一种新西兰麻的组织培养方法
【专利摘要】本发明涉及一种新西兰麻的组织培养方法，该方法包括以下步骤：(1)培养基的配制，包括组培各阶段培养基的组分和含量：1)芽诱导培养基：MS+6-BA(1.0-5.0)mg/L+NAA(0.1-0.5)mg/L；2)不定芽增殖培养基：MS+6-BA(1.0-3.0)mg/L+NAA(0.1-0.3)mg/L；3)壮苗培养基：MS+6-BA(0.5-2.0)mg/L+NAA(0.1-0.2)mg/L；4)生根培养基：MS+NAA(0.05-0.2)mg/L；上述各种情况培养基的ph5.8，加入蔗糖30g/.L，琼脂6g/L，培养温度为(25±1)℃，光照为80μmol?ms左右。与现有技术相比，本发明具有极大提高繁殖速度和苗的整齐度，更好地保持原有的母本性状等优点。
【专利说明】—种新西兰麻的组织培养方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种植物的培养，尤其是涉及一种新西兰麻的组织培养方法。
【背景技术】
[0002]新西兰麻，为龙舌兰科新西兰麻属灌木植物，为多年生常绿草本植物。新西兰麻无中央直立茎，但具短、肉质、匍匐、分叉的走茎，直径约5厘米。从走茎上发出一群强韧、剑形的叶片，生长稍呈扇，强直厚革质、基生。圆锥花序生于无叶的花茎上，花基部筒状，花冠暗红色，夏季开花。蒴果直立，有三棱。喜温暖向阳环境，宜于深厚富含腐殖的砂壤土生长，不耐寒，多于庭园栽培或花境配置，为优秀的观叶植物，株形美观，色彩华丽高雅，具有较好的观赏性。因做为国外引进的品种引种数量较少，其繁殖慢，市场需求量大，种苗供应受限制。通过组培技术，极大提高繁殖速度和苗的整齐度，更好地保持原有的母本性状。
【发明内容】
[0003]本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种新西兰麻的组织培养方法。
[0004]本发明的目的可以通过以下技术方案来实现:一种新西兰麻的组织培养方法，其特征在于，该方法包括以下步骤:
[0005](I)培养基的配制，包括组培各阶段培养基的组分和含量:
[0006]I)芽诱导培养基:MS+6-BA(l.0-5.0)mg/L+NAA(0.1-0.5)mg/L ；
[0007]2)不定芽增 殖培养基:MS+6-BA (1.0-3.0)mg/L+NAA (0.1-0.3)mg/L ；
[0008]3)壮苗培养基:MS+6-BA (0.5-2.0) mg/L+NAA (0.1-0.2) mg/L ；
[0009]4)生根培养基:MS+NAA(0.05-0.2) mg/L ；
[0010]上述各种情况培养基的ph5.8，加入蔗糖30g/L，琼脂6g/L，培养温度为(25 ± I) °C，光照为 70-90 μ mo I ms:
[0011](2)新西兰麻的组织培养
[0012]I)无菌材料的获得
[0013]挖取新西兰麻植株基部的小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用75%的乙醇浸泡30s，1%。升汞浸泡15min，无菌水冲洗5_6次，无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成Icm长，接种于芽诱导培养基上；
[0014]2)芽的分化和增殖
[0015]小芽接种于芽诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突起，2周后可见明显的愈伤组织；培养I个月，切下带芽愈伤组织放入不定芽增殖培养基培养，在该培养中生长发育良好；
[0016]3)不定芽壮苗培养
[0017]在不定芽增殖培养基上，诱导出的丛生芽每丛只有2-3株可以伸长，其余处于矮化状态，分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基上，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm ；[0018]4)生根培养
[0019]取2_3cm的小植株，转接入生根培养基中诱导生根；10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至4-6cm ；
[0020]5)炼苗与移栽
[0021]生根培养20-30天，根系长至l-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即移栽室外，给予肥水管理，移栽成活率为95%。
[0022]所述的各阶段培养基优选以下组分和含量:
[0023]I)芽诱导培养基:MS+6-BAl.0mg/L+NAA0.lmg/L, MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L,MS+6-BA5mg/L+NAA0.5mg/L ；
[0024]2)不定芽增殖培养基:MS+6-BAlmg/L+NAA0.lmg/L, MS+6_BA2mg/L+NAA0.2mg/L,MS+6-BA3mg/L+NAA0.3mg/L ；
[0025]3)壮苗培养基:MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.lmg/L, MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.lmg/L,MS+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L ；
[0026]4)生根培养基:MS+NAA0.05mg/L, MS+NAA0.lmg/L, MS+NAA0.2mg/L。
[0027]所述的芽诱导培养基优选:MS+6-BA5.0-mg/L+NAA0.5mg/L ；
[0028]不定芽增殖培养基优选:MS +6-BA3mg/L+NAA0.3mg/L ；
[0029]壮苗培养基优选:MS+6-BA0.lmg/L+NAA0.lmg/L ；
[0030]生根培养基优选:MS+NAA0.lmg/L,在MS+NAA0.lmg/L中，根系粗壮，须根众多，生根率为100%。
[0031]与现有技术相比，本发明组培方法，极大提高繁殖速度和苗的整齐度，更好地保持原有的母本性状。
【具体实施方式】
[0032]下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。
[0033]实施例1
[0034]一种新西兰麻的组织培养方法，该方法包括以下步骤:
[0035](I)培养基的配制，包括组培各阶段培养基的组分和含量:
[0036]I)芽诱导培养基:MS+6-BA5mg/L+NAA5mg/L ；
[0037]2)不定芽增殖培养基:MS+6-BA3mg/L+NAA0.3mg/L ；
[0038]3)壮苗培养基:MS+6-BA0.lmg/L+NAA0.lmg/L ；
[0039]4)生根培养基:MS+NAA0.lmg/L ；
[0040]上述各种情况培养基的ph5.8，加入蔗糖30g/.L，琼脂6g/L，培养温度为(25±1)°〇，光照为8(^11101 ms 左右:
[0041](2)新西兰麻的组织培养
[0042]I)无菌材料的获得
[0043]挖取新西兰麻植株基部的小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用75%的乙醇浸泡30s，1%。升汞浸泡15min，无菌水冲洗5_6次，无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成Icm长，接种于芽诱导培养基上；[0044]2)芽的分化和增殖
[0045]小芽接种于芽诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突起，2周后可见明显的愈伤组织；培养I个月，切下带芽愈伤组织放入不定芽增殖培养基培养，基部愈伤组织比较多，但不影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，在该培养中生长发育良好；
[0046]3)不定芽壮苗培养
[0047]在不定芽增殖培养基上，诱导出的丛生芽每丛只有2-3株可以伸长，其余处于矮化状态，分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基上，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm ；
[0048]4)生根培养
[0049]取2_3cm的小植株，转接入生根培养基中诱导生根；10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至4-6cm ；
[0050]5)炼苗与移栽
[0051]生根培养20-30天，根系长至l-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂 ，在温室中驯化40天后，即移栽室外，给予肥水管理，移栽成活率为95%。
[0052]实施例2
[0053]一种新西兰麻的组织培养方法，该方法包括以下步骤:
[0054](I)培养基的配制，包括组培各阶段培养基的组分和含量:
[0055]I)芽诱导培养基:MS+6-BAl.0mg/L+NAA0.lmg/L ；
[0056]2)不定芽增殖培养基:MS+6_BAlmg/L+NAA0.lmg/L ；
[0057]3)壮苗培养基:MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.lmg/L ；
[0058]4)生根培养基:MS+NAA0.05mg/L ；
[0059]上述各种情况培养基的ph5.8，加入蔗糖30g/.L，琼脂6g/L，培养温度为(25±1)°〇，光照为7(^11101 ms 左右:
[0060](2)新西兰麻的组织培养
[0061]I)无菌材料的获得
[0062]挖取新西兰麻植株基部的小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用75%的乙醇浸泡30s，1%。升汞浸泡15min，无菌水冲洗5_6次，无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成Icm长，接种于芽诱导培养基上；
[0063]2)芽的分化和增殖
[0064]小芽接种于芽诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突起，2周后可见明显的愈伤组织；培养I个月，切下带芽愈伤组织放入不定芽增殖培养基培养，基部愈伤组织比较多，但不影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，在该培养中生长发育良好；
[0065]3)不定芽壮苗培养
[0066]在不定芽增殖培养基上，诱导出的丛生芽每丛只有2-3株可以伸长，其余处于矮化状态，分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基上，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm ；
[0067]4)生根培养
[0068]取2_3cm的小植株，转接入生根培养基中诱导生根；10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至4-6cm ；
[0069]5)炼苗与移栽
[0070]生根培养30天，根系长至l-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即移栽室外，给予肥水管理，移栽成活率为95%。
[0071]实施例3
[0072]—种新西兰麻的组织培养方法，该方法包括以下步骤:
[0073](I)培养基的配制，包括组培各阶段培养基的组分和含量:
[0074]I)芽诱导培养基:MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L ；
[0075]2)不定芽增殖培养基:MS+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L ；
[0076]3)壮苗培养基:MS+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L ；
[0077]4)生根培养基:MS+NAA0.2mg/L ；
[0078]上述各种情况培养基的ph5.8，加入蔗糖30g/.L，琼脂6g/L，培养温度为(25±1)°〇，光照为9(^11101 ms 左右:
[0079](2)新西兰麻的组织培养
[0080]I)无菌材料的获得
[0081]挖取新西兰麻植株基部的小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用75%的乙醇浸泡30s，1%。升汞浸泡15min，无菌水冲洗5_6次，无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成Icm长，接种于芽诱导培养基上；
[0082]2)芽的分化和增殖
[0083]小芽接种于芽诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突起，2周后可见明显的愈伤组织；培养I个月，切下带芽愈伤组织放入不定芽增殖培养基培养，基部愈伤组织比较多，但不影响不定芽的增殖，不定芽生长迅速并无玻璃化等不良现象，在该培养中生长发育良好；
[0084]3)不定芽壮苗培养
[0085]在不定芽增殖培养基上，诱导出的丛生芽每丛只有2-3株可以伸长，其余处于矮化状态，分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基上，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm ；
[0086]4)生根培养
[0087]取2_3cm的小植株，转接入生根培养基中诱导生根；10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至4-6cm ；
[0088]5)炼苗与移栽
[0089]生根培养20天，根系长至l-2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即移栽室外，给予肥水管理，移栽成活率为95%。
【权利要求】
1.一种新西兰麻的组织培养方法，其特征在于，该方法包括以下步骤: (1)培养基的配制，包括组培各阶段培养基的组分和含量:
1)芽诱导培养基:MS+6-BA(l.0-5.0)mg/L+NAA(0.1-0.5)mg/L ； 2)不定芽增殖培养基:MS+6-BA(l.0-3.0)mg/L+NAA(0.1-0.3)mg/L ；
3)壮苗培养基:MS+6-BA(0.5-2.0)mg/L+NAA(0.1-0.2)mg/L ； 4)生根培养基:MS+NAA(0.05-0.2)mg/L ； 上述各种情况培养基的Ph 5.8，加入蔗糖30g/L，琼脂6g/L，培养温度为(25± I) °C，光照为 70-90 μ mo I ms: (2)新西兰麻的组织培养 1)无菌材料的获得 挖取新西兰麻植株基部的小芽，用自来水冲洗2h后于超净工作台上，用75%的乙醇浸泡30s，1%。升汞浸泡15min，无菌水冲洗5_6次，无菌滤纸吸干表面水份，取小芽基部切成Icm长，接种于芽诱导培养基上； 2)芽的分化和增殖 小芽接种于芽诱导培养基上3周后，小芽基部开始膨大，出现黄绿色突起，2周后可见明显的愈伤组织；培养I个月，切下带芽愈伤组织放入不定芽增殖培养基培养，在该培养中生长发育良好； 3)不定芽壮苗培养 在不定芽增殖培养基上，诱导出的丛生芽每丛只有2-3株可以伸长，其余处于矮化状态，分成小丛或单芽后，放入壮苗培养基上，不定芽迅速伸长，20天后可以长到2-3cm ； 4)生根培养 取2-3cm的小植株，转接入生根培养基中诱导生根；10天后幼苗基部分化出许多白色的根原基，30天后可以长至4-6cm ； 5)炼苗与移栽 生根培养20-30天，根系长至l_2cm时，选择根系发达生长健壮的无菌苗，室内开瓶炼苗3天，取出后洗净根部琼脂，在温室中驯化40天后，即移栽室外，给予肥水管理，移栽成活率为95%。
2.根据权利要求1所述的一种新西兰麻的组织培养方法，其特征在于，所述的各阶段培养基优选以下组分和含量: 1)芽诱导培养基:MS+6-BAl.0mg/L+NAA0.lmg/L, MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L,MS+6-BA5mg/L+NAA0.5mg/L ； 2)不定芽增殖培养基:MS+6-BAlmg/L+NAA0.lmg/L, MS+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L,MS+6-BA3mg/L+NAA0.3mg/L ； 3)壮苗培养基:MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.lmg/L, MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.lmg/L,MS+6-BA2mg/L+NAA0.2mg/L ；
4)生根培养基:MS+NAA0.05mg/L, MS+NAA0.lmg/L, MS+NAA0.2mg/L。
3.根据权利要求1或2所述的一种新西兰麻的组织培养方法，其特征在于，所述的芽诱导培养基优选:MS+6-BA5.0-mg/L+NAA0.5mg/L ； 不定芽增殖培养基优选:MS+6-BA3mg/L+NAA0.3mg/L ；壮苗培养基优选:MS+6-BA0.lmg/L+NAA0.lmg/L ； 生根培养基优选:MS+NAA0.lmg/L,在MS+NAA0.lmg/L中，根系粗壮，须根众多，生根率为 100%。`
【文档编号】A01H4/00GK103734019SQ201410038054
【公开日】2014年4月23日 申请日期:2014年1月26日 优先权日:2014年1月26日
【发明者】黄建荣, 张浪, 陈建华, 沈勤 申请人:上海上房园艺有限公司, 上海上房园林植物研究所有限公司