一种提高蛹虫草子实体中虫草素含量的方法
【专利摘要】本发明公开了一种提高蛹虫草子实体中虫草素含量的方法，本发明通过对虫草素采用锌离子胁迫，同时结合光照条件的调整，在虫草子实体的特定生长阶段喷洒葡萄糖酸锌溶液，可以带来强烈的胁迫效果，子实体虫草素含量可达0.25-0.35％，同时相比现有技术，可以缩短一周以上的培养时间。
【专利说明】一种提高蛹虫草子实体中虫草素含量的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及蛹虫草人工栽培【技术领域】，尤其涉及一种人工控制培养条件以提高蛹 虫草子实体中虫草素含量的方法。
【背景技术】
[0002] 蛹虫草（Cordyceps militaris，又名北冬虫夏草，在真菌分类学上属子囊菌亚门， 核菌纲，麦角菌目，麦角菌科，虫草属，与冬虫夏草（Cordyceps sinensis)同为虫草属真菌 的一种。虫草属真菌是寄生于昆虫、蜘蛛或大团囊属植物的地下子实体上形成的一类虫菌 复合物的统称。蛹虫草是虫草属真菌的模式种，在野外主要寄主于鳞翅目、鞘翅目和双翅目 的一些昆虫的幼虫和蛹上，中医典籍记载它的功效为"味甘、性平，有益肺肾，补精髓，止血 化痰"，与冬虫夏草的功能基本一致。
[0003] 虫草素是蛹虫草中主要的有效成份之一，虫草素（cordycepin)又名3 ^ -脱氧腺 苷，是Cuningham于1951年分离得到的一种腺苷类活性物质，分子式为CltlH 13N5O3，分子量为 251. 24,熔点230-231°C。虫草素是蛹虫草中主要的有效成份之一，具有抗菌抗病毒、抗肿 瘤、以及抗疲劳、抗衰老、抗炎提高人体免疫能力，抑制单胺氧化酶活性，具有较高的药用价 值和广泛的药理作用。临床上主要应用治疗癌症、白血病、扩张支气管、显著增强肾素、抗衰 老等作用。
[0004] 过去，由于蛹虫草在野外产量稀少，其开发利用并没有被人们所重视。但自上世纪 九十年代末，其大规模人工培养获得成功以来，其开发利用价值便越来越被人们认识，特别 是针对虫草素的研究越来越多。人工培养中提高虫草素含量的生产应用主要分为提高液 体发酵培养物中虫草素含量、提高固体发酵培养物中虫草素含量和提高子实体中虫草素含 量三种途径，其中液体发酵培养和固体发酵培养主要以获取虫草素纯品为目标。而提高子 实体中虫草素含量则是以提高蛹虫草子实体的商品质量为目标。在提高虫草素含量的方法 上，目前已有的技术主要可概括为以下几个方面：1、通过菌种诱变和选育提高虫草素含量； 2、通过对培养基中营养成分优化提高虫草素含量；3、通过在培养基中添加前体物提高虫草 素含量；4、通过真菌激发子提高虫草素含量。目前，所开发的虫草产品越来越多，市场需求 也越来越大，蛹虫草子实体的人工栽培正成为一个具有极大经济价值的新兴产业，如何提 高蛹虫草子实体中虫草素含量具有很好的市场前景。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种提高蛹虫草子实体中虫草素含量的方法，它主要是通过 人工控制以提高虫草素含量，该方法与现有技术中已使用的蛹虫草子实体的培养方法以及 提高虫草素含量的方法可同时使用。
[0006] 本发明是通过如下技术方案来实现的：
[0007] 1)、菌丝培养：将接完种的瓶子放于15_18°C、严格避光环境中培养40-45天；当菌 丝将要长透培养基时，在培养基表层喷洒一层质量浓度为〇. 05-0. 10%的葡萄糖酸锌溶液， 喷洒量以刚好将培养基覆盖为准；白天控温18-25°C，夜间降至12-18°C，夜间给予光照，光 照不少于4小时，照度400-500LX ;
[0008] 2)、子实体培养：培养基表层形成微小子实体时，在培养基表层再次喷洒一层质 量浓度为〇. 05-0. 1 %的葡萄糖酸锌溶液，喷洒量以刚好将培养基覆盖为准；调整温度为 18-20°C，每天光照不少于12小时，照度1500-2000LX，培养8-12天；
[0009] 3)、将步骤2)中的培养至第8-12天的培养物的培养温度调至培养温度18-25°c， 其它条件不变，进行常规培养，直到收获。
[0010] 与现有技术相比，本发明具有如下优点：
[0011] 1、虫草菌丝体对锌离子有极强的富集能力，在锌离子胁迫下，菌丝体内虫草素含 量会增加，现有技术对锌离子的应用，一般采用在培养基配方中添加锌离子，这样做的好处 是操作方便，不足之处是菌丝体在初始阶段就接触锌离子，已经慢慢适应，等到需要刺激虫 草素增加的阶段，锌离子胁迫的效果不好。未加锌离子胁迫的所获得的子实体的虫草素含 量为0. 05-0. 10%;采用在培养基中添加锌离子，子实体虫草素含量可达0. 15-0. 25%;本发 明通过在特定的阶段培养基表层喷洒锌离子溶液，可以带来强烈的胁迫效果，子实体虫草 素含量可达〇. 25-0. 35%。
[0012] 2、现有技术，采用锌离子胁迫，锌离子溶液的浓度比较高，比如采用醋酸锌， 醋酸锌占培养基质量比的2-9%，而本发明的采用的喷洒的葡萄糖酸锌的溶液浓度为 0. 05-0. 10%，且用量少，节约成本，而且葡萄糖酸锌可以提供发酵需要的葡萄糖。
[0013] 3、本发明通过对虫草素采用锌离子胁迫，同时结合光照条件的调整，相比现有技 术，可以缩短一周以上的培养时间。
【具体实施方式】
[0014] 下面以实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
[0015] 实施例 1-10 :
[0016] 为了验证本发明的技术效果，2013年至2014年，使用本发明技术生产10个批次的 产品，每个批次的方法如下：
[0017] 1)、菌丝培养：将接完种的瓶子放于15_18°C、严格避光环境中培养40-45天；当菌 丝将要长透培养基时，在培养基表层喷洒一层质量浓度为0. 05-0. 1 %的葡萄糖酸锌溶液， 喷洒量以刚好将培养基覆盖为准；白天控温18_25°C，夜间降至12-18°C，夜间给予光照，光 照不少于4小时，照度400-500LX ;
[0018] 2)、子实体培养：培养基表层形成微小子实体时，在培养基表层再次喷洒一层质 量浓度为〇. 05-0. 1 %的葡萄糖酸锌溶液，喷洒量以刚好将培养基覆盖为准；调整温度为 18-20°C，每天光照不少于12小时，照度1500-2000LX，培养8-12天；
[0019] 3)、将步骤2)中的培养至第8-12天的培养物的培养温度调至培养温度18-25°C， 其它条件不变，进行常规培养，直到收获。
[0020] 每个批次随机抽取其中的一瓶，经检测，结果见下表：
[0021]
【权利要求】
1. 一种提高蛹虫草子实体中虫草素含量的方法，其特征在于： 包括如下步骤： 1) 、菌丝培养：将接完种的瓶子放于15-18°c、严格避光环境中培养40-45天；当菌丝将 要长透培养基时，在培养基表层喷洒一层质量浓度为〇. 05-0. 10%的葡萄糖酸锌溶液，喷洒 量以刚好将培养基覆盖为准；白天控温18_25°C，夜间降至12-18°C，夜间给予光照，光照不 少于4小时，照度400-500LX ; 2) 、子实体培养：培养基表层形成微小子实体时，在培养基表层再次喷洒一层质量浓度 为0. 05-0. 1 %的葡萄糖酸锌溶液，喷洒量以刚好将培养基覆盖为准；调整温度为18-20°C， 每天光照不少于12小时，照度1500-2000Lx，培养8-12天； 3) 、将步骤2)中的培养至第8-12天的培养物的培养温度调至培养温度18-25°C，其它 条件不变，进行常规培养，直到收获。
【文档编号】A01G1/04GK104221717SQ201410503303
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年9月26日 优先权日:2014年9月26日
【发明者】王运凤 申请人:桂林丰茂源农业技术开发有限公司, 王运凤