一种白蝴蝶的组培繁殖方法与流程

文档序号:11489018阅读:388来源:国知局

本发明涉及组织培养技术领域,具体涉及一种白蝴蝶的组培繁殖方法。



背景技术:

白蝴蝶(syngoniumpodophyllum),又名箭叶芋、紫梗芋、剪叶芋、丝素藤、果芋,为天南星科合果芋属植物。合果芋株态优美,叶形多变,色彩清雅,它与绿萝、蔓绿绒誉为天南星科的代表性室内观叶植物。也是目前欧美十分流行的室内吊盆装饰材料。

为满足市场的需求,白蝴蝶的人工繁殖及培养技术被大量研究及应用,而组培繁殖是最适合白蝴蝶人工培育的繁殖方法,组培繁殖技术是实现白蝴蝶规模化、产业化培育和生产的最优技术。



技术实现要素:

本发明所要解决的技术问题是:本发明的目的在于提供一种成活率高的白蝴蝶的组培繁殖方法。

为了解决上述技术问题,本发明采用的技术方案为:提供一种白蝴蝶的组培繁殖方法,包括以下步骤:

1)取白蝴蝶的顶芽作为外植体材料,将外植体使用1‰的升汞浸泡消毒30min;

2)将已消毒的外植体接种于ms培养基上,所述ms培养基包括如下组分:6-ba1.5-2mg/l,naa0.8-1mg/l,琼脂5-7g/l和蔗糖30-40g/l,所述ms培养基的ph为5-6;

3)将步骤2)接种后ms培养基放入到培养箱进行培养;所述培养条件为:温度26-28度,光照强度300-500lx,培养时间为4-5周。

优选的,上述的白蝴蝶的组培繁殖方法中,所述ms培养基包括如下组分:6-ba1.5mg/l,naa0.8mg/l,琼脂5g/l和蔗糖30g/l。

优选的,上述的白蝴蝶的组培繁殖方法中,所述ms培养基的ph为5.4。

优选的,上述的白蝴蝶的组培繁殖方法中,所述培养条件具体为:温度26度,光照强度400lx,培养时间为4周。

优选的,上述的白蝴蝶的组培繁殖方法中,所述步骤1)后还包括步骤:将外植体使用1‰的升汞浸泡消毒25-30min后,切去升汞腐蚀部分。

优选的,上述的白蝴蝶的组培繁殖方法中,所述步骤:“切去升汞腐蚀部分”后还包括步骤:用无菌水清洗3-5遍。

优选的,上述的白蝴蝶的组培繁殖方法中,具体包括如下步骤:

1)取白蝴蝶的顶芽作为外植体材料,将外植体使用1‰的升汞浸泡消毒30min,切去升汞腐蚀部分,然后用无菌水清洗5遍;

2)将已消毒的外植体接种于ms培养基上;

3)将步骤2)接种后ms培养基放入到培养箱进行培养;所述培养条件为:温度26-28度,光照强度300-500lx,培养时间为4周,所述ms培养基包括如下组分:6-ba1.5mg/l,naa0.8mg/l,琼脂5g/l和蔗糖30g/l,所述ms培养基的ph为5.4。

优选的,上述的白蝴蝶的组培繁殖方法中,所述步骤3)后还包括步骤:4)组培苗移栽,移栽时采用的种植基质为质量比为3:1的德国泥炭藓:珍珠岩。

本发明的有益效果在于:本发明的白蝴蝶的组培繁殖方法中,使用顶芽为外植体,升汞消毒时间为30min,以提高成活率。再在ms培养基的基础上通过调整激素的配比浓度、蔗糖的用量以及ph等,得到白蝴蝶最适宜的培养基,最终提升产品品质,降低成本。

具体实施方式

为详细说明本发明的技术内容、所实现目的及效果,以下结合实施方式予以说明。

本发明最关键的构思在于:使用顶芽为外植体,升汞消毒时间为30min,以提高成活率。

实施例1

一种白蝴蝶的组培繁殖方法,包括以下步骤:

1)取白蝴蝶的顶芽作为外植体材料,将外植体使用1‰的升汞浸泡消毒30min,切去升汞腐蚀部分,然后用无菌水清洗3-5遍;

2)将已消毒的外植体接种于ms培养基上;

3)将步骤2)接种后ms培养基放入到培养箱进行培养;所述培养条件为:温度26-28度,光照强度300-500lx,培养时间为4-5周,所述ms培养基包括如下组分:6-ba1.5mg/l,naa0.8mg/l,琼脂5g/l和蔗糖30g/l,所述ms培养基的ph为5.4。

4)组培苗移栽,移栽时采用的种植基质为质量比为3:1的德国泥炭藓:珍珠岩。

实施例2

一种白蝴蝶的组培繁殖方法,包括以下步骤:

1)取白蝴蝶的顶芽作为外植体材料,将外植体使用1‰的升汞浸泡消毒30min;切去升汞腐蚀部分。用无菌水清洗3-5遍。

2)将已消毒的外植体接种于ms培养基上,所述ms培养基包括如下组分:6-ba2mg/l,naa1mg/l,琼脂7g/l和蔗糖40g/l,所述ms培养基的ph为6;

3)将步骤2)接种后ms培养基放入到培养箱进行培养;所述培养条件为:温度28度,光照强度500lx,培养时间为5周。

4)将步骤3)所得组培苗移栽,移栽时采用的种植基质为质量比为3:1的德国泥炭藓:珍珠岩。

实施例3

一种白蝴蝶的组培繁殖方法,包括以下步骤:

1)取白蝴蝶的顶芽作为外植体材料,将外植体使用1‰的升汞浸泡消毒30min,切去升汞腐蚀部分,然后用无菌水清洗5遍;

2)将已消毒的外植体接种于ms培养基上,所述ms培养基包括如下组分:6-ba1.5mg/l,naa0.8mg/l,琼脂5g/l和蔗糖30g/l,所述ms培养基的ph为5-6;

3)将步骤2)接种后ms培养基放入到培养箱进行培养;所述培养条件为:温度26度,光照强度300lx,培养时间为4周。

4)将步骤3)所得组培苗移栽,移栽时采用的种植基质为质量比为3:1的德国泥炭藓:珍珠岩。

对比试验

1、采用资源圃中高约35-40cm,无可见病斑、虫害,无变异,无花叶,具有白蝴蝶母本基本生长性状的健壮母株上的顶芽和侧芽作为外植体。

1.1试验方法

将选好的母株停止浇水放置于资源圃竹楼中,进行5天的预处理。待其基质表面以下20-50mm处的土层干燥、均匀一致(用手捏成散沙状,不粘手),植株叶片呈现轻度萎蔫时便剥去其外部老叶、枯叶直至顶芽紧凑处,用手术刀在植株离地面2-3节处切下。后在微生物室工作台上将植株基部老组织、根眼及周围污渍轻轻削净并把芽点四周切平滑,并进行分段,每芽一段,将分好段的外植体装于干净的杯子中,然后用洗洁精洗净,沥干。按芽的大小及老嫩程度进行分类,将分类好的芽放置于无菌空瓶中,8-10个为一瓶。在瓶盖上标明植物代码及消毒时间,用1‰的升汞进行消毒。然后用无菌水清洗3-5遍(每次3-5min),切去外植体被升汞腐蚀的部分,再接种到ms培养基上(1个/瓶)。具体消毒处理如表1。

表1

培养条件:27±1℃;300-500lx;4w,所述ms培养基包括如下组分:6-ba1.5mg/l,naa0.8mg/l,琼脂5g/l和蔗糖30g/l,所述ms培养基的ph为5.4。

上述的白蝴蝶的组培繁殖方法中,ms培养基中的6-ba和naa的激素浓度利于白蝴蝶芽长高与叶片白斑出现,体现品种特性,激素浓度升高或降低效果就会下降;蔗糖浓度为30g/l时,白蝴蝶白斑明显且多,材料长势粗壮,最好,蔗糖浓度升高或降低效果就会下降;ph5.4易液化,利于材料生长与白斑的出现。

2、结果与分析

白蝴蝶在温度27±1℃,光照强度300-500lx的条件下培养4w后,调查指标:芽萌动时间;真、细菌污染率;死亡率;成活率,具体调查结果详见表2。

表2

经调查发现:本次白蝴蝶原种制作试验中顶芽的成活率(43.3%)比侧芽的成活率(21.3%)要高出许多,说明本试验中白蝴蝶以顶芽为外植体试验效果较好。试验中处理a、处理d及处理e中均既无真菌污染现象又无死亡现象,说消毒时间为30min较为适宜。处理b中死亡率达到了3.9%,原因可能是较长时间的升汞消毒,导致芽的死亡。而处理c中真菌污染率及细菌污染率均较其他处理要高,原因可能是消毒时间不够升汞消毒不彻底所导致。

以上所述仅为本发明的实施例,并非因此限制本发明的专利范围,凡是利用本发明说明书内容所作的等同变换,或直接或间接运用在相关的技术领域,均同理包括在本发明的专利保护范围内。

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