鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法
【专利摘要】本发明公开了一种鸡爪槭组培快繁新方法，它包括以下步骤，制备无菌活氧水；灭菌；制备培养基；培养基杀菌；繁殖与移栽，鸡爪槭茎段依次通过所述启动培养基、增殖培养基、生根培养基的培养，建立起鸡爪槭的快速繁殖体系，成功地培养出完整的生根的再生植株，移栽成活率达到90％左右。本发明克服鸡爪槭常规育苗周期长，扦插繁殖系数低等缺点，实现了鸡爪槭苗木的工厂化生产。
【专利说明】鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及槭树繁殖【技术领域】，尤其是涉及鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法。
【背景技术】
[0002]鸡爪槭0^6: ￠18111181:11111)别名雅枫，系槭树科槭树属,是城市景观中名贵的观赏树种。原产中国长江流域，日本、朝鲜半岛也有分布。我国主要分布于长江流域各省，多生于海拔1200111以下山地、丘陵之林缘或疏林中。鸡爪槭属落叶小乔木，高约8111，树皮深灰色，当年生枝紫色或淡紫绿色；多年生枝淡灰色、紫色或深紫色。鸡爪槭叶对生，直径7-10(3111，基部截形，掌状深裂，裂片5-9个，通常7裂，裂片卵状长圆形或披针性，顶端锐尖或长锐尖，边缘有不整齐的重锯齿，嫩叶密生柔毛。叶片在春天先红后绿，到秋季变成红色。伞房花序顶生，发叶后开花，花紫红色。翅果初为紫红色，成熟后为棕黄色，小坚果球形，直径7皿，脉纹显著；翅与小坚果共长2-2.5挪，宽1咖，张开成钝角。花期5月，果期9月。
[0003]鸡爪槭喜温暖、湿润气候及半阴环境，不耐错，较耐旱，在阳光直射处孤植夏季易遭日灼之害；适生于肥沃、湿润而排水良好之土壤，耐寒性不强，酸性、中性及石灰质土均能适应，是近年来竞相培育的优良观赏树种。
[0004]鸡爪槭具有极高的观赏价值，对城市景观的表现具有相当重要的作用，高速公路绿化带、公园、广场、小区绿地等地方随处可见到其优美的身姿。我国著名的苏州古典园林中的留园西部假山周围遍植鸡爪槭，春夏绿叶如盖，秋季红叶似火，与山水、亭台构成一副绝妙的美景；南京的植物园红枫园极具特色，树体高大，气势非凡的鸡爪槭是其主体树种。
[0005]鸡爪槭不仅能给城市绿化增加了绿量，而且能给城市风景增添绚丽多姿的色彩，极大地丰富城市景观，使城市景观充满活力与生机；同时，该植物具有较高的药用价值，其枝条、叶片可熬制成药，具有行气止痛，去毒消肿等功效。因此栽鸡爪槭具有很高的园林观赏价值和良好的经济效益。对二氧化硫和烟尘抗性较强，较耐阴，在高大树木庇荫下长势良好。鸡爪槭属于难生根的树种，扦插成活率低。
[0006]目前国内尚无鸡爪槭组织培养。
【发明内容】
[0007]本发明的目的即在于克服现有技术的不足，提供一种鸡爪槭组培快繁新方法，该方法培养基简单、培育时间短，操作方便，可以在较短的时间内增大扩繁基数，为工厂化育苗提供了技术支持。
[0008]本发明所解决的技术问题采用以下技术方案来实现:
[0009]鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法，该方法包括以下步骤:
[0010]步骤￡1、制备无菌活氧水
[0011]取自来水放于第一容器中，启动活氧发生装置，并将所述活氧发生装置所产生的活氧输入所述第一容器中，间隙搅拌使得活氧充分溶于水，制得无菌活氧水若干；
[0012]步骤6、灭菌
[0013]将初代培养鸡爪槭茎段整齐放入第二容器中，并将第一容器中所制得的无菌活氧水注入第二容器内，以漫过初代培养鸡爪槭茎段为准，先进行浸泡杀菌，然后通入活氧，再利用活氧对第二容器中的初代培养鸡爪槭茎段进行灭菌；
[0014]步骤制备培养基
[0015]在启动培养基内加入琼脂的同时还加入硅藻粉；
[0016]在增殖培养基内加入琼脂的同时还加入红藻淀粉；
[0017]在生根培养基内加入琼脂的同时加入金藻淀粉；
[0018]步骤4、培养基杀菌
[0019]将启动培养基、增殖培养基、生根培养基均放入一密闭箱体内，并向该箱体内通入活氧对上述各培养基进行杀菌；
[0020]步骤0、繁殖与移栽
[0021]启动培养基培养:取出第二容器中灭菌后的初代培养鸡爪槭茎段，有序置于经过步骤0与(1的启动培养基进行诱导腋芽萌发；
[0022]增殖培养基培养:将萌发的腋芽在经过步骤0与(1的增殖培养基上进行继代增殖；
[0023]生根培养基培养:继代增殖的小苗在经过步骤0与(1的生根培养基上进行生根培养；
[0024]移栽:生根幼苗经炼苗后移栽至草炭、硅藻粉、珍珠岩体积比为1: 0.6: 0.9的基质中进行正常栽培管理；
[0025]其中，步骤13中所述的初代培养鸡爪槭茎段浸泡杀菌时间不低于5分钟，活氧灭菌时间不少于30分钟。
[0026]步骤。中所述的启动培养基为剛69+^40.1^/1+1020.31^/1+蔗糖308/1+硅藻粉 0.4^/1 ；
[0027]所述的增殖培养基为剛69+^40.1^/1+0-300.81^/1+蔗糖308/1+红藻淀粉0.211^/1 ；
[0028]所述的生根培养基为剛69+^40.21^/1+蔗糖208/1+红藻淀粉0.21^/1+活性炭0.3^/1+金藻淀粉0.28呢凡。
[0029]步骤(1中所述的启动培养基、增殖培养基、生根培养基在所述箱体内进行活氧杀菌的时间不少于5分钟。
[0030]所述启动培养基、增殖培养基、生根培养基的邱5.5-5.80
[0031]步骤6中所述启动培养基培养的培养室温度为(24^1) I，光照时间12-1411从光照强度为2000-30000 ；
[0032]所述增殖培养基培养的培养室温度为(24^1) I，光照时间14-161^，光照强度为 2000-3000^ ；
[0033]所述生根培养基培养的培养室温度为(24^1)，光照时间14-1611/山光照强度为 2500-3000^ ；
[0034]所述小苗培养的培养室温度为(24^1) I，光照时间14-181^，光照强度为2500-30001^。
[0035]本发明具有的有益效果是:配方简单、成本低；鸡爪槭外植体茎段只需经启动培养、生根培养就能快速繁殖出鸡爪槭无菌苗，显著缩短了繁殖时间。本发明方法操作方便，可以在较短的时间内增大扩繁基数，为工厂化育苗提供了技术支持。
【专利附图】
【附图说明】
[0036]为了更清楚地说明本发明实施方案或现有技术中的技术方案，下面将对实施方案或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施方案，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0037]图1为本发明:鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法的流程示意图。
【具体实施方式】
[0038]为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。
[0039]参照图1所示，鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法，该方法包括以下步骤:
[0040]步骤￡1、制备无菌活氧水
[0041]取自来水放于第一容器中，启动活氧发生装置，并将所述活氧发生装置所产生的活氧输入所述第一容器中，间隙搅拌使得活氧充分溶于水，制得无菌活氧水若干。
[0042]步骤6、灭菌
[0043]将初代培养鸡爪槭茎段整齐放入第二容器中，并将第一容器中所制得的无菌活氧水注入第二容器内，以漫过初代培养鸡爪槭茎段为准，先进行浸泡杀菌，然后通入活氧，再利用活氧对第二容器中的初代培养鸡爪槭茎段进行灭菌；其中，所述的初代培养鸡爪槭茎段浸泡杀菌时间不低于5分钟，活氧灭菌时间不少于30分钟。
[0044]步骤制备培养基
[0045]在启动培养基内加入琼脂的同时还加入娃藻粉，所述启动培养基的组成为^69+^0.1^/1+1020.31^/1+ 蔗糖 308/1+ 硅藻粉 0.4呢5-5.8。硅藻粉的作用是借助细胞分裂进行营养繁殖，为腋芽萌发提供足够的营养的同时，提供丰富的叶色素基因，因为娃藻细胞内具有一至数个金褐色的色素体。色素体中含有叶绿素3、。和多量的胡萝卜素和叶黄素。
[0046]在增殖培养基内加入琼脂的同时还加入红藻淀粉，其中，增殖培养基的组成为剛69+嫩八0.1^/1+0-300.8^/1+蔗糖308/1+红藻淀粉0.2^/1,邱5.5-5.8。红藻淀粉的作用是为鸡爪槭提供更为丰富的色素基因，其色素体多呈红色或紫红色，其中除含有叶绿素、胡萝卜素和叶黄素外，还含有大量的藻红素和藻蓝素。
[0047]在生根培养基内加入琼脂的同时加入金藻淀粉，其中，生根培养基的组成为剛69+^40.2^/1+鹿糖208/1+红藻淀粉0.2^/1+活性炭0.3^/1+金藻淀粉0.28呢凡，邱5.5-5.8。金藻淀粉的作用是为鸡爪槭的生根提供必要的多糖的同时，提供不可多得的金黄色或金褐色色素基因。
[0048]步骤4、培养基杀菌
[0049]将启动培养基、增殖培养基、生根培养基均放入一密闭箱体内，并向该箱体内通入活氧对上述各培养基进行杀菌；其中，启动培养基、增殖培养基、生根培养基在所述箱体内进行活氧杀菌的时间不少于5分钟。
[0050]步骤6、繁殖与移栽
[0051]启动培养基培养:取出第二容器中灭菌后的初代培养鸡爪槭茎段，有序置于经过步骤0与(1的启动培养基进行诱导腋芽萌发，其中培养室温度为(24^1) I，光照时间12-1411/(1，光照强度为 2000-30000 ；
[0052]增殖培养基培养:将萌发的腋芽在经过步骤0与(1的增殖培养基上进行继代增殖，其中培养室温度为(24^1) I，光照时间14-1611/山光照强度为2000-30000 ；；
[0053]生根培养基培养:继代增殖的小苗在经过步骤0与(1的生根培养基上进行生根培养，其中培养室温度为(24^1) I，光照时间14-1611/山光照强度为2500-30000 ；；
[0054]小苗培养:将生根幼苗移栽至草炭、硅藻粉、珍珠岩体积比为1: 0.6: 0.9配置的基质中进行小苗培养，其中培养室温度为(24^1)，光照时间14-1811/山光照强度为2500-3000^ ；
[0055]移栽:将上述成活的小苗移栽到大田中生长。
[0056]以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
【权利要求】
1.鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法，其特征在于，该方法包括以下步骤: 步骤a、制备无菌活氧水 取自来水放于第一容器中，启动活氧发生装置，并将所述活氧发生装置所产生的活氧输入所述第一容器中，间隙搅拌使得活氧充分溶于水，制得无菌活氧水若干； 步骤b、灭菌 将初代培养鸡爪槭茎段整齐放入第二容器中，并将第一容器中所制得的无菌活氧水注入第二容器内，以漫过初代培养鸡爪槭茎段为准，先进行浸泡杀菌，然后通入活氧，再利用活氧对第二容器中的初代培养鸡爪槭茎段进行灭菌； 步骤C、制备培养基 在启动培养基内加入琼脂的同时还加入硅藻粉； 在增殖培养基内加入琼脂的同时还加入红藻淀粉； 在生根培养基内加入琼脂的同时加入金藻淀粉； 步骤d、培养基杀菌 将启动培养基、增殖培养基、生根培养基均放入一密闭箱体内，并向该箱体内通入活氧对上述各培养基进行杀菌； 步骤e、繁殖与移栽 启动培养基培养:取出第二容器中灭菌后的初代培养鸡爪槭茎段，有序置于经过步骤c与d的启动培养基进行诱导腋芽萌发； 增殖培养基培养:将萌发的腋芽在经过步骤C与d的增殖培养基上进行继代增殖； 生根培养基培养:继代增殖的小苗在经过步骤C与d的生根培养基上进行生根培养；小苗培养:将生根幼苗移栽至草炭、硅藻粉、珍珠岩体积比为1: 0.6: 0.9配置的基质中进行小苗培养； 移栽:将上述成活的小苗移栽到大田中生长。
2.根据权利要求1所述的鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法，其特征在于:步骤b中所述的初代培养鸡爪槭茎段浸泡杀菌时间不低于5分钟，活氧灭菌时间不少于30分钟。
3.根据权利要求1所述的鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法，其特征在于:步骤c中所述的启动培养基为 NN69+NAA0.lmg/L+TDZ0.3mg/L+ 蔗糖 30g/L+ 硅藻粉 0.4mg/L ； 所述的增殖培养基为NN69+NAA0.lmg/L+KT-30 0.8mg/L+蔗糖30g/L+红藻淀粉0.2mg/L ； 所述的生根培养基为NN69+NAA0.2mg/L+蔗糖20g/L+红藻淀粉0.2mg/L+活性炭0.3g/L+金藻淀粉0.28mg/L。
4.根据权利要求1所述的鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法，其特征在于:步骤d中所述的启动培养基、增殖培养基、生根培养基在所述箱体内进行活氧杀菌的时间不少于5分钟。
5.根据权利要求3所述的鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法，其特征在于:所述启动培养基、增殖培养基、生根培养基的pH 5.5-5.8。
6.根据权利要求1所述的鸡爪槭的组织培养快速繁殖方法，其特征在于:步骤e中所述启动培养基培养的培养室温度为(24±1) °C,光照时间12-14h/d,光照强度为2000-3000LX ； 所述增殖培养基培养的培养室温度为(24±1) *€，光照时间14-16h/d，光照强度为2000-3000LX ； 所述生根培养基培养的培养室温度为(24±1) *€，光照时间14-16h/d，光照强度为2500-3000LX ； 所述小苗培养的培养室温度为(24±1) °C，光照时间14-18h/d，光照强度为2500-3000LX。
【文档编号】A01H4/00GK104285818SQ201410611945
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年10月30日 优先权日:2014年10月30日
【发明者】李倩中, 荣立苹, 李淑顺, 唐玲 申请人:江苏省农业科学院