海鲜菇液化专用菌种培养基及相应的培养法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种海鲜菇液化专用菌种配方和培养法。
【背景技术】
[0002] 食用菌是中国最具现代农业发展特征的优势产业之一。这不仅因为中国是世界最 大的食用菌生产和消费国，食用菌生产量大面广，而且更重要的是食用菌产业在生物技术 产业化和农业可持续发展中的良好载体和突出地位。目前我国的食用菌产业体系，有很多 不适应全球市场经济的要素，其中最主要的是产业经营的集约化、专业化程度低，生产要素 落后，生产工艺不尽完善，缺乏关键技术的支撑，其中最具代表性的是菌种的集约化高效繁 育技术，成了产业面临的主要瓶颈。目前普遍采用的传统三级固体菌种繁育工艺，生产效率 低，培养周期长，菌种染菌率高，无法突破手工化、作坊式低效生产模式，使规模企业与散户 制种处在同一竞争平台，这是造成目前食用菌生产安全、质量事故频发的主要根源，也是食 用菌企业效益欠佳的主要原因。国外如日本、韩国食用菌工厂化生产中目前已普遍采用液 体菌种技术，而我国在此领域缺乏规模化生产成功的经验与技术，所以加强菌种在规模化 生产中应用的研发，利用现代生物科技和生物工程技术，实现菌种（菌袋）的高效繁育已迫 在眉睫。
[0003] 传统三级固体菌种繁育工艺有3步（试管母种-瓶装原种-瓶装栽培种）：第1 级为试管母种，配方为PDA为主（去皮鲜马铃薯200克、葡萄糖20克、琼脂20、水1000ml)， 培养时间7-15天（根据菇种而异，海鲜菇一般为12-15天），1支母种转接5瓶原种。第2 级为瓶装原种（750ml)，配方以木肩、麸皮培养基为主（如香菇原种配方细木肩78%、麸皮 20%、白糖1%、石膏1%，含水量60 % )，培养时间45-60天（根据菇种而异），1瓶原种可 转接50瓶栽培种。第3级为瓶装栽培种（750ml)，配方以木肩、麸皮培养基为主（同原种配 方，培养时间35-45天（根据菇种而异），1瓶栽培种（湿重600克培养料）可转接20个出 菇袋，每袋出菇袋需要固体菌种30克。上述3级种工艺全程培养周期87-120天。该方法 所得的菌种按照常规的接种出菇袋法培育鲜菇时染菌率一般为5-10%。备注说明：上述固 体菌种在原种（第2级）、栽培种（第3级）阶段由于培养时间长，培养环境差，加上封口不 规范，会在发满菌丝的成品菌种表面隐形染菌，这种隐性感染的菌种被接种后，会变成显性 的污染（此时杂菌比食用菌菌丝生长快）。所以现有固体菌种风险很大，且很难避免。
[0004] 目前现有的食用菌液体发酵菌种（也称深层发酵）工艺流程为3步（试管母 种-三角瓶摇床发酵液体原种-发酵罐深层发酵液体栽培种）：第1级为母种，（制作法同 前）培养时间7-15天（根据葫种而异，海鲜葫一般为12-15天），1支母种转接2-3瓶三角 瓶摇床发酵液体原种（200ml)。第2级为三角瓶摇床发酵液体原种（500ml三角瓶中放入 200ml培养液），配方以去皮鲜马铃薯、葡萄糖、酵母膏、蛋白胨等为主，摇床培养时间8-10 天（根据菇种而异），1瓶液体原种可转接2000ml的3级发酵罐培养液（10%接种量）。第 3级为发酵罐深层发酵液体栽培种，配方同三角瓶摇床液体原种培养基，发酵需专用深层发 酵罐或发酵系统，培养时间4-5天（根据菇种而异），1升液体菌种可转接100个出菇袋。上 述液体菌种繁育工艺全程培养周期17-30天。该方法所得的菌种按照常规的接种出菇袋法 培育鲜菇时染菌率一般为2-5%。备注说明：液体发酵菌种工艺理论上菌种纯度高，大规模 发酵生产的染菌率在1% -5%之间（3级发酵罐中），加上染菌（细菌性为主）往往在发酵 后期，常规在线检验很难发现，导致用液体发酵菌种接种产生大批量出菇袋污染的生产事 故，教训惨痛。另外，液体菌种由于培养需用高浓度的有机氮和糖源等营养成分，这些成分 残留在菌液中被接入出菇袋，由于操作时不可避免有杂菌带入，所以残留的营养就成为了 杂菌的温床，增加了出菇袋接种后的污染风险。这是液体发酵菌种不能大规模应用于食用 菌生产的主要问题。
【发明内容】
[0005] 本发明要解决的技术问题是提供一种培养周期短、菌种质量高的海鲜菇液化专用 菌种培养基及相应的培养法。
[0006] 为了解决上述技术问题，本发明提供一种海鲜菇液化专用菌种培养基，其由以下 重量份的成分组成：
[0007]
【主权项】
1. 海鲜菇液化专用菌种培养基，其特征是由以下重量份的成分组成：
2. 根据权利要求1所述的海鲜菇液化专用菌种培养基，其特征是由以下重量份的成分 组成：
3. 权利要求1或2所述的培养基的制备法，其特征是包括如下步骤： 将玉米淀粉、细麸皮、小麦纤维素混合均匀，得配料I; 将葡萄糖、酵母浸膏、牛肉蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁加入水中，充分搅拌，得配料II; 将配料I和配料II充分混合后，得海鲜菇液化专用菌种培养基。
4. 利用权利要求1或2所述的培养基进行的海鲜菇液化菌种培养法，其特征是：将海 鲜菇母种依次进行以下步骤： 1)、菌种制作： 将海鲜菇液化专用菌种培养基装入培养瓶中，盖好微孔膜透气盖，高温高压灭菌，得灭 菌后培养基； 按照每200g的海鲜菇液化专用菌种培养基对应4.8?5.2g海鲜菇母种的接种量，于 无菌条件下在灭菌后培养基中接入海鲜菇母种，20?22°C黑暗培养20?22天，得液化专 用固体菌种； 2)、液化菌种制备： 将液化专用固体菌种在无菌条件下先经高速均质，然后按照1:100的稀释度稀释，稀 释后的所得物在稀释罐内于温度为20-23°C、通气比为1 :0.4(v/v/min)的条件下液化4? 6分钟；得海鲜菇液化菌种。
【专利摘要】本发明公开了一种海鲜菇液化专用菌种培养基，其由以下重量份的成分组成：玉米淀粉50-60份、葡萄糖1-2份、小麦纤维素10-15份、细麸皮15-25份、酵母浸膏1-1.5份、牛肉蛋白胨1-1.5份、磷酸二氢钾2-3份、硫酸镁1-1.5份、水100份。本发明还同时公开了利用上述培养基进行的海鲜菇液化菌种培养法，依次进行以下步骤：将海鲜菇液化专用菌种培养基高温高压灭菌，于无菌条件下在灭菌后培养基中接入海鲜菇母种，20～22℃黑暗培养20～22天；将所得的液化专用固体菌种进行稀释处理，得海鲜菇液化菌种。
【IPC分类】C05G3-00, A01G1-04
【公开号】CN104541983
【申请号】CN201510027583
【发明人】陈再鸣, 何伯伟, 陈青, 余维良, 郑明海
【申请人】浙江大学
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2015年1月20日