一种鱼类肠道菌群移植再利用的方法与流程

文档序号:12300823阅读:877来源:国知局

本发明涉及鱼类养殖领域,尤其是一种鱼类肠道菌群移植再利用的方法。



背景技术:

近年来,关于人体肠道微生物的研究已经成为一个热点,很多研究发现人体肠道微生物与人类疾病、健康及生长等密切相关。人体肠道微生物组计划被认为是第二个基因组计划。与人类肠道微生物研究相比,动物如利用鸡、猪等的肠道菌群报道较少,而其他动物的肠道微生物研究更少。

鱼类肠道微生物的研究现在还处在起步阶段,关于其肠道微生物组成、种类与鱼本身的生长、营养、免疫等相关性研究也较少。关于鱼肠道粪便(菌群)的重复再利用研究几乎没有。由于鱼类生活在水中,个体小、且无法咀嚼,现有的关于其他动物的肠道粪便(菌群)移植方法均不适合于鱼类。另外,鱼类肠道粪便在水中容易分解,导致菌群浓度过低,形成不了优势菌群,而且会导致水体污染,影响鱼类健康。



技术实现要素:

本发明的目的是为了解决现有技术中,鱼类肠道粪便容易在水中分解,对患病鱼治疗效果差的问题,进而提供一种鱼类肠道菌群移植再利用的方法。

本发明的技术方案是:一种鱼类肠道菌群移植再利用的方法,包括如下步骤:

步骤一、收集健康鱼类肠道粪便,添加到无菌生理盐水中溶解,搅拌均匀后过滤,收集滤后的健康鱼类肠道粪便菌液;

步骤二、健康鱼类肠道粪便菌液中加入固化剂,混合后放置,待其变软后,制成鱼类所能摄食的形状大小的颗粒物;

步骤三、将所述颗粒物投喂给患病鱼,即实现鱼类肠道菌群移植再利用。

进一步地,步骤一中鱼类肠道粪便与无菌生理盐水的比例为1:10。

进一步地,步骤一中的操作在无菌环境下进行,收集健康鱼类肠道粪便采用虹吸的方法。

进一步地,步骤二健康鱼类肠道粪便菌液中还加入诱食剂和营养物质。

进一步地,诱食剂为鱼油和麝香米,营养物质为葡萄糖、氯化钠和尿素。

进一步地,固化剂为琼脂粉。

本发明具有如下有益效果:本发明一种鱼类肠道菌群移植再利用的方法,针对鱼类没有牙齿、在水中生活等特点,将鱼类肠道粪便(菌群)作为一种微生物的集合重新利用起来,并且加入固化剂使其在水中不会扩散、不分解,并且可以制成鱼类可以摄食的形状,保证了菌群的多样性、种类、比例关系不被破坏,同时也便于患病鱼摄食,起到了更好的治疗效果。

具体实施方式

本发明一种鱼类肠道菌群移植再利用的方法,包括如下步骤:

步骤一、收集健康鱼类肠道粪便,添加到无菌生理盐水中溶解,搅拌均匀后过滤,收集滤后的健康鱼类肠道粪便菌液;

步骤二、健康鱼类肠道粪便菌液中加入固化剂,混合后放置,待其变软后,制成鱼类所能摄食的形状大小的颗粒物;

步骤三、将所述颗粒物投喂给患病鱼,即实现鱼类肠道菌群移植再利用。

步骤一中的操作在无菌环境下进行,收集健康鱼类肠道粪便采用虹吸的方法。鱼类肠道粪便与无菌生理盐水的比例为1:10。

步骤二中健康鱼类肠道粪便菌液中还加入了诱食剂和营养物质。优选地,诱食剂为鱼油和麝香米,营养物质为葡萄糖、氯化钠和尿素。固化剂为琼脂粉,琼脂粉起塑性和凝固作用,并在水体中形成保护层,阻止粪便菌液分解扩散。每1000毫升滤后的液体中添加琼脂粉15g、葡萄糖15g、氯化钠5g、尿素0.5g、鱼油10g和麝香米5g。

上述步骤一中的过滤液起到菌源的作用,步骤二中的琼脂粉起到固化的作用,鱼油和麝香米起到诱食的作用,通过以上物质的混合,可以起到在不改变原有菌源性质的情况下,诱使鱼类迅速的摄食此物质,从而达到鱼肠道菌群(粪便)移植再利用的目的。

本发明特别添加了固化剂琼脂粉,其在液体状态下,放置一段时段后,就会呈现果冻状的物质。利用其特性,可将鱼类肠道菌群制成果冻状的颗粒大小的饲料,这样混合物在水体中不会扩散,可以被鱼类积极摄食,继而在体内分解利用,将菌源有效的带入到患病鱼肠道中。

下面结合具体实施例对本发明做进一步说明:

具体实施方式一

一种鱼类肠道菌群移植再利用的方法,包括如下步骤:

步骤一、利用虹吸的方法,将鱼类粪便利用无菌的容器收集在无菌容器中,添加无菌生理盐水将其溶解,鱼类肠道粪便与无菌水的比例为1:10;将溶解好后的鱼肠道粪便混合物,通过无菌的普通定性滤纸过滤,滤掉固体残渣,过滤后的液体放于无菌的玻璃容器中;

步骤二、将过滤后的液体中,放入琼脂粉、葡萄糖、氯化钠、尿素、鱼油、麝香米,使之充分混合,放置30分钟;以上物质的添加比例为:每1000毫升滤液(混合后过滤液)中添加琼脂粉15g,葡萄糖15g,氯化钠5g,尿素0.5g,鱼油10g,麝香米5g;此时,放置30分钟的物质呈现柔软固态状,利用无菌的钥匙将其均匀涂布于无菌塑料模板上,无菌塑料模板以鱼类所摄食饲料的大小、形状一致,通过此步骤,以上的混合物完全呈现鱼饲料的形状;

步骤三、通过以上步骤获得的颗粒物,可以被鱼类积极的摄食,从而进入鱼类的肠道,通过24h左右,即可有菌群根植于此鱼类肠道中,并且通过一段时间的连续摄食,可以起到鱼类肠道菌群(粪便)移植的效果。

具体实施方式二

步骤一、与具体实施方式一相同;

步骤二、将过滤后的液体中,放入琼脂粉、葡萄糖、氯化钠、尿素、鱼油、麝香米,使之充分混合,(以上物质的添加比例为:每1000毫升滤液中添加琼脂粉15g,葡萄糖15g,氯化钠5g,尿素0.5g,鱼油10g,麝香米5g),其余部分与具体实施方式一相同;

步骤三、与具体实施方式一相同。

对比试验:

试验分组:试验分为3组,A组利用本发明内容添加、移植有益菌群,B组添加未被琼脂固化的有益菌群,C组为不添加肠道菌群组。

试验指标测定:

1个指标为所移植鱼类菌群中的细菌占原有鱼类细菌组成中的比例;另1个位鱼类的健康程度即成活率。

试验结果:

可以发现,(1):A组鱼肠道中所移植的细菌占原有细菌比例为80%;B组为40%;C组由于是对照组,为零,试验结果说明,通过本实验的方法,可以起到将鱼类中的有益菌群快速、有效的移植到新的鱼类肠道中的作用;(2):A组鱼的成活率为95%,B组为43%,C组由于是对照组,为零,试验结果寿命,通过本实验的方法,可以有效的将健康鱼肠道中的有益菌群快速移植到其它鱼类肠道中,并起到有益的作用。

实验证明未被琼脂固化的肠道菌,在水中会扩散,浓度过低,形成不了优势菌群,杂菌多造成水体污染,而添加固化后的肠道菌,因为不会扩散所以其浓度得到提升,治疗效果最好。

上述内容仅为本发明的较佳实施例,并非用于限制本发明的实施方案,本领域普通技术人员根据本发明的主要构思和精神,可以十分方便地进行相应的变通或修改,故本发明的保护范围应以权利要求书所要求的保护范围为准。

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