专利名称：酵母培养物发酵工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种酵母培养物发酵工艺。
背景技术：
酵母培养物不同于常见的固态发酵(Solid state fermentation)活细胞酵母产品，它不含许多活性酵母菌，是复杂的发酵产品，包括酵母发酵 的代谢物、酵母和酵母赖以生长的载体。因为活细胞酵母产品易失活，且在瘤 胃内也要被降解，因此作用效果不稳定。而酵母培养物因为其效果不依赖于活 酵母菌，保存期长，产品性能稳定。要获得酵母培养物就需要将优秀的菌种筛选出来，通过发酵增殖，更重要 的是要使酵母破壁释放产物。人们早就知道利用酵母细胞的自溶作用来瓦解细 胞作为获取细胞内组分的有效手段(Nolf， 1991),细胞自溶是由于在一定条件 下触发了细胞能消化自身结构的自溶酶的分解作用所致(Chiu等1997 )。在适 当温度和盐浓度下，发酵一定时间的酵母细胞破壁可以自溶。蔡俊(2001 )研 究表明，化学破壁会造成一些营养成分的破坏，而且为有效成分的提取增加困 难，目前在生产工艺上只有美国DiamondV(达农威)公司称其酵母培养物产品益 康"XP"采取的是固态培养与液态培养相结合的工艺。但现有的酵母培养物发 酵工艺获得的酵母培养物有效营养成分活性损失都较大。按照中国工业发展规 划，我国配合饲料的需求量在未来的二十年里将会达到1-2亿p屯(盛云鹤，2001 )。 蛋白饲料的紧缺，使我国新型饲料蛋白添加剂的研制显得非常紧迫。而我国目 前的蛋白饲料酵母培养物的生产还不正规，基本达不到规定标准。而美国达农 威XP也正冲击着我国饲料蛋白巿场。因此，能够摸索出一种易调控、可以替代 达农威XP的酵母培养物的生产工艺，对我国蛋白伺料巿场来说具有十分重要实 用的意义。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种能够显著降低酵母培养物 有效营养成分活性损失的酵母培养物发酵工艺。用大麦种子、无菌生理盐水、 琼脂粉、豆粕、麸皮、玉来面、蒸馏水制备培养基。可采取菌种液态发酵工艺 制备酵母培养物，选用热带假丝酵母和酿酒酵母，确定酵母培养物液态深层发 酵的条件。研究发现影响破壁的最大的因子是发酵温度，其次是加盐量，影响 最小的是发酵时间。但考虑对酵母多糖和维生素含量的影响，优化发酵条件时 去掉了盐，本发明选取的发酵温度和时间能够使获得的酵母培养物有效营养成 分活性损失最低，达到80%以上破壁率。技术方案 一种酵母培养物发酵工艺， 其特征在于工艺步骤为，菌株的恢复培养、扩大培养、发酵、深层发酵破壁， 其中深层发酵破壁的条件为40—55'C恒温发酵20—32小时。有益效果按本发 明提出的工艺，热带假丝酵母和酿酒酵母多糖最高含量分别可达到200yg/ml 和150Mg/ml以上；维生素的损失率最低，热带假丝酵母和酿酒酵母维生素B1损 失率分别不高于12%和25%,维生素B2损失率分别不高于25%和20%,维生素B6 损失率分别不高于12%和8%。采用人工瘤胃研究不同酵母培养物对羊草纤维降 解率的影响。结果显示，热带假丝液态培养物、酿酒酵母液态培养物可以分别 提高中性洗涤纤维(NDF )降解率8. 02%、 6. 77% ( p<0. 05 );酸性洗涤纤维(ADF ) 降解率提高7. 73%、 9. 13 / (p<0. 05)。此外，添加酵母培养物会提高人工瘤胃内 微生物纤维酶活性和挥发性脂肪酸产量。表明按本发明工艺生产的酵母培养物 对瘤胃纤维降解有促进作用，效果和国际公认的益康"XP"相近。
具体实施例方式发酵选用热带假丝酵母和酿酒酵母。 1、菌株的恢复培养斜面上接种，3(TC恒温培养48小时，4X:保藏，4-6个月移植一次。2、 扩大培养在培养好的试管中加入无菌液体培养基摇匀，制成菌悬液，接种到容量为1L的装有300ml液体培养基的锥形瓶中，置于恒温振荡培养箱中S(TClSOr/min 培养20小时。3、 发酵发酵可以固态发酵或者液态发酵。液态发酵上述培养液以20%接种量接种到新的无菌液态培养基中，30°C 180r/min液态培养72小时。固态发酵将扩大培养液以30%接种量，接种到无菌谷物培养基中并混合均 匀，形成湿混合料，平铺在铺有三层无菌纱布的瓷盘中，再盖上三层无菌纱布 和盖子，3(TC条件下恒温培养72小时。通过调整pH值，改变固体培养料的酸 度，能够显著优化固态培养的条件，试验表明，酵母培养物固态培养在PH为5.5 的酸度下，酵母菌生长状况最好。4、 深层发酵破壁液态发酵或固态发酵的最佳条件为40—55。C恒温发酵20 —32小时，试验表明5(TC发酵28h效果最好。
权利要求
1.一种酵母培养物发酵工艺，其特征在于工艺步骤为，菌株的恢复培养、扩大培养、发酵、深层发酵破壁，其中深层发酵破壁的条件为40-55℃恒温发酵20-32小时。
2、 根据权利要求1所述的酵母培养物发酵工艺，其特征在于发酵可以为 固态发酵或者液态发酵，深层发酵破壁的条件为5(TC恒温发酵28小时。
3、 根据权利要求l所述的酵母培养物发酵工艺，其特征在于发酵选用热 带假丝酵母和酿酒酵母。
4、 根据权利要求l所述的酵母培养物发酵工艺，其特征在于菌株的恢复 培养工艺可以为，斜面上接种，3(TC恒温培养48小时，4。C保藏，4-6个月移植 一次。
5、 根据权利要求4所述的酵母培养物发酵工艺，其特征在于扩大培养工 艺可以为，在培养好的试管中加入无菌液体培养基摇句，制成菌悬液，接种到 容量为1L的装有300ml液体培养基的锥形瓶中，置于恒温振荡培养箱中3(TC 180r/min培养20小时。
6、 根据权利要求5所述的酵母培养物发酵工艺，其特征在于液态发酵工 艺可以为，培养液以20%接种量接种到新的无菌液态培养基中，30°C180r/min 液态培养72小时。
7、 根据权利要求6所述的酵母培养物发酵工艺，其特征在于固态发酵工 艺可以为，将扩大培养液以30%接种量，接种到无菌谷物培养基中并混合均匀， 形成湿混合料，平铺在铺有三层无菌纱布的瓷盘中，再盖上三层无菌纱布和盖 子，3(TC条件下恒温培养72小时。
8、 根据权利要求7所述的酵母培养物发酵工艺，其特征在于通过调整pH 值为5.5的酸度条件下，能够显著优化固态培养的条件。
全文摘要
本发明涉及一种酵母培养物发酵工艺，能够显著降低酵母培养物有效营养成分活性损失。技术方案一种酵母培养物发酵工艺，其特征在于工艺步骤为，菌株的恢复培养、扩大培养、发酵、深层发酵破壁，其中深层发酵破壁的条件为40-55℃恒温发酵20-32小时。对酵母培养物有效营养成分活性损失影响最大的是深层发酵破壁的发酵温度和时间，本发明选取的发酵温度和时间能够使获得的酵母培养物有效营养成分活性损失最低，达到80％以上破壁率。
文档编号C12N1/16GK101117622SQ20061015096
公开日2008年2月6日 申请日期2006年10月31日 优先权日2006年10月31日
发明者张永根, 军 潘, 王秋菊, 丽 许 申请人:哈尔滨远大牧业有限公司