodDale,IL)、用圆锥活塞对发炎的和非发炎的脚爪的背侧面施加压力。脚爪压力阈值界定为使用250克的截断值引起逃避反应所需的力的量(以克计)。在药物治疗前和药物治疗后的特定时间测定脚爪压力阈值。M^。结果在图11中说明并且说明口服施用的(-)-E-10-0H-NT在大鼠FCA诱导的痛觉过敏试验中提供显著的活性。实施例19:(_)-E-10-0H-NT和(+)-E-IO-OH-NT在大鼠FCA诱导的痛觉过敏试验中的抗痛觉过敏活性的比较进行试验以确定(+)-E-10-0H-NT是否与(-)-E-IO-OH-NT在24hFCA治疗的大鼠中具有相近的抗痛觉过敏效能和功效。用30mg/kgIP的(+)-E-10-0H-NT进行时程试验。在该试验中，FCA治疗后24小时，对大鼠施用媒介物或30mg/kgIP的(+)-E-IO-OH-NT(施用马来酸盐或琥珀酸盐；剂量是基于施用的游离碱的量)。使用实施例5和实施例18中公开的方法在施用后1小时、2小时或4小时测定脚爪压力阈值。在治疗后1小时测定媒介物治疗的大鼠。在测试的任意时间点，(+)-E-10-OH-NT不是抗痛觉过敏的(图12)。为了验证这些结果，进行24小时FCA诱导的痛觉过敏试验，其中大鼠用媒介物或30mg/kgIP的(+)-E-10-0H-NT或(-)-E-IO-OH-NT治疗并且1小时后测试其抗痛觉过敏活性。结果在图13中呈现。再次地，(-)-E-10-0H-NT产生显著的抗痛觉过敏(55±7%AH)而(+)-E-10-0H-NT不是抗痛觉过敏的。对于(-)-E-10-0H-NT观察到的抗痛觉过敏的量级与先前的试验(例如实施例18)—致。实施例20:以30mg/kg和60mg/kgip的(-)-E-IO-OH-NT和(+)-E-IO-OH-NT在大鼠FCA诱导的痛觉过敏试验中的抗痛觉过敏活性的比较进行试验以扩展对于(+)-E-10-0H-NT在FCA诱导的机械性痛觉过敏试验中的作用的剂量响应关系(图14)。如实施例18和19中所说明，(+)-E-10-0H-NT在剂量高达30mg/kgIP时不是活性的。因此，在施用FCA后24小时用无菌水媒介物(30mg/kgIP或60mg/kgIP)治疗大鼠。用媒介物或(+)-E-10-0H-NT治疗后1小时测试大鼠的痛觉过敏。结果在用60mg/kgIP(40±13%AH)但不是30mg/kgIP的(+)-E-IO-OH-NT治疗的大鼠中观察到统计学显著的但是中等水平的抗痛觉过敏活性。在测试的剂量范围中，(-)-E-10-0H-NT对映体比(+)-E-10-0H-NT对映体具有较大的效能和功效(化合物以马来酸盐或琥珀酸盐施用；剂量是基于游离碱的量)。实施例21:在抑郁的大鼠强迫游泳试验中评价阿米替林、(-)-E-10-0H-NT和(+)-E-10-0H-NT皿将雄性斯普拉_道来大鼠(Sprague-Dawleyrat)(约200g)置于室温水槽中已进行15分钟的练习游泳。在练习游泳的第一个5分钟期间每隔5秒钟将大鼠分级为不动的(漂浮的，带有将头保持在水面上所需的动作)、游泳的(游泳过程中的运动)或攀爬的(活跃地试图爬出水槽，前爪的向上运动)。计算大鼠用在每个这些反应中的时间百分数。在练习游泳后约24h，用媒介物或测试化合物治疗大鼠并将其置于该槽中以进行5分钟的游泳。如同练习游泳的情况，在测试游泳期间大鼠被分级为不动的、游泳的或攀爬的并且计算用在每个这些反应中的时间百分数。通过带有事后分析的单向ANOVA分析数据以对于三种行为反应的每一种比较媒介物治疗后的行为反应与药物治疗后的行为反应。显著水平设置为P〈0.05。在三个单独的试验中进行阿米替林、(_)-E-10-0H-NT和(+)-E-10-0H-NT的剂量响应试验以测定其在强迫游泳试验中的效能和功效。在这些试验中，在适应性游泳后24小时将媒介物、阿米替林(3-30mg/kgIP)、(-)-E-10-OH-NT(3-30mg/kgIP)或(+)-E-10-0H-NT(3-30mg/kglP)给予大鼠并且lh以后，大鼠经受5分钟的游泳测试。在测试游泳中用在不动、游泳和攀爬的(活跃地试图爬上游泳槽的侧面)时间百分比在图15A、B和C中显示。MS:阿米替林剂量依赖地降低了用在不动上的时间量，在用10或30mg/kgIP治疗的大鼠中观察到显著减少。相对于媒介物治疗的大鼠，阿米替林在用10mg/kgIP和30mg/kgIP治疗的大鼠中分别减少不动性33X和47X。在用lOmg/kg(81%增加)或30mg/kg(147X增加)的阿米替林治疗后观察到用在游泳中的时间量相应的显著增加。阿米替林不改变用在攀爬中的时间量(图15A)。(-)-E-10-0H-NT产生与阿米替林类似量级的作用，说明在用30mg/kgIP治疗后不动性的显著降低(47%降低)和在用10mg/kgIP(64X增加)或30mg/kgIP(108%)治疗的大鼠中游泳的显著增加。如同阿米替林的情况，(-)-不改变用在攀爬上的时间量(图15B)。相反，(+)-E-10-0H-NT在高达30mg/kgIP的剂量下的强迫游泳试验中不是活性的(图15C)。虽然已说明并描述了多种特定的实施方案，但应理解，可作出多种改变，而不偏离本发明的精神和范围。在本申请中引用的所有出版物、专利、专利申请和其他文献以其整体为了所有目的据此通过引用并入，等同于每个单独的出版物、专利、专利申请或其他文献为了所有目的被单独地指明以通过引用并入。通过引用并入本文的参考文献包括美国专利第4，943，635号Altamura等人，1989，InternationalClinicalPsychopharmacology4(增刊1):103-6.Asano等人，2000，Anesthesia&Analgesia(Baltimore)90(2):400-407.Atkinson等人，1999，Pain83(2):137-145.Benet等人，1995，Chapter1:TheDynamicsofDrugAbsorption,Distribution,andElimination,GoodmanandGilman'sThePharmacologicalBasisofTher即eutics(Goodman和Gilman的治疗的药理学基础，第一章药物吸收、分配和消除的动力学)(第9版.McGrawHill).Berenguer等人，1994，J.Tetrahedron:Asymmetry5:165-168.Bertilsson等人，1986，ClinicalPharmacologyandTher即eutics40(3):261-267.Bertrand等人，1994，SyntheticCommunications24(11):1565-1573.Bhargava等人，1996，Neurop印tides30:219.Bilsky等人，1996，J.Pharmacol.Exp.Ther.277:484.Buschma皿等人，2002，Analgesics(Wiley-VCH，VerlagGMbH&Co.KgaA，Weinheim)Bryson&Wilde1996，Drugs&Aging8(6):459-476.Bymaster等人，2005，CurrentPharmaceuticalDesign11(12):1475_1493.Coe等人，2003，Org.Biomol.Chem.1:1106-1111.Chauret等人，2001，DrugMetab.Dispos.29:1196-1200.ChiralSeparationTechniques:APracticalApproach(手性分离技术——禾中实用的方法)，2001(第2版，Wiley-VCH，Weinheim)Collins等人，2000，JournalofPainandSymptomManagement20(6):449-458.Corey等人，1987，J.Am.Chem.Soc.109:5551-5553.38Corey等人，1991，J.Org.Chem.56:442-444.Corey等人，1992，J.Am.Chem.Soc.114:1906-1908.Corey等人，1998，Chem.，Int.Ed.37:1986-2012.Crowell等人，2004，CurrentOpinioninInvestigationalDrugs(ThomsonScientific)5(7):736-742.Dahl-P皿stinen等人，1989，ClinicalPharmacologyandTher即eutics45(6):650-656.DeHaven-Hudkins等人，1999，J.Pharmacol.Exp.Ther.289:494-502.Dennis等人，1980，LifeScience26:1247-1259.Deshmukh等人，2003，ClevelandClinicJournalofMedicine70(7):614,616，618.DiagnosticandStatisticalManualofMentalDisordersIV，TextRevision,2000(精神障碍的诊断与统计手册IV，文本修订，2000)(AmericanPsychiatricAssociation(美国精神学会)，Washington).Dixon，1980，An皿RevPharmacolToxicol20:441-462.Dourish等人，1988Eur.J.Pharmacol.147:469.Duquette等人，2003，Org.ProcessRes.Dev.7:285-288.Edelbroek等人，1986，ClinicalPharmacologyandTherapeutics39(2):156-62.Everett等人，1993，FundamentalandAppliedToxicology21:59-65.Fukagawa等人，1989，AmericanJournalofPhysiology256(3)(Pt.2):R605-R611.Goldstein等人，2005，Pain116(1-2):109-118.Gray等人，1999，EuropeanJournalofPharmacology378(2):161—168.Hall等人，2001，BritishJournalofAnaesthesia86(1):5-11.Hamon&Bourgoin，2006，EuropeanNeuropsychopharmacology16(增干lj5):S625-S632.Hong等人，1994TetrahedronLett.35:6631-6634.http://www.southcenter.org/publications/pulbichealth/publichealth_07.htmHyttel，1980，J.ActaPharmacol,etToxicol.47:53-57.Ingelman-S皿dberg等人，1999，TrendsinPharmacologicalSciences20(8):342-349.Itsuno等人，1983，J.Chem.Soc，Chem.Co匪n.8:469-470.Jain，2000，EmergingDrugs5(2):241-257.Kalso等人，1991，PharmacologyandTocicology68:140-143.Kauppila等人，1998，PharmacologyBiochemistryandBehavior59:477-485.Khawam等人，2006，ClevelandClinicJournalofMedicine73(4):351—3，356-61.39Kim等人，2006，OrganicProcessResearch&DevelopmentlO(5):949-958.Kroeze等人，2003，Neuropsychopharmacology28(3):519-526.LaBuda&Little,2005，JNeurosciMethods144:175-181.Lassen等人，1983，ActaChemicaScandinavica，系列B:OrganicChemistryandBiochemistryB37(4):335-340.Leventhal，等人，2007，JournalofPharmacologyandExperimentalTher即eutics320(3):1178-1185.Nichols等人，1997，Pain69:317.Mao等人，1996，Pain67:361.Masaki等人，2001a，Diabetes50(2):376—384.Masaki等人，2001b，Diabetes50(2):385-391.Max等人，1992，TheNewEnglandJournalofMedicine326(19):1250—1256.Menon等人，LifeSciences10(19)(Pt.1):1097-1109.Millan&Colpaert，1991，BrainResearch539:342-346.Nilveb屋t等人，1991，PharmacologyandToxicology68(1):64_67.Nordin等人，1987a，ClinicalPharmacologyandTherapeutics41(1):97_102.Nordin等人，1987b，ClinicalPharmacologyandTherapeutics42(1):10_19.Nordin等人，1991，Psychopharmacology103(3):287-290.Nordin&Bertilsson，1995，ClinicalPharmacokinetics28(1):26-40.0ngioco等人，2000，Anesthesiology92(4):968-976.Paterson等人，2005，J.Org.Chem.70:150-160.Pearlstein等人，2003，JournalofMedicinalChemistry46(11):2017-2022.Pertovaara等人，1990，EuropeanJournalofPharmacology179:323-328.Physicians'DeskReference(医师案头参考)1999(MedicalEconomicsCompany).Quallich等人1993，Synlett12:929-930.Remington'sPharmaceuticalSciences(雷明顿的药物科学)2005(LippincottWilliams&Wilkins).Remy等人，1973，JournalofOrganicChemistry38(4):700-703.Richelson，2001，MayoClinicProceedings76(5):511-527.Sakai等人，1995，BehavioralBrainResearch72:83_88.Sakata等人，1988，BrainResearch441(1-2):403-407.Sindrup&Jensen,1999，Pain83(3):389—400.Tagat等人，2004，J.Med.Chem.47:2405-2408.Venhorst等人，2000，Eur.J.Pharm.Sci.12:151-158.Virta體等人，1989，Arch.Int.Pharmacodyn.Ther.297:190-204.Waegner等人，1984，LifeSciences35(13):1379-1383.Wirshing等人，1999，JournalofClinicalPsychiatry60(6):358-363.Witchel等人，20Q2，FEBSLetters512(1-3):59—66.Yanagi等人，2003，Chem.Pharm.Bull.51:221-223.Zartman等人，2005，Bioorg.Med.Chem.Lett.15:1647-1650.权利要求一种药物组合物，其包括E-10-OH-NT和药学上可接受的赋形剂、载体和/或稀释剂，其中所述E-10-OH-NT富含(-)-对映体。2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述E-10-OH-NT包含至少约60%(-)-E-IO-OH-NT。3.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述E-10-OH-NT包含至少约70%(-)-E-IO-OH-NT。4.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述E-10-OH-NT包含至少约80%(-)-E-IO-OH-NT。5.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述E-10-OH-NT包含至少约90%(-)-E-IO-OH-NT。6.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述E-10-OH-NT是基本上对映体纯的(-)-E-IO-OH-NT。7.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述E-10-OH-NT是对映体纯的(-)-E-IO-OH-NT。8.根据权利要求I所述的药物组合物，其中所述E-IO-OH-NT以盐的形式存在于所述组合物中。9.根据权利要求8所述的药物组合物，其中所述盐是D-苹果酸盐或L-苹果酸盐。10.根据权利要求8所述的药物组合物，其中所述盐是琥珀酸盐。11.一种治疗哺乳动物中疼痛的方法，其包括将有效量的根据权利要求i-io中任一项所述的药物组合物施用于哺乳动物。12.根据权利要求11所述的方法，其中所述疼痛是起源于伤害性的。13.根据权利要求11所述的方法，其中所述疼痛是起源于非伤害性的。14.根据权利要求11所述的方法，其中所述疼痛是神经性疼痛、炎性疼痛、疱疹后神经痛、糖尿病神经病变或化学治疗诱导的神经性疼痛。15.根据权利要求11所述的方法，其中所述组合物被配制用于口服施用。16.—种治疗哺乳动物中抑郁的方法，其包括将有效量的根据权利要求1-10中任一项所述的药物组合物施用于哺乳动物。17.—种治疗患者中对阿米替林或去甲替林治疗响应的病症的方法，其包括将有效量的根据权利要求i-io中任一项所述的药物组合物施用于患者。18.根据权利要求17所述的方法，其中所述对阿米替林或去甲替林治疗响应的病症选自泌尿病症、心境障碍、认知障碍、精神障碍、焦虑障碍、人格障碍、进食障碍、由滥用药物或物质而成瘾造成的化学品依赖性、停药综合征、内分泌絮乱、冲动性障碍、抽动障碍、胃肠道病症、血管病症、躯体形式障碍、帕金森病、休克、高血压、性功能障碍、经前期综合征和纤维肌痛综合征。19.根据权利要求17所述的方法，其中患者服用禁忌与阿米替林或去甲替林一起使用的药物。20.基本上对映体纯的(-)-E-5-(Y-溴亚丙基)-10，ll-二氢-10-羟基-5H-二苯并[a，d]-环庚烯。21.对映体纯的(-)-E-5-(Y-溴亚丙基)-10，ll-二氢-10-羟基-5H-二苯并[a，d]-环庚烯。22.合成得到的对映体纯的(-)-E-10-0H-NT。23.根据权利要求22所述的合成得到的对映体纯的(-)-E-10-0H-NT，其中所述E-10-0H-NT是以游离碱的形式。24.根据权利要求22所述的合成得到的对映体纯的(-)-E-IO-OH-NT，其中所述E-10-0H-NT是以盐的形式。25.根据权利要求22所述的合成得到的对映体纯的(-)-E-10-0H-NT，其中盐是苹果酸^!.o26.根据权利要求22所述的合成得到的对映体纯的(-)-E-10-0H-NT，其中盐是琥珀酸27.—种制备(-)-E-5-(Y-溴亚丙基)-10，ll-二氢-10-羟基-5H-二苯并[a，d]-环庚烯的方法，其包括在手性特异性的噁唑硼烷催化剂存在下还原E-5-(y-溴亚丙基)-10，11-二氢-10-氧代-5H-二苯并[a，d]-环庚烯。28.根据权利要求27所述的方法，其中所述噁唑硼烷催化剂是29.—种制备(-)-E-10-0H-NT的方法，其包括使(-)-E-5-(y-溴亚丙基)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并[a，d]-环庚烯与甲胺反应。30.—种制备基本上对映体纯的(-)-E-10-0H-NT的方法，其包括使基本上对映体纯的(-)-5-(Y-溴亚丙基)-10，ll-二氢-10-羟基-5H-二苯并[a，d]-环庚烯与甲胺反应的步骤。31.—种制备(-)-E-10-OH-NT的方法，其包括以下步骤苯并[a，d]-环庚烯，以得到(-)-E-5-(y-溴亚丙基)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并[a，d]-环庚烯；禾口(ii)使所述(-)-E-5-(Y-溴亚丙基)-10，ll-二氢-10-羟基-5H-二苯并[a，d]-环庚烯与甲胺反应。32.—种用于抑制去甲肾上腺素的摄取的方法，其包括使去甲肾上腺素运载体与包括富含(_)对映体的E-10-OH-NT的组合物相接触。33.根据权利要求32所述的方法，其在体外实施。34.根据权利要求32所述的方法，其通过将包括有效抑制去甲肾上腺素的再摄取的E-10-OH-NT的量的组合物的量施用于受治疗者而在体内实施，其中所述E-10-OH-NT富含(i)在、j存在下还原E-5-(y-溴亚丙基)-10，11-二氢-10-氧代-5H-所述(_)对映体。35.根据权利要求1-10中任一项所述的组合物用于制备用于治疗哺乳动物中的疼痛的药物的用途。36.根据权利要求35所述的用途，其中所述疼痛是起源于伤害性的。37.根据权利要求35所述的用途，其中所述疼痛是起源于非伤害性的。38.根据权利要求35所述的用途，其中所述疼痛是神经性疼痛、炎性疼痛、疱疹后神经痛、糖尿病神经病变或化学治疗诱导的神经性疼痛。39.根据权利要求35所述的用途，其中所述药物被配制用于口服施用。40.根据权利要求1-10中任一项所述的组合物用于制备用于治疗哺乳动物中的抑郁的药物的用途。41.根据权利要求1-10中任一项所述的组合物用于制备用于治疗对阿米替林或去甲替林治疗响应的病症的药物的用途。42.根据权利要求41所述的用途，其中所述病症选自泌尿病症、心境障碍、认知障碍、精神障碍、焦虑障碍、人格障碍、进食障碍、由滥用药物或物质而成瘾造成的化学品依赖性、停药综合征、内分泌絮乱、冲动性障碍、抽动障碍、胃肠道病症、血管病症、躯体形式障碍、帕金森病、休克、高血压、性功能障碍、经前期综合征和纤维肌痛综合征。全文摘要本公开提供了包括AT和NT的E-10-OH-NT代谢产物的组合物、其合成方法以及其使用方法。在一个实施方案中，化合物(-)-E-5-(y-溴亚丙基)-10，11-二氢-10-羟基-5H-二苯并[a，d]-环庚烯，是通过在手性特异性的噁唑硼烷催化剂存在下还原E-5-(y-溴亚丙基)-10，11-二氢-10-氧代-5H-二苯并[a，d]-环庚烯而制备的。在另一实施方案中，描述了用于抑制去甲肾上腺素的摄取的方法，所述方法包括使去甲肾上腺素运载体与包括富含(-)对映体的E-10-OH-NT的组合物相接触。文档编号A01N33/02GK101720186SQ200880022883公开日2010年6月2日申请日期2008年4月22日优先权日2007年4月30日发明者伯特兰·乐布尔多内克,罗兰·多勒申请人:阿得罗公司