十字花科抗根肿病材料筛选方法及所使用的无土栽培培养杯与流程

本发明属于无土栽培技术领域，特别涉及一种十字花科抗根肿病材料筛选方法及所使用的无土栽培培养杯。

背景技术：

十字花科植物根肿病是由芸苔根肿菌侵染引起的一种世界性病害，任何十字花科植物的感病品种都可以被这一病原菌侵染，病原休眠孢子囊萌发而产生游动孢子侵入根毛细胞内形成变形体，穿过根部各种组织直到根部形成层内，刺激薄壁细胞使之大量分裂和增大，导致根部畸形肿大难以将营养物输送至植株体。此外，病菌从根毛侵入到表现根肿症状一般历时8-10天，晚期可引起病根腐烂。所以，在环境条件有利于病害发生的情况下可导致十字花科植物产量严重下降，甚至绝收，而且发生过根肿病的土壤将长期带菌，不再适宜栽培十字花科植物，因此，该病对于十字花科的生产一直以来都是一大危害，是国内外学者研究的热点。

对抗根肿病材料的筛选过程中需对染病十字花植株的根部进行观测、摄像等操作，需用无土栽培工具，现有技术中虽然有多种无土栽培装置可供选择，但大多装置设计不具针对性，不能为根肿病侵染及抗根肿病材料筛选创造良好条件。

技术实现要素：

本发明避光杯体及杯盖设计为种子萌发提供暗环境，透明杯体设计在不破坏栽培植物的同时，便于对植物根系生长的观测及拍照摄像等科学研究，便于对十字花科抗根肿病材料的筛选，实用性强，适合推广使用。

本发明提供了一种无土栽培培养杯，包括上端开口的透明杯体、避光杯体，所述透明杯体套设在所述避光杯体内，所述透明杯体侧壁上沿竖直方向设置有水位刻度，所述避光杯体侧壁上、与所述水位刻度相对应处开设有观察口，且所述观察口边缘处铰接有观察门，所述避光杯体开口上盖合有避光的杯盖，所述杯盖上开设有种植孔、通气孔和导管孔，所述避光杯体外侧壁上设置有增氧泵，且所述增氧泵通过导管与所述导管孔连通；

绕所述种植孔边缘设有贯穿所述杯盖的“u”形种植框，且所述“u”形种植框的三个侧面均垂直于所述杯盖设置，所述“u”形种植框的相互平行的两个内侧面上设置有上、下两对横向的滑槽，位于所述“u”形种植框上端的一对所述滑槽之间滑动连接有遮光板，位于所述“u”形种植框下端的一对所述滑槽之间滑动连接有播种盘，所述播种盘中部设置有播种网。

优选的，所述播种盘与所述杯盖的竖直距离≥10mm且≤15mm。

优选的，所述遮光板和所述播种盘的尾端均设有凸沿。

一种利用上述的无土栽培培养杯筛选十字花科抗根肿病材料的方法，包括如下步骤：

s1，向所述透明杯体内注入营养液，在所述播种网上放置十字花科种子，并使十字花科种子部分体积浸于营养液中，所述种植孔用所述遮光板遮挡，培养种植直至种子发芽；

s2，s1中种子发芽后移除所述遮光板，按照1次/d的频率补充营养液，如此栽培5-7d后向营养液中补充氧气；

s3，栽培至12-14d后，将s2中营养液替换成根肿病菌液；接菌7d后，将培养杯中的菌液更换为营养液，继续培养，得接菌十字花科植株；

其中，所述菌液按照以下方法制备：将染根肿病根块加蒸馏水后磨碎过滤，收集滤液，调整根肿病菌浓度至1×10⁸个/ml，再用营养液稀释至浓度为1×10⁶个/ml；

s4，接菌18-20d后，取出所述透明杯体，观察接菌十字花科植株根系生长情况，取主根成熟区制成至少5个1-2cm切片标本并在显微镜下观察，≥5个切片标本均未见根肿病浸染则为抗根肿病材料植株。

与现有技术相比，本发明的有益效果：

本发明避光杯体、杯盖及遮光板设计为种子萌发提供暗环境，透明杯体设计在不破坏栽培植物的同时，便于对植物根系生长的观测及拍照摄像等科学研究；水位刻度提高根肿病研究的精确性，观察门方便操作；播种盘推拉设计利于更换，本装置便于对十字花科抗根肿病材料的筛选，实用性强，适合推广使用。

附图说明

图1为本发明无土栽培培养杯示意图；

图2为本发明无土栽培培养杯杯盖竖向剖视图；

图3为本发明无土栽培培养杯杯盖俯视图。

附图标记说明：

1-透明杯体，2-避光杯体，21-观察门，3-水位刻度，4-杯盖，5-通气孔，6-导管孔，7-“u”形种植框，71-滑槽，72-遮光板，8-播种盘，81-播种网。

具体实施方式

下面结合附图1-3，对本发明的一个具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。

如图1-3所示，本发明的一种无土栽培培养杯，包括上端开口的透明杯体1、避光杯体2，透明杯体1套设在避光杯体2内，为种子萌发提供暗环境，透明杯体1设计在不破坏栽培植物的同时，便于对植物根系生长的观测及拍照摄像等科学研究，透明杯体1侧壁上沿竖直方向设置有水位刻度3，可定量控制培养液，避光杯体2侧壁上、与水位刻度3相对应处开设有观察口，且观察口边缘处铰接有观察门21，观察门21避光，确保暗培养环境的同时方便观测，避光杯体2开口上盖合有避光的杯盖4，杯盖4上依次开设有种植孔、通气孔5和导管孔6，避光杯体2外侧壁上设置有增氧泵，且增氧泵通过导管与导管孔6连通，为植株栽培提供氧气。

绕种植孔边缘设有贯穿杯盖4的“u”形种植框7，且“u”形种植框7的三个侧面均垂直于杯盖4设置，“u”形种植框7的相互平行的两个内侧面上设置有上、下两对横向的滑槽71，且每对滑槽71在两个内侧面上滑槽71的位置一一相对，其中一对相对的两个滑槽71靠近杯盖4上端设置，另一对滑槽71靠近杯盖4下端设置，位于“u”形种植框7上端的一对滑槽71之间滑动连接有遮光板72，位于“u”形种植框7下端的一对滑槽71之间滑动连接有播种盘8，播种盘8中部设置有播种网81，播种盘8与杯盖4的竖直距离≥10mm且≤15mm，便于更换，遮光板72和播种盘8的尾端均设有凸沿，易于推拉。

一种利用上述的无土栽培培养杯筛选十字花科抗根肿病材料的方法，包括如下步骤：

s1，向透明杯体1内注入营养液(阿夫多宁营养液)，在播种网81上放置十字花科种子，并使十字花科种子部分体积浸于营养液中，种植孔用遮光板72遮挡，培养种植直至种子发芽；

s2，s1中种子发芽后移除遮光板72，按照1次/d的频率补充营养液，如此栽培5-7d后向营养液中补充氧气；

s3，栽培至12-14d后，将s2中营养液替换成根肿病菌液；接菌7d后，将培养杯中的菌液更换为营养液，继续培养，得接菌十字花科植株；

其中，菌液按照以下方法制备：将染根肿病根块加蒸馏水后磨碎过滤，收集滤液，调整根肿病菌浓度至1×10⁸个/ml，再用营养液稀释至浓度为1×10⁶个/ml；

s4，接菌18-20d后，取出透明杯体1，观察接菌十字花科植株根系生长情况，取主根成熟区制成至少5个1-2cm的石蜡切片标本，并经苯胺兰染色后在显微镜下观察，≥5个切片标本均未见根肿病浸染则为抗根肿病材料植株。

需要说明的是，本发明中涉及到数值范围的，则表示在该数值范围内的数值均可用，包括端点值，为了防止赘述，本发明描述了优选的实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对实施例做出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。

显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。