专利名称：微生物发酵生产混合长链二元酸的方法
技术领域：
本发明涉及一种混合长链二元酸的生产方法。
背景技术：
我国在世界上率先发明了利用微生物石油发酵生产十二碳二元酸的工艺，并产业化，并开发了利用微生物石油发酵生产十三碳二元酸、十四碳二元酸的工艺。但这些工艺均生产单组分长链二元酸，且所用的主要原料轻蜡油需经精馏。
发明内容
本发明的目的在于提供一种利用一种菌种生产混合长链二元酸，且工艺简单，易操作的微生物发酵生产混合长链二元酸的方法。
本发明的技术解决方案是一种微生物发酵生产混合长链二元酸的方法，其特征是包括下列步骤(1)菌种混合选择热带假丝酵母菌株，并进行1～3代的培养；(2)摇瓶种子将麦芽汁培养基在26～32℃条件下，于旋转摇床上培养40～48小时，培养成种液；(3)一级种子罐培养将种液放入一级种子罐中，接种，在26～29℃、300～360rpm搅拌速度下，培养35～42小时；(4)二级种子罐培养将经一级种子罐培养的菌液放入二级种子罐中，接种，在25～30℃、200～280rpm搅拌速度下，培养40～50小时；(5)发酵在发酵罐中加入轻蜡油和经二级种子罐培养的菌液，在25～30℃条件下，以150～210转/分钟的转速搅拌发酵150～200小时；(6)破乳分层发酵完成后，进行破乳粉层，并压至分层罐，放置分层1～3天，上层为残烃，下层为菌层，中层清液为混合长链二元酸，放出上层，收集中层。
(7)将收集得到的混合长链二元酸进行脱色、结晶、压滤、烘干得产品。
步骤(2)摇瓶种子时，摇床旋转转速为200～250转/分钟。步骤(3)、(4)中通风量均为1∶0.6～0.8。步骤(5)中通气量为1∶0.6～0.8，压力为0.7～0.8个大气压。脱色处理时采用活性炭进行脱色处理。步骤(5)中轻蜡油采用200#轻蜡油。
本发明用一种工艺、一种菌种生产混合长链二元酸，突破了只能利用单一菌种生产单品种二元酸的现状；生产工艺简单，易操作，所用的主要原料轻蜡油(如200#)可直接使用，而不必先精馏处理，减少了投资，节约了成本。
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
具体实施例方式一种微生物发酵生产混合长链二元酸的方法，包括下列步骤(1)菌种混合选择热带假丝酵母菌株，并进行1～3代的培养；
(2)摇瓶种子用3000ml三角瓶配制10Be’麦芽汁培养基，并将其在26～32℃(例26℃、29℃、32℃)条件下，于旋转摇床上以200～250转/分钟(例200转/分钟、220转/分钟、250转/分钟)转速培养40～48小时(例40、45、48小时)，培养成种液；(3)一级种子罐培养将种液放入一级种子罐中，接种，在400L装液量、2.4L接种量、1∶0.6～0.8(例1∶0.6、1∶0.7、1∶0.8)通风量、罐压1kg/m3、26～29℃(例26℃、27℃、29℃)、300～360rpm(例300rpm、330rpm、360rpm)搅拌速度下，培养35～42小时(例35、39、42小时)；(4)二级种子罐培养将经一级种子罐培养的菌液放入二级种子罐中，接种，在装液量3.5吨、接种量400L、1∶0.6～0.8(例1∶0.6、1∶0.7、1∶0.8)通风量、罐压1kg/m3、25～30℃(例25℃、27℃、30℃)、200～280rpm搅拌速度下，培养40～50小时(例40小时、45小时、50小时)；(5)发酵在发酵罐中加入200#轻蜡油和经二级种子罐培养的菌液，在25～30℃例25℃、27℃、30℃)、通气量为1∶0.6～0.8(例1∶0.6、1∶0.7、1∶0.8)，压力为0.7～0.8个大气压条件下，以150～210转/分钟(例150转/分钟、180转/分钟、210转/分钟)的转速搅拌发酵150～200小时；(6)破乳分层发酵完成后，进行破乳粉层，并压至分层罐，放置分层1～3天，上层为残烃，下层为菌层，中层清液为混合长链二元酸，放出上层，收集中层。
(7)将收集得到的混合长链二元酸采用活性炭进行脱色处理、结晶、用压滤机对结晶的产品压滤、用烘干机烘干得产品。
权利要求
1.一种微生物发酵生产混合长链二元酸的方法，其特征是包括下列步骤(1)菌种混合选择热带假丝酵母菌株，并进行1～3代的培养；(2)摇瓶种子将麦芽汁培养基在26～32℃条件下，于旋转摇床上培养40～48小时，培养成种液；(3)一级种子罐培养将种液放入一级种子罐中，接种，在26～29℃、300～360rpm搅拌速度下，培养35～42小时；(4)二级种子罐培养将经一级种子罐培养的菌液放入二级种子罐中，接种，在25～30℃、200～280rpm搅拌速度下，培养40～50小时；(5)发酵在发酵罐中加入轻蜡油和经二级种子罐培养的菌液，在25～30℃条件下，以150～210转/分钟的转速搅拌发酵150～200小时；(6)破乳分层发酵完成后，进行破乳粉层，并压至分层罐，放置分层1～3天，上层为残烃，下层为菌层，中层清液为混合长链二元酸，放出上层，收集中层。(7)将收集得到的混合长链二元酸进行脱色、结晶、压滤、烘干得产品。
2.根据权利要求1所述的微生物发酵生产混合长链二元酸的方法，其特征是步骤(2)摇瓶种子时，摇床旋转转速为200～250转/分钟。
3.根据权利要求1或2所述的微生物发酵生产混合长链二元酸的方法，其特征是步骤(3)、(4)中通风量均为1∶0.6～0.8。
4.根据权利要求1或2所述的微生物发酵生产混合长链二元酸的方法，其特征是步骤(5)中通气量为1∶0.6～0.8，压力为0.7～0.8个大气压。
5.根据权利要求1或2所述的微生物发酵生产混合长链二元酸的方法，其特征是脱色处理时采用活性炭进行脱色处理。
6.根据权利要求1或2所述的微生物发酵生产混合长链二元酸的方法，其特征是步骤(5)中轻蜡油采用200#轻蜡油。
全文摘要
本发明公开了一种微生物发酵生产混合长链二元酸的方法包括菌种混合、摇瓶种子、一级种子罐培养、二级种子罐培养、发酵、破乳分层、脱色、结晶、压滤、烘干等步骤。本发明用一种工艺、一种菌种生产混合长链二元酸，突破了只能利用单一菌种生产单品种二元酸的现状；生产工艺简单，易操作，所用的主要原料轻蜡油可直接使用，而不必先精馏处理，减少了投资，节约了成本。
文档编号C12R1/74GK1844404SQ20061003833
公开日2006年10月11日 申请日期2006年2月14日 优先权日2006年2月14日
发明者张肃净, 陈远童 申请人:南通圣诺鑫生物科技有限公司