专利名称：显微操作针和分离样品的方法
技术领域：
本发明涉及一种显微操作工具，更具体地，涉及一种显微操作针以及利用该显微操作针分离样品的方法。
背景技术：
获取少量细胞和组织块样本进行检验是临 床中经常使用的检验手段。在样本量极其珍贵或须保证其最大活性的情况下，精确、有效地获得样本显得尤为重要。以囊胚的滋养层细胞活检为例，目前获得少量用于活检的滋养层细胞主要通过显微注射针的拉伸以及激光的辅助获得。选取需要量的细胞团，用显微注射针卡住并向外拉伸，使选取的细胞团与样本之间的连接拉长变细，然后用激光在拉长处进行切割，从而获得需要的细胞团。由于显微注射针没有切割功能，在拉伸过程中，经常使得整个囊胚与透明带分离，而且激光的介入使得热效应对胚胎的损伤加大，在一定程度上限制了其在临床上的推广。
发明内容
本发明的目的是提供一种显微操作针，用于精确、有效地获得少量紧密相连的细胞或组织块。本发明的显微操作针包括管体、连接管和针头,针头远离连接管一端具有凹槽。所述凹槽的形状可以是任意形状。作为优选实施方式，所述凹槽的形状为沿内陷方向逐渐变窄；更优选地，所述凹槽为尖角形；尖角的角度为0-90°，优选为15° -45°。所述凹槽的槽深为1-999 u m，优选为2-300 U m。所述凹槽的个数至少为I个，优选为2个。当针头具有2个或2个以上凹槽时，凹槽之间形成前叉结构。所述前叉结构可以是任何形状，如梯形、方形、尖叉形等等。优选地，所述前叉结构是尖叉形。作为优选实施方式，本发明的显微操作针包括管体、连接管和针头，针头远离连接管一端有两个凹槽，凹槽为尖角形，尖角的角度为15° -45°。两个凹槽之间形成两个尖叉结构。在一种实施方式中，所述针头的轴线方向与管体和连接管的轴线方向一致，成一直线。在另一种实施方式中，所述针头的轴线方向与管体和连接管的轴线方向有夹角a，夹角a为0< a彡90°，优选为30°彡a彡45°。优选地，针头的内径是1_999 u m,优选是5-30 U m ;外径是2-999 u m,优选是6-35u mD优选地，显微操作针的连接管沿管体至针头方向逐渐变细。作为优选实施方式，显微操作针的长度为2-25cm，优选为3-18cm。管体的外径为100-10000 u m,优选为 500-1000 u m ；内径为 99-9999 u m,优选为 499-999 u m ;管体的横断面形状可以是任何形状，如圆形、椭圆形、三角形、方形等等。
作为优选实施方式，所述显微操作针的材质可以是玻璃、石英、塑料、不锈钢、铜、金或银。管体、连接管和针头可以由同一材质一体制作而成，例如由玻璃一次拉制而成；也可以由不同材料焊接或粘结而成。本发明的显微操作针可以对各个时期的胚胎、细胞团、组织决、组织片、毛细血管等取样；为方便操作，可以采用显微操作仪上的固定臂、手持固定臂或由操作人员固定该显微操作针。本发明的另一目的是提供一种利用本发明的显微操作针分离样品的方法，该方法包括(I)将两根显微操作针的凹槽分别卡住需要分离的样品与其它样品的连接处；(2)将两根显微操作针的凹槽相对并相向搓动，分离样品。所述样品可以是各个时期的胚胎、细胞团、组织块、组织片、毛细血管等。本发明通过利用两个显微操作针的凹槽结构将样品固定在凹槽处，两根显微操作针同时从两个方向固定样品，相向运动，使样品连接处在被固定的同时被切割，快速、有效。同时，本发明的显微操作针的针头轴线与管体轴线可以有夹角，使用者可以根据实际需要制作具有不同夹角的显微操作针，以在不同情况下进行实验。本发明的显微操作针的有益之处在于1、精确快速地获得所需要的样品；2、不需要借助于激光及其它工具，减少对样品的损伤；3、操作简单，不需特别的经验，便于操作；4、可以适用于更多类型的样本分离，特别是紧密相连的样品。
图I:本发明一种显微操作针的结构示意图，其中管体、连接管和针头的轴线方向成一直线；图2:本发明另一种显微操作针的结构示意图，其中针头的轴线方向与管体和连接管的轴线方向有夹角a ;图3 :具有一个凹槽的针头结构示意图。
具体实施例方式现结合附图和具体实施方式
说明本发明，但本发明并不限于此。如图I所示，本发明的显微操作针包括管体I、连接管2和针头3，连接管2沿管体I至针头3方向逐渐变细，针头3远离连接管2 —端具有凹槽4。本领域技术人员应当理解，凹槽4的作用是卡住样品后通过两个操作针之间的相向运动而切割样品，从而分离样品，因此凹槽4可以是任意形状，如方形、梯形、尖角形等。实际应用中，凹槽的形状以沿内陷方向逐渐变窄，如尖角形为优，尖角的角度可以是0-90°，更好地可以是15° -45°。凹槽的槽深以卡住样品为准，可以是1_999 u m,最好是2_300 u m。凹槽的数量也可以是任意的，如一个凹槽4”(如图3)、两个凹槽4或4’(如图I或图2)、三个凹槽等。实际应用中，两个凹槽是最佳的。当针头具有两个或两个以上凹槽时，凹槽之间形成前叉结构，该前叉结构随凹槽结构不同可以是任何形状，如梯形、方形、尖叉形等；其中以尖叉形为最优，方便刺穿样品进行操作。前叉的长度与凹槽的深度一致。如图I所示，显微操作针针头3的轴线方向与管体I和连接管2的轴线方向可以、是一致的，即成一直线，此时显微操作针是直的；如图2所示，显微操作针针头3’的轴线方向与管体I’和连接管2’的轴线方向有夹角a，即显微操作针在针头3’处是弯的，夹角a范围为0< a <90°，更好地是30° < a <45°。本领域技术人员应当理解，在实际操作中，直的操作针和弯的操作针可以满足不同的需要。为实际应用需要，针头 的内径是1-999 u m,更好地可以是5_30 U m ;外径是2-999 u m,更好地可以是6-35 u m。显微操作针的长度可以是适于应用的任何长度，如2_25cm，更好地是3_18cm。管体的外径D1、内径dl可以是适于应用的任何范围，如外径Dl可以是100-10000 iim，更好地是500-1000 ii m ;内径dl是99-9999 u m,更好地是499-999 u m。管体横断面形状不限，可以是圆形、椭圆形、三角形、方形等等。这样的显微操作针的材质可以是玻璃、石英、塑料、不锈钢、铜、金或银。管体、连接管和前叉可以由同一材质一体制作而成，例如由玻璃一次拉制而成；也可以由不同材料焊接或粘结而成。用显微操作针分离样品时，需要用两根显微操作针同时固定样品，主要是利用针头处的凹槽卡住样品，然后将两根显微操作针的凹槽相对并相向搓动，利用凹槽的作用切割样品，从而达到分离的目的。这样的样品可以是各个时期的胚胎、细胞团、组织块、组织片、毛细血管等，特别是连接紧密的样品。相对于现有的样品分离方法，采用本发明的显微操作针对样品进行分离免除了因对细胞的过分拉扯、灼烧而对样品产生的损伤。下面通过一个具体实施例描述本发明的显微操作针的具体结构、制作过程和利用该显微操作针进行样品分离的过程。显微操作针的制作用外径0. 1cm、内径0. 08cm的毛细管作为材料，采用本领域常规技术拉制毛细管，得到长度为18cm、包括管体、连接管和针头的操作针胚,连接管沿管体至针头的方向逐渐变细。打磨操作针胚的针头部位，形成两个尖角形凹槽，槽角为35°，槽深为35pm;针头的内径是30 u m,外径是35 u m。两个凹槽之间形成两个尖叉结构，即得到显微操作针。显微操作针的使用实施例I :取一滋养层细胞部分孵出的囊胚。将两根针头外径为35 U m、内径为30 y m的显微操作针的凹槽卡住滋养层细胞与透明带的连接处；将两根显微操作针的凹槽相对并朝相对方向搓动；透明带外面的滋养层细胞与透明带内部的滋养层细胞分离。实施例2 取一滋养层细胞完全孵出的囊胚。将两根针头外径是30 U m、内径是25 ii m的显微操作针的凹槽卡住滋养层细胞与透明带的连接处；将两根显微操作针的凹槽相对并朝相对方向搓动；透明带外面的滋养层细胞与透明带内部的滋养层细胞分离。实施例3:取从拟胚体中分离出来的部分胚层结构。将两根针对外径是20 U m,内径是18 ii m的显微操作针的凹槽卡住所要获取的那部分胚层结构的根部；将两根叉状操作针的凹槽相对并朝相对方向搓动；所要获得的部分胚层块与主体胚层块分离。
权利要求
1.一种显微操作针，包括管体、连接管和针头，其特征在于，针头远离连接管一端具有凹槽。
2.根据权利要求I所述的显微操作针，其特征在于，所述凹槽的形状为沿内陷方向逐渐变窄，凹槽个数至少为1，槽深为1-999 μ m，优选为2-300 μ m。
3.根据权利要求2所述的显微操作针，其特征在于，所述凹槽为尖角形，尖角的角度为0-90。，优选为15° -45。。
4.根据权利要求2所述的显微操作针，其特征在于，当针头具有2个或2个以上凹槽时，凹槽之间形成前叉结构，所述前叉结构的形状为梯形、方形或尖叉形。
5.根据权利要求1-4任何一项所述的显微操作针，其特征在于，所述针头的轴线方向与管体和连接管的轴线方向一致，成一直线；或者所述针头的轴线方向与管体和连接管的轴线方向有夹角α，夹角α为0< α彡90°，优选为30°彡α彡45°。
6.根据权利要求1-4任何一项所述的显微操作针，其特征在于，所述针头的内径是1-999μ m,优选是 5-30 μ m ;外径是 2-999 μ m,优选是 6-35 μ m。
7.根据权利要求1-4任何一项所述的显微操作针，其特征在于，显微操作针的长度为2-25cm，优选为3-18cm ;管体的外径为100-10000 μ m，优选为500-1000 μ m ;内径为99-9999 μ m,优选为 499-999 μ m。
8.根据权利要求1-4任何一项所述的显微操作针，其特征在于，所述显微操作针的材质是玻璃、石英、塑料、不锈钢、铜、金或银。
9.一种利用权利要求1-8任何一项所述的显微操作针分离样品的方法，包括 (1)将两根显微操作针的凹槽分别卡住需要分离的样品与其它样品的连接处； (2)将两根显微操作针的凹槽相对并相向搓动，分离样品。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述样品是各个时期的细胞团、组织块、组织片、毛细血管。
全文摘要
本发明涉及一种显微操作针以及利用该显微操作针分离样品的方法。本发明的显微操作针包括管体、连接管和针头，针头远离连接管一端具有凹槽结构。利用本发明的显微操作针可以精确快速地获得所需要的样品。
文档编号C12M1/26GK102757892SQ20111011202
公开日2012年10月31日 申请日期2011年4月27日 优先权日2011年4月27日
发明者吴克良, 陈子江, 马金龙 申请人:山东大学附属生殖医院