专利名称：一种从马桑中提取总黄酮的方法
技术领域：
本发明属于天然产物分离领域，具体是涉及一种从马桑中提取总黄酮的方法，特别是采用膜分离结合大孔树脂纯化马桑总黄酮的方法。
背景技术：
马桑、Coriaria sinica Maxim)为马桑科多年生落叶小乔木或灌木，广泛分布于地中海以东至日本、新西兰、中南美洲。在中国，很多省份和地区皆有马桑的分布，例如河南、四川、贵州、云南、湖南、陕西、甘肃等。马桑是杀虫植物之一，对小麦蚜虫、菜青虫及小菜蛾、黑肩毛胸榆叶甲、榆叶甲、榆三节叶蜂、白杨叶甲等多种害虫具有拒毒、抑制生长、缩短成虫寿命、导致其产卵量下降等效应，对马铃薯晚疫病菌、棉花轮纹病菌及楔顶病菌等有抑制作用。黄酮类化合物具有多方面的生物活性和药理作用，如抗肿瘤、抗心血管疾病、抗炎镇痛、免疫等作用，可用作药物、抗氧化剂、防腐剂等，其应用开发具有广阔的前景。艾国明等研究表明以苹果轮纹病菌为靶标，发现马桑叶提取液对该病菌有较好的抑制作用，在前期分离、结构鉴定以及室内生测的基础上，初步确定杀菌活性物质为黄酮类化合物。目前，对马桑的提取研究多集中在马桑内酯的提取研究，对马桑黄酮的涉及较少。 硕士论文“马桑化学成分研究及马桑中黄酮的生物活性研究”，该文献采用酸碱处理及有机溶剂萃取等方法提取马桑黄酮，该法产生的酸碱废液难于处理，且工艺难以放大。
发明内容
本发明的目的是提供一种从马桑中提取总黄酮的方法，该方法操作简便，对环境无污染，能耗相对小，且制得的总黄酮的纯度较高。一种从马桑中提取总黄酮的方法，其特征在于，该方法包含以下步骤
1)将马桑药材粉碎，加入至提取釜中，置于动态连续逆流提取装置中采用5(Γ70%低碳醇提取，提取液置于真空浓缩釜，浓缩至原提取液体积的1/2 2/3，静置，分离出上清液；
2)将上述上清液加水稀释，过超滤膜进行超滤，去除水溶性大分子得超滤处理液；
3)取大孔树脂湿法装柱，将上述超滤处理液缓慢通入树脂柱，先用水洗脱杂质，再用乙醇液洗脱，合并洗脱液，浓缩得马桑总黄酮。所述步骤1)中的低碳醇可以为甲醇、乙醇、异丙醇中的一种，用量是药材的纩18倍量。所述步骤2)中的超滤膜孔径为5 lOnm，透过压力为0. 3 0. SMPa0所述步骤3)中超滤处理液的吸附流速控制为3、ml/min。所述步骤3)中的水洗液用量为2 4BV，乙醇液洗脱为5-8BV65-80%乙醇溶液。本发明的优势在于
1)采用动态连续逆流提取，通过循环的提取液不断将有效成分提取出来，缩短了提取周期，减少了溶剂的用量；2)采用浓缩脱醇后沉淀去除水不溶性杂质，再经过超滤膜脱除水溶性大分子杂质，经过这些除杂处理，减轻了杂质对树脂的干扰，加大了树脂的处理量，适应规模化处理的需要；
3)采用低醇上柱，减少了大孔树脂对杂质的吸附量，加大了大孔树脂的处理量。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1
1)将马桑药材粉碎，取3kg药材，分为三等份，分别置于3个提取罐中，以3个提取罐为一组，采用动态连续逆流法提取，分别向各个提取罐中加入8L50%甲醇回流提取，提取液置于真空浓缩釜，浓缩至原体积的1/2，静置，分离出上清液；
2)将上述上清液加水稀释，过超滤膜进行超滤，超滤膜孔径为5nm，透过压力为0.SMPa 去除水溶性大分子得超滤处理液；
3)取AB-8型大孔树脂湿法装柱，水洗平衡后，将上述超滤处理液缓慢通入树脂柱，控制吸附流速为3ml/min，先用2BV水洗脱，再分别用!3BV65%乙醇溶液、5BV80%乙醇溶液洗脱，合并洗脱液，浓缩得马桑总黄酮18. 7g。实施例2:
1)将马桑药材粉碎，取6kg药材，分为六等份，分别置于6个提取罐中，以6个提取罐为一组，采用动态连续逆流法提取，分别向各个提取罐中加入18L70%乙醇回流提取，提取液置于真空浓缩釜，浓缩至原体积的2/3，静置，分离出上清液；
2)将上述上清液加水稀释，过超滤膜进行超滤，超滤膜孔径为lOnm，透过压力为 0. 3MPa去除水溶性大分子得超滤处理液；
3)取DOOl型大孔树脂湿法装柱，水洗平衡后，将上述超滤处理液缓慢通入树脂柱，控制吸附流速为8ml/min，先用4BV水洗脱，再分别用2BV65%乙醇溶液、3BV75%乙醇溶液洗脱，合并洗脱液，浓缩得马桑总黄酮54. 7g。实施例3:
1)将马桑药材粉碎，取IOkg药材，分为五等份，分别置于5个提取罐中，以5个提取罐为一组，采用动态连续逆流法提取，分别向各个提取罐中加入10L60%异丙醇回流提取，提取液置于真空浓缩釜，浓缩至原体积的2/3，静置，分离出上清液；
2)将上述上清液加水稀释，过超滤膜进行超滤，超滤膜孔径为5nm，透过压力为0.5MPa 去除水溶性大分子得超滤处理液；
3)取AB-8型大孔树脂湿法装柱，水洗平衡后，将上述超滤处理液缓慢通入树脂柱，控制吸附流速为6ml/min，先用2BV水洗脱，再分别用!3BV60%乙醇溶液、4BV80%乙醇溶液洗脱，合并洗脱液，浓缩得马桑总黄酮132. 2g。实施例4:
1)将马桑药材粉碎，取IOkg药材，分为五等份，分别置于5个提取罐中，以5个提取罐为一组，采用动态连续逆流法提取，分别向各个提取罐中加入12L65%乙醇回流提取，提取液置于真空浓缩釜，浓缩至原体积的3/5，静置，分离出上清液；2)将上述上清液加水稀释，过超滤膜进行超滤，超滤膜孔径为lOnm，透过压力为 0. 4MPa去除水溶性大分子得超滤处理液；
3)取DOOl型大孔树脂湿法装柱，水洗平衡后，将上述超滤处理液缓慢通入树脂柱，控制吸附流速为8ml/min，先用4BV水洗脱，再分别用!3BV55%乙醇溶液、5BV75%乙醇溶液洗脱，合并洗脱液，浓缩得马桑总黄酮118. lg。
权利要求
1.1. 一种从马桑中提取总黄酮的方法，其特征在于，该方法包含以下步骤1)将马桑药材粉碎，加入至提取釜中，置于动态连续逆流提取装置中采用5(Γ70%低碳醇提取，提取液置于真空浓缩釜，浓缩至原提取液体积的1/2 2/3，静置，分离出上清液；2)将上述上清液加水稀释，过超滤膜进行超滤，去除水溶性大分子得超滤处理液；3)取大孔树脂湿法装柱，将上述超滤处理液缓慢通入树脂柱，先用水洗脱，再用乙醇液洗脱，合并洗脱液，浓缩得马桑总黄酮。
2.2.如权利要求1所述的一种从马桑中提取总黄酮的方法，其特征在于所述步骤2)中的超滤膜孔径为5 10nm。
3.3.如权利要求1所述的一种从马桑中提取总黄酮的方法，其特征在于所述步骤3)中超滤处理液的吸附流速控制为3、ml/min。
4.4.如权利要求1所述的一种从马桑中提取总黄酮的方法，其特征在于所述步骤3)中的乙醇液洗脱为65-80%乙醇溶液。
全文摘要
本发明涉及一种从马桑中提取总黄酮的方法，尤其是涉及一种从马桑中提取纯化总黄酮的制备工艺。工艺步骤包括取金钱草药材，置于动态连续逆流提取装置中提取，提取液浓缩至原提取液体积的1/2~2/3，静置去除沉淀，再经超滤膜去除水溶性大分子，上大孔树脂吸附，醇溶液洗脱收集马桑总黄酮。本方法具有操作简单，设备要求低，制得产品纯度较高等优点。
文档编号A01N65/08GK102302556SQ20111026425
公开日2012年1月4日 申请日期2011年9月8日 优先权日2011年9月8日
发明者刘东锋, 吴艳波 申请人:南京泽朗医药科技有限公司