一种顶果木组织培养方法
【专利摘要】一种顶果木组织培养方法，包括以下步骤：步骤一，外植体选择；步骤二，外植体处理；步骤三，接种；步骤四，诱导培养基制定；步骤五，继代培养基制取；步骤六，壮苗培养；诱导培养基制作配方为，MS+6BA 1mg/L+NAA 0.2mg/L+白糖30g+琼脂6.5g；继代培养制作选取配方，MS+6BA 0.6 mg/L+NAA0.2 mg/L+白糖30g+琼脂6.5g；该顶果木的无性快速繁殖方法，采用三种不同的培养基进行顶果木培养，它可以使顶果木在相对短的时间内大规模繁殖出外观整齐的植株，再生植株变异低；再生体系非常高效；平均单株再生苗的成本极低，适合顶果木的大批量高效快速繁殖，非常适用于工厂化生产。
【专利说明】_种顶果木组织培养方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及组培【技术领域】，尤其是一种顶果木组织培养方法。
【背景技术】
[0002]顶果木生长很快，属阳性树种，落叶或者半落叶大乔木，高大挺拔。有资料显示，顶果木早期特别速生，寿命长、衰退慢，可培育大径级木材。萌发力很强，伐后可萌发植株。可作绿化、防风固土和用材。其木材纹理直、耐水湿、坚硬、韧性好，适用于建筑、家具等，特别适用于制作耐水湿的用具；
[0003]现有技术对于顶果木的快速繁殖一般没有一种或者几种比较适宜的培养基作为诱导，导致其在快速繁殖出现以下不良情况:植株的生长不整齐，植株变异率较高，进而给后期的种植带来较多的麻烦。
【发明内容】
[0004]现有技术不能满足人们的需要，为弥补现有技术的不足，本发明旨在提供一种顶果木组织培养方法。
[0005]为实现该技术目的，本发明的方案是:一种顶果木组织培养方法，包括以下步骤:步骤一，外植体选择；步骤二，外植体处理；步骤三，接种；步骤四，诱导培养基制定；步骤五，继代培养基制取；步骤六，壮苗培养。
[0006]其中在步骤一中:采用半年生幼苗的幼嫩叶芽作为外植体进行组培；
[0007]在步骤二中:将步骤一选择的外植体剪掉多余的叶片后用洗衣粉浸泡10分钟，冲洗干净后置于超净工作台上，用75%酒精消毒20秒，无菌水冲洗1-2次后再用0.1%氯化汞加吐温80，2-3滴混合溶液震荡消毒7分钟，无菌水冲洗4-5次后吸干；
[0008]在步骤三中:由步骤二处理好的外植体接种于启动培养基中暗培养7天后转到光照下培养每天12小时灯光，光照强度1500?2000Lux，20°C?30°C，25?30天继代一次；
[0009]在步骤四中:诱导培养基制作配方为，MS+6BA lmg/L+NAA 0.2mg/L+白糖30g+琼脂 6.5g ；
[0010]在步骤五中:继代培养制作选取配方，MS+6BA 0.6mg/L+NAA0.2mg/L+白糖30g+琼脂 6.5g ；
[0011]在步骤六中:壮苗培养，选用培养基配方为改良1/2MS+6BA 0.3mg/L+NAA0.2mg/L+1BA0.5mg/L+ 白糖 20g+ 卡拉胶 7g。
[0012]与现有技术相比，本发明的有益效果是:该顶果木组织培养方法，采用三种不同的培养基进行顶果木组织培养，它可以使顶果木在相对短的时间内大规模繁殖出外观整齐的植株，再生植株变异低；再生体系非常高效；平均单株再生苗的成本极低，适合顶果木的大批量高效快速繁殖，非常适用于工厂化生产。
【具体实施方式】
[0013]下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。
[0014]本发明实施例中，一种顶果木组织培养方法，包括以下步骤:步骤一，外植体选择；步骤二，外植体处理；步骤三，接种；步骤四，诱导培养基制定；步骤五，继代培养基制取；步骤六，壮苗培养。
[0015]其中在步骤一中:采用半年生幼苗的幼嫩叶芽作为外植体进行组培；
[0016]在步骤二中:将步骤一选择的外植体剪掉多余的叶片后用洗衣粉浸泡10分钟，冲洗干净后置于超净工作台上，用75%酒精消毒20秒，无菌水冲洗1-2次后再用0.1%氯化汞加吐温80 2-3滴，混合溶液震荡消毒7分钟，无菌水冲洗4-5次后吸干。
[0017]在步骤三中:由步骤二处理好的外植体接种于启动培养基中暗培养7天后转到光照下培养每天12小时灯光，光照强度1500?2000Lux，20°C?30°C，25?30天继代一次；
[0018]在步骤四中:诱导培养基制作配方为，MS+6BA lmg/L+NAA 0.2mg/L+白糖30g+琼脂 6.5g ；
[0019]在步骤五中:继代培养制作选取配方，MS+6BA 0.6mg/L+NAA0.2mg/L+白糖30g+琼脂 6.5g ；
[0020]在步骤六中:壮苗培养，选用培养基配方为改良1/2MS+6BA 0.3mg/L+NAA0.2mg/L+1BA0.5mg/L+ 白糖 20g+ 卡拉胶 7g。
[0021]实施例一(采用以下培养基的效果为)
[0022]诱导培养基MS+6BA lmg/L+NAA 0.2mg/L+白糖30g+琼脂6.5g 30d后叶芽开始萌动。
[0023]继代培养基MS+6BA 0.6mg/L+NAA0.2mg/L+ 白糖 30g+ 琼脂 6.5g 增值系数达 4.2。
[0024]生根培养改良1/2MS+6BA 0.3mg/L+NAA0.2mg/L+IBA0.5mg/L+ 白糖 20g+ 卡拉胶 7g生根率86%。
[0025]实施例二(以种子立体培养为例)
[0026]种子离体培养洗衣粉溶液冲洗种子1-2次，清水冲洗干净后，在超净工作台用75%酒精消毒10秒钟，无菌水冲洗1-2次后用0.1%氯化汞溶液消毒3分钟，无菌水冲洗4-5次，吸干后接种到萌发培养基l/2MS+30g白糖+6.5g琼脂；
[0027]培养结果:
[0028]改良MS+6BAlmg/L+NAA0.5mg/L+30g白糖+6.5g琼脂20d后丛生芽开始分化；
[0029]改良MS+6BA2mg/L+NAA0.5mg/L+30g白糖+6.5g琼脂丛生芽增殖增殖倍数3.630d继代一次；
[0030]改良1/2MS+6BA 0.3mg/L+NAA0.2mg/L+IBA0.5mg/L+ 白糖 20g+ 卡拉胶 7g 生根率86%0
[0031]对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其它的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何标记视为限制所涉及的权利要求。
[0032]以上所述，仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡是依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何细微修改、等同替换和改进，均应包含在本发明技术方案的保护范围。
【权利要求】
1.一种顶果木组织培养方法，包括以下步骤:步骤一，外植体选择；步骤二，外植体处理；步骤三，接种；步骤四，诱导培养基制定；步骤五，继代培养基制取；步骤六，壮苗培养；其特征在于: .51.其中在步骤一中:采用半年生幼苗的幼嫩叶芽作为外植体进行组培； .52.在步骤二中:将步骤一选择的外植体剪掉多余的叶片后用洗衣粉浸泡10分钟，冲洗干净后置于超净工作台上，用75%酒精消毒20秒，无菌水冲洗1-2次后再用0.1%氯化汞加吐温802-3滴，混合溶液震荡消毒7分钟，无菌水冲洗4-5次后吸干； .53.在步骤三中:由步骤二处理好的外植体接种于启动培养基中暗培养7天后转到光照下培养每天12小时灯光，光照强度1500?2000Lux，20°C?30°C，25?30天继代一次； . 54.在步骤四中:诱导培养基制作配方为，MS+6BAlmg/L+NAA0.2mg/L白糖+30g+琼脂.6.5g ； . 55.在步骤五中:继代培养制作选取配方，MS+6BA0.6mg/L+NAA0.2mg/L+白糖30g+琼脂 6.5g ； .56.在步骤六中:状苗培养，选用培养基配方为改良1/2MS+6BA0.3mg/L+NAA0.2mg/L+IBA0.5mg/L+ 白糖 20g+ 卡拉胶 7g。
【文档编号】A01H4/00GK104429960SQ201410726928
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2014年11月27日 优先权日:2014年11月27日
【发明者】王立 申请人:王立