专利名称：一种嗜酸乳杆菌冷冻干燥过程中的保护剂的制作方法
一种嗜酸乳杆菌冷冻干燥过程中的保护剂
技术领域：
本发明涉及一种嗜酸乳杆菌冷冻干燥过程中的保护剂。背景技术：
嗜酸乳杆菌是人体肠道中重要的生理微生物，具有维持人体内微生物生态平衡、 促进消化、防癌抗癌、增强免疫力、抗衰老等作用，与机体健康息息相关。近年来，随着微 生态学研究的不断深入和人们保健意识的增强，乳酸菌作为一种有益菌得到了广泛的研 究和开发，嗜酸乳杆菌高活性菌粉已广泛应用于保健食品，医药和食品等行业中，因此， 高活性嗜酸乳杆菌菌粉具有广阔的商业前景，目前商业生产的嗜酸乳杆菌菌粉活性多为 (6-8) X 1010cfu/go真空冷冻干燥技术是现代工业制备高活性菌粉常用的方法，然而，真空冷冻干燥 会造成微生物细胞的损伤、死亡及某些酶蛋白分子的钝化。大量研究表明适当浓度的保护 剂进入细胞内可以避免细胞膜的冷冻损伤，因此，添加了保护剂的菌种冷冻后，其存活率一 般都有较大的提高。然而，如果保护剂的选择或添加比例不当，还是会导致大量细胞失活。 合适配比的保护剂因菌种而异，单一保护剂并不能满足冷冻干燥制备高活性菌粉的需求， 理想的保护剂都是复合保护剂。复合保护剂中的各保护剂在冷冻干燥中均发挥着各自的作 用，同时相互间又具有协同作用，只有复合保护剂中各保护剂的配比及浓度达到协调时，才 能达到最佳的保护效果。
发明内容本发明所要解决的技术问题是提供一种嗜酸乳杆菌冷冻干燥过程中的保护剂，添 加该保护剂到嗜酸乳杆菌中，可以使菌种的存活率提高46. 8倍。为实现上述目的，本发明提供了一种嗜酸乳杆菌冷冻干燥过程中的保护剂，其配 方组成为脱脂奶粉70-120g/L、甘油40-80mL/L、海藻糖30_70g/L、抗坏血酸0. 5_2g/ L、氯化钠3-8. 5g/L、明胶0-5g/L。本发明嗜酸乳杆菌冷冻干燥过程中的保护剂与现有技术相比，至少具有以下优 点采用本发明的保护剂，可以使嗜酸乳杆菌在冷冻干燥过程中的存活率高达98.3%，嗜 酸乳杆菌菌粉活性达1 X lO^cfu/g与没有添加该保护剂嗜酸乳杆菌在冷冻干燥过程中的 存活率(2. 1% )相比，提高了 46. 8倍。
具体实施方式将嗜酸乳杆菌于MRS培养基中培养24h，然后以转速为6000r/min离心lOmin收集 菌体，然后，用生理盐水清洗菌体2次，离心弃去上清液；用生理盐水将上述处理后的菌体 配制成8士0.5X101(lCfU/mL的菌悬液，然后，按照体积比为1 3将菌悬液与保护剂溶液混 合均勻，装于冻干管中，装样高度为0. 3-0. 5cm，室温下静止30min后，放入_35°C冰箱中预 冻24h后，放入真空冷冻干燥机中，于温度为_56°C，真空度为4-6Pade的条件下冻干24h ；最后，用生理盐水复溶，MRS固体培养基计数，测定菌粉活性和菌体存活率。对不同配比的保护剂对嗜酸乳杆菌菌粉的存活率的验证结果如表1 表1不同配比保护剂对冷冻干燥制备菌粉效果的验证 由上述表格可知，当保护剂以配比为脱脂奶粉100g/L、甘油60mL/L、海藻糖50g/ L、抗坏血酸2g/L、氯化钠8. 5g/L、明胶lg/L时，其在嗜酸乳杆菌菌粉在冷冻干燥过程中的 保护效果最好，嗜酸乳杆菌菌粉的存活率高达98. 3%，与没有添加保护剂相比，存活率提高 7 46. 8倍，菌粉活性可达1 X 10ncfu/go以上所述仅为本发明的一种实施方式，不是全部或唯一的实施方式，本领域普通 技术人员通过阅读本发明说明书而对本发明技术方案采取的任何等效的变换，均为本发明 的权利要求所涵盖。
权利要求
一种嗜酸乳杆菌冷冻干燥过程中的保护剂，其特征在于其配方组成为脱脂奶粉70-120g/L、甘油40-80mL/L、海藻糖30-70g/L、抗坏血酸0.5-2g/L、氯化钠3-8.5g/L、明胶0-5g/L。
2.如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌冷冻干燥过程中的保护剂，其特征在于其配方组 成为脱脂奶粉:120g/L、甘油:80mL/L、海藻糖:70g/L、抗坏血酸0. 7g/L、氯化钠8. 5g/ L、明胶lg/L。
3.如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌冷冻干燥过程中的保护剂，其特征在于其配方组 成为脱脂奶粉:100g/L、甘油:60mL/L、海藻糖:50g/L、抗坏血酸:2g/L、氯化钠8. 5g/L、 明胶lg/L。
4.如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌冷冻干燥过程中的保护剂，其特征在于其配方组 成为脱脂奶粉70g/L、甘油:70mL/L、海藻糖:60g/L、抗坏血酸lg/L、氯化钠8. 5g/L、明 胶2. 5g/L。
5.如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌冷冻干燥过程中的保护剂，其特征在于其配方组 成为脱脂奶粉95g/L、甘油40mL/L、海藻糖:50g/L、抗坏血酸1. 25g/L、氯化钠5. 75g/ L0
6.如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌冷冻干燥过程中的保护剂，其特征在于其配方组 成为脱脂奶粉:110g/L、甘油:60mL/L、海藻糖:30g/L、抗坏血酸0. 5g/L、氯化钠3g/L、 明胶5g/L。
全文摘要
本发明提供了一种嗜酸乳杆菌冷冻干燥过程中的保护剂，其配方组成为70-120g/L的脱脂奶粉、40-80mL/L的甘油、30-70g/L的海藻糖、0.5-2g/L的抗坏血酸、3-8.5g/L的氯化钠，以及0-5g/L的明胶。该保护剂可以使冷冻干燥的嗜酸乳杆菌的存活率高达98.3％，与未添加保护剂直接冷冻干燥的乳杆菌的存活率(2.1％)相比，提高了46.8倍，菌粉活性可达1×1011cfu/g。
文档编号C12N1/20GK101875911SQ201010205879
公开日2010年11月3日 申请日期2010年6月23日 优先权日2010年6月23日 公开号201010205879.发明者王磊, 王长风, 石教锋, 舒国伟, 陈合 申请人:陕西科技大学 被以下专利引用 (1),