促进丹参毛状根中迷迭香酸和丹酚酸b积累的诱导法
【专利摘要】本发明公开了一种促进丹参毛状根中迷迭香酸和丹酚酸B积累的诱导法，包括以下步骤：1)、丹参毛状根的初培养：在每100mL的6,7-V培养基中接种0.3～0.4g丹参毛状根，于100～150rpm、24～26℃的培养条件下黑暗培养17～19天；2)、丹参毛状根的继续培养：然后添加5-氮杂胞苷溶液，使6,7-V培养基中5-氮杂胞苷的终浓度为9～11μM；于100～150rpm、24～26℃的培养条件下黑暗培养5～7天。本发明通过使用5-氮杂胞苷处理丹参毛状根，从而促进丹参毛状根中次生代谢产物迷迭香酸和丹酚酸B的积累。
【专利说明】促进丹参毛状根中迷迭香酸和丹酚酸B积累的诱导法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种促进丹参毛状根中迷迭香酸和丹酚酸B积累的诱导法。
【背景技术】
[0002] 丹参（Salviamiltiorrhiza)为唇形科植物丹参的根及根莖，有活血祛瘀，清热安 神、养血益气之功效。丹酚酸是丹参有效成分之一，主要包括迷迭香酸和丹酚酸B等。由于 在治疗心血管系统疾病中的突出表现和无毒负作用的特点，丹参的应用和研宄也越来越广 泛。
[0003] 目前现有的丹参毛状根可采用6, 7-V培养基进行培养。一般称取新鲜丹参毛状根 0. 15?0. 2g接种于50mL的6, 7-V培养基中进黑暗培养。丹参毛状根在生产丹参有效成分 方面有着巨大潜力，但活性成分含量较低已成为制约丹参毛状根应用的瓶颈。
[0004] 含30g/L蔗糖的6, 7-V培养基的配方如表1所示，pH值为5. 8,121°C灭菌20min。
[0005] 表1、6, 7-V培养基的配方
[0006]
【权利要求】
1. 促进丹参毛状根中迷迭香酸和丹酚酸B积累的诱导法，其特征是包括以下步骤： 1) 、丹参毛状根的初培养： 在每lOOmL的6, 7-V培养基中接种0. 3?0. 4g丹参毛状根，于100?150rpm、24? 26°C的培养条件下黑暗培养17?19天； 2) 、丹参毛状根的继续培养： 然后添加5-氮杂胞苷溶液，使6, 7-V培养基中5-氮杂胞苷的终浓度为9?11 yM ;于 100?150rpm、24?26°C的培养条件下黑暗培养5?7天。
2. 根据权利要求1所述的促进丹参毛状根中迷迭香酸和丹酚酸B积累的诱导法，其特 征是： 5_氮杂胞苷溶液的配制方法为： 将0. 1221g的5-氮杂胞苷溶于5ml无菌水中，用0. 22 ym无菌滤头过滤除菌，得5-氮 杂胞苷溶液。
3. 根据权利要求1或2所述的促进丹参毛状根中迷迭香酸和丹酚酸B积累的诱导法， 其特征是： 步骤2)中5-氮杂胞苷的终浓度为10 y M。
4. 根据权利要求3所述的促进丹参毛状根中迷迭香酸和丹酚酸B积累的诱导法，其特 征是： 所述步骤1)和步骤2)的培养条件均为：110rpm，25°C ; 步骤1)的黑暗培养时间为18天，步骤2)的黑暗培养时间为6天。
【文档编号】A01H4/00GK104472363SQ201410735636
【公开日】2015年4月1日 申请日期:2014年12月5日 优先权日:2014年12月5日
【发明者】梁宗锁, 杨东风, 黄志成, 郭万里, 祁哲晨, 张晓丹 申请人:浙江理工大学